Меню Рубрики

Нейтрофилы при астме понижены

В периоде ремиссии цифровые показатели превышают средние нормальные показатели (4 500 000 — 5000000 в 1 мм 3 ). Средние цифры гемоглобина и эритроцитов наблюдались у больных в периоде осложнения бронхиальной астмы. Среди наших больных, как упоминалось выше, преобладали гиперстеники, у которых в нормальных условиях количество эритроцитов и гемоглобина значительно выше по сравнению со средней нормой.

Одна из причин, с которой связывают эритроцитоз, наблюдаемый у больных бронхиальной астмой (М. Д. Тушинский, 1940, Г. Г. Газенко, Б. А. Камбур, А. А. Клементьева, 1935),— это реакция костного мозга на гипоксию. Такая точка зрения, по нашему мнению, заслуживает внимания.

Количество лейкоцитов у наших больных вне приступов было в пределах от 4200 до 19 600 при норме в 6 000—8 000 в 1 мм 3 . В среднем количество лейкоцитов было на верхней границе нормы — 8 800.

Если распределить больных по периодам заболевания, то в периоде обострения инфекции преобладали больные с повышенным по отношению к средней норме количеством лейкоцитов и с выраженным лейкоцитозом. В периоде ремиссии преобладали больные с нормальным числом лейкоцитов и с наклонностью к лейкопении. В периоде осложнений количество лейкоцитов чаще было в пределах средней нормы.

Во время приступов бронхиальной астмы и длительного астматического состояния мы наблюдали у 32% больных лейкоцитоз от 10 000 до 19 500 в 1 мм 3 , нормальное количество лейкоцитов — в пределах 6000 — 8000 — было у 51% больных, у остальных 17% больных мы наблюдали лейкопению.

Таким образом, лейкоцитоз мы наблюдали вне и во время приступов у тех больных, у которых было обострение инфекционных очагов, находившихся в верхних дыхательных путях, бронхах или легких. Лейкоцитоз чаще наблюдался в периоде обострения инфекции. Лейкопения чаще наблюдалась у больных в период ремиссии.

Данные, полученные у больных во время приступов, не соответствуют данным Е. В. Лошкаревой (1926), В. П. Луканина (1934), наблюдавших только лейкоцитоз, данным Р. А. Лурия (1939), получившего только лейкопению, и данным М. М. Большаковой (1926), обнаружившей нормальные цифры лейкоцитов.

Мы понимаем, что в данном случае количество лейкоцитов находится в прямой зависимости от состояния сенсибилизации организма и динамики токсикоинфекционного очага, на что и следует всегда обращать внимание у больных бронхиальной астмой. Надо сказать, что этот вопрос подлежит еще дальнейшему специальному изучению.

Количество эозинофилов в крови во время ремиссии было в пределах от 2 до 35%, среднее количество их составляло 8%. Наибольшее число эозинофилов наблюдалось у больных во время приступа бронхиальной астмы. Обострение инфекции у больных в периоде осложнений часто сопровождалось увеличением количества эозинофилов.

На основании наших наблюдений, при наличии клинических данных и эозинофилии в крови, следует ставить диагноз бронхиальной астмы. При этом надо учитывать, что по одному исследованию крови в период тяжелого приступа бронхиальной астмы, когда эозинофилии нет, нельзя отклонять диагноз бронхиальной астмы.

Количество сегментоядерных нейтрофилов вне приступов было несколько понижено по сравнению с нормой (45,5%) с колебаниями от 26 до 62%. Палочкоядерные нейтрофилы в среднем составляли 3,2% с колебаниями от 1,0 до 12%. Во время приступов бронхиальной астмы количество нейтрофилов возрастало, преимущественно за счет сегментоядерных, и достигало 60—75%, в среднем составляя 66%. Количество палоч-коядерных нейтрофилов в большинстве случаев оставалось без перемен.

При распределении больных бронхиальной астмой по периодам оказалось, что в периоде инфекционной аллергии преобладали больные с высокими цифрами палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и, наоборот, в периоде ремиссии у больных были низкие цифры, но с более значительными колебаниями количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов.

Суммируя изложенное выше, мы делаем вывод, что у больных бронхиальной астмой во время ремиссии имеется наклонность к нейтропении. Во время приступов бронхиальной астмы количество нейтрофилов нарастает до нормальных или субнормальных цифр (60—70%).

Количество базофилов колеблется от 0 до 1% вне и во время приступа бронхиальной астмы.

Количество лимфоцитов у больных вне приступа было в среднем равно 38% с колебаниями от 24 до 54%. Во время приступов количество лимфоцитов снижалось в среднем до 18% с колебаниями от 10 до 31%.

Наши данные совпадают с наблюдениями Е. В. Лошкаревой (1926), М. М. Невядомского (1925), Брея и Сигни (1937) и др.

Количество моноцитов у наших больных вне приступов было в пределах нормы, в среднем оно было равно 6,2% с колебаниями от 2 до 12%. Во время приступов и астматического состояния намечалось некоторое недостаточно отчетливое снижение числа их: в среднем число их было равно 5% с колебаниями от 1 до 9%.

Подытоживая все вышеизложенное о морфологическом составе крови у больных бронхиальной астмой, можно сделать вывод, что состав периферической крови во время ремиссии и во время приступов изменяется. Во время ремиссии количество гемоглобина у большинства больных было выше средней нормы, выявлены также эозинофилия (в среднем 8%), лимфоцитоз (в среднем 38%), нейтропения (в среднем 38,5%); отчетливых изменений количества моноцитов и базофилов не наблюдалось.

Во время приступа у больных бронхиальной астмой можно отметить некоторое увеличение количества гемоглобина (в среднем на 6%) и количества эритроцитов (в среднем до 500 000 в 1 мм 3 крови), что сочетается с наклонностью к лейкопении. При этом отмечено нормальное или субнормальное количество палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, увеличение количества эозинофилов, наклонность к лимфоцитозу и у некоторых больных, из группы находившихся в периоде осложнений, резко выраженная эозинофилия и лимфоцитоз.

Таким образом, эозинофилия является у больных бронхиальной астмой важным симптомом заболевания, подтверждающим его аллергическое происхождение. Наиболее выражена эозинофилия во время приступа бронхиальной астмы и у больных, длительно и тяжело болеющих бронхиальной астмой. Большой интерес представляет сочетание эозинофилии и лимфоцитоза, о чем имелись сообщения в литературе еще в 1926 г. (Е. В. Лошкарева).

Роль лимфоцитов по литературным данным, полученным за последние годы, весьма существенна в явлениях иммунитета. Продукты, освобождающиеся в процессе распада лимфоцитов, обладают высокой физиологической активностью. По Догарти, Чейзу и Уайту (Dougherty, Chase, White, 1945), из лимфоцитов под влиянием гормонов надпочечников могут освобождаться гамма-глобулины, из которых образуются антитела. Также следует учитывать возможность освобождения из лимфоцитов при их распаде нуклеиновых кислот.

Если учесть, что эти изменения в организме больных бронхиальной астмой происходят одновременно с колебанием количества 17-кетостероидов, которые связаны, как видно из наших наблюдений, с инфекционным процессом в органах дыхания, то вырисовываются следующие одновременно появляющиеся симптомы: эозинофилия, лимфоцитоз, нарастание в крови гамма-глобулинов (Л. А. Глинская, 1959) и падение количества 17-кетостероидов (Н. Н. Зубцовская, 1962).

Все эти симптомы наиболее выражены у больных с тяжелым течением заболевания, у которых из воспалительных очагов органов дыхания продолжается сенсибилизация организма. Однако у большинства больных эти изменения носят функциональный характер и с прекращением сенсибилизации, во время ремиссии, эти симптомы не определяются.

Изучение реакции оседания эритроцитов у больных бронхиальной астмой также представляет практический интерес.

По литературным данным, реакция оседания эритроцитов может быть нормальной (И. Е. Ландсман, 1956, Б. М. Прозоровский, 1934, В. П. Луканин 1934, и др.), замедленной (И. Е. Ландсман 1956, М. Израэль, 1938) и ускоренной (И. Е. Ландсман, 1956). Ускоренная реакция оседания эритроцитов отмечалась при осложнении бронхиальной астмы инфекционными заболеваниями (Брей, 1937; Уесткот и Спейн — Westcott, Spain, 1933).

Реакция оседания эритроцитов в большинстве случаев рассматривалась исследователями без учета состояния в организме токсикоинфекционного очага.

У обследованных нами больных реакция оседания эритроцитов была нормальной — в пределах от 6 до 15 мм— в 45% случаев, замедленной — от 0 до 5 мм — в 17% случаев и повышенной— от 17 мм и выше — у 38% больных.

Установлено, что показатели реакции оседания эритроцитов выше средней нормы были по преимуществу у больных с инфекцией в органах дыхания. В период ремиссии у больных отмечаются нормальные или чаще пониженные показатели реакции оседания эритроцитов.

Ускоренная реакция оседания эритроцитов, наблюдавшаяся в периоде осложнений, объясняется наличием у больных острой или обострением хронической инфекции, чаще хронической неспецифической пневмонии.

У больных во время ремиссии, наоборот, реакция оседания эритроцитов была замедленной или нормальной, что позволяет нам говорить об отсутствии у больных в это время активных проявлений инфекции.

При изучении стойкости коллоидов сыворотки крови у наших больных ставилась задача подтвердить наличие инфекционного процесса в органах дыхания, для этого мы пользовались методикой Матеффи, видоизмененной Брюловой.

Была обследована сыворотка крови у 34 больных бронхиальной астмой: у 12 больных — с очагами инфекции, у 12 больных — в периоде осложнений и у 10 больных —в периоде ремиссии.

У 7 из 12 больных бронхиальной астмой в периоде ремиссии стойкость коллоидов сыворотки крови по отношению к коагулянту— сернокислому алюминию — была повышена; у 8 из 12 больных с активными проявлениями инфекционной аллергии стойкость коллоидов сыворотки крови по отношению к этому коагулянту была понижена. У 8 из 10 больных в периоде осложнений стойкость коллоидов сыворотки крови была понижена.

источник

Нейтрофилы активно включаются в воспалительный процесс у больных бронхиальной астмой, и это не свидетельствует об инфекционной природе воспаления: активированные аллергеном тучные клетки выделяют высокомолекулярный фактор хемотаксиса нейтрофилов, также активированные макрофаги выделяют фактор, активирующий нейтрофилы и привлекающий их в очаг воспаления из периферической крови. В экспериментальной модели бронхиальной астмы показано, что при развитии только ранней астматической реакции возникает нейтрофильное воспаление, а при развитии как ранней, так и поздней астматической реакции воспаление сразу же носит черты эозинофильно-нейтрофильного. Считается, что в дистальных отделах дыхательных путей у здоровых лиц содержатся лишь единичные полиморфноядерные нейтрофилы, а увеличение их количества является признаком воспалительной реакции и следствием воздействия поллютантов.

Известно, что профессиональная бронхиальной астма, вызванная толуеном, ассоциируется с повышением чувствительности бронхов, развитием острого нейтрофильного воспаления со вторичным привлечением эозинофилов. Активированные макрофаги и нейтрофилы вызывают дисбаланс системы протеолиз-ингибиторы протеолиза, выделяя различные протеазы, что приводит у больных бронхиальной астмой к относительному недостатку ингибитора протеаз. Неспецифическая гиперреактивность бронхов, астматический бронхит и БА обнаружены у лиц с генетическим дефицитом ингибитора протеаз, в частности у гетерозиготных носителей гена дефицита ингибитора протеаз. В процессе фагоцитоза клетки, содержащиеся в бронхах, и прежде всего макрофаги и нейтрофилы, выделяют повышенное количество различных активированных метаболитов, высокий уровень которых, либо недостаточная активность антиоксидантных механизмов приводят к «окислительному стрессу», который играет большую роль в усилении процессов воспаления в бронхолегочной системе и повреждении легочной ткани.

В результате действия свободных радикалов окислению подвержены все молекулы, но наибольшую опасность представляет окисление нуклеиновых кислот, ферментов и ненасыщенных липидов — процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ). Активация ПОЛ приводит к повышению ригидности мембранных фосфолипидов, снижает их текучесть и может вызвать снижение чувствительности адренорецепторов. У больных бронхиальной астмой выявлен дефицит антиоксидантных систем, в том числе генетически обусловленный, что снижает компенсаторные возможности при свободнорадикальной патологии и в итоге приводит к усилению бронхиальной обструкции за счет бронхоспазма и отека слизистой в условиях стимуляции кининогенеза и повышения сосудистой проницаемости. По мнению Абдусаламова А.Б. и Шафера A.M. активация ПОЛ выявляется практически у всех больных бронхиальной астмой, и этот процесс играет роль в формировании гиперреактивности бронхов. Имеются данные о большем дисбалансе в системе ПОЛ-антиоксиданты у больных инфекционно-зависимой бронхиальной астмой.

Нейтрофилы относятся к клеткам, наиболее интенсивно образующим активные формы кислорода (АФК), и у больных БА в зависимости от степени тяжести и фазы заболевания обнаружено снижение присущего здоровым ингибирующего влияния тромбоцитов, углекислоты и гистамина на выделение АФК. Гистамин модулирует генерацию АФК лейкоцитами, а АФК усиливают выделение гистамина, формируя тем самым «порочный круг». Снижение ингибирующего действия тромбоцитов на выделение АФК может быть связано с функциональными и морфологическими изменениями тромбоцитов у больных БА: они становятся сферическими, возрастает количество тромбоцитов с псевдоподиями и выявляются нарушения их ультраструктурной организации. В связи со значимой ролью АФК некоторые авторы предлагают выделить самостоятельный свободнорадикальный клинико-патогенетический вариант БА. Тесно связанные с выделением АФК процессы ПОЛ вызывают повреждение клеточных мембран, усиливают их проницаемость, потенцируют воспаление бронхов, вызывают гиперкоагуляцию, вплоть до появления маркеров ДВС-синдрома, что определяет прогрессирование микроциркуляционных нарушений у больных ХНЗЛ.

АФК могут играть роль в формировании аутоиммунного процесса, поскольку одна из форм АФК — пероксид водорода — относительно устойчив, способен к длительной диффузии и окислительной модификации эндогенных макромолекул, что вызывает появление тканевых структур со свойствами аутоантигенов. Усиление продукции АФК, особенно в условиях истощения антиоксидантной защиты, что типично для больных ХНЗЛ, связано также с присоединением вирусной и бактериальной инфекции.

У больных бронхиальной астмой выявлен так называемый «макрофагальный дефицит»: уменьшение количества макрофагов в бронхиальных смывах, обнаружено снижение количества моноцитов в периферической крови, функциональная неполноценность мононуклеаров,- снижение фагоцитоза, угнетение Fc и СЗ рецепторов на мембранах моноцитов и альвеолярных макрофагов. Все это позволяет рассматривать «макрофагальный дефицит» в лаважной жидкости как маркер нарушения местной защиты бронхов. У 50% больных БА, обследованных нами, было выявлено снижение количества макрофагов в бронхиальных смывах. В связи с этим понятна частота выявления патогенной (пневмококки, гемофильная палочка), условно-патогенной и непатогенной микрофлоры (различные виды кокковой флоры, протей, нейсерии) в материалах бронхиальных смывов и мокроты в диагностически значимых титрах (частота обнаружения патогенной и непатогенной микрофлоры 0,325 и 0,722 соответственно).

Обнаружение непатогенной и условно-патогенной микрофлоры означает колонизацию бронхиального дерева микроорганизмами, и нам с помощью COMOD-технологии удалось выявить достоверную связь этого феномена с развитием эозинофильного воспаления, тяжестью приступов удушья и дисбалансом некоторых биологически активных веществ (БАВ) и в частности, компонентов калликреин-кининовой системы (ККС). При этом отсутствовали клинические признаки активного воспалительного процесса и не было связи с фазой заболевания, в отличие от выявления патогенной микрофлоры, связанной с фазой обострения БА, явными клиническими признаками инфекции и чаще обнаруживаемой у курящих мужчин с признаками хронического обструктивного бронхита.

источник

Известно, что кровь – функционально очень нагруженный элемент организма. Поэтому кажется естественным, что чем дальше, тем больше появляется различных анализов крови, позволяющих диагностировать то или иное заболевание. Так, недавно уже сообщалось о появлении анализа крови, по которому можно диагностировать болезнь Альцгеймера ещё до появления симптомов. Тот анализ выявлял недостаток определённых метаболитов в крови, что являлось сигналом болезни Альцгеймера.

В статье Sackmann et al. Characterizing asthma from a drop of blood using neutrophil chemotaxis, опубликованной в одном из ведущих научных журналов PNAS, речь идёт об анализе крови, позволяющим диагностировать у человека астму. (Пресс-релиз The key to easy asthma diagnosis is in the blood опубликован на сайте UW-Madison – ВМ.)

Астма – болезнь, характеризующаяся хроническим воспалением дыхательных путей, при которых у человека возникают приступы удушья, одышки, кашля. На данный момент в мире насчитывается более 300 млн больных этим заболеванием.

Существует ряд тестов, направленных на диагностику заболевания, типа спирографии или пикфлуометрии. Однако они в большинстве своём они направлены на оценку функционального состояния лёгких и бронхов — например, определяют объем и скорость вдыхаемого воздуха, его химический состав. Существенный недостаток этих методов – их косвенность. Они не позволяют диагностировать болезнь «напрямую». Дополнительный минус состоит в том, что такие тестирования срабатывают в том случае, если симптомы астмы проявляются у человека именно на момент посещения врача.

Таким образом, вопрос об изобретении качественного теста, способного выявлять бронхиальную астму, более чем актуален.

Здесь-то и выходит на первый план многофункциональность крови. С процессом любого воспаления связано увеличение в крови количества иммунных клеток определенного типа – нейтрофилов. Эти клетки, циркулируя по кровеносному руслу, способны выходить из кровеносного сосуда и мигрировать к очагу заражения, для того чтобы «проглотить» и «переварить» бактерии или те клетки, которые оказались заражены (этот процесс называется фагоцитозом).

Каким образом нейтрофил узнаёт, где в ткани находится очаг воспаления? Для этого существует специальный механизм хемотаксиса. Нейтрофил способен чувствовать специальные химические сигналы – вещества, которые образуются при воспалении. Таким образом, воспринимая эти сигналы, он, как собака-ищейка, двигается по градиенту этих веществ, то есть туда, где их концентрация максимально высока.

На тестировании функции хемотаксиса нейтрофилов и основывается метод диагностики бронхиальной астмы, предложенный специалистами из Висконсинского университета (Мадисон, США).

Метод был назван авторами KOALA (kit-on-a-lid-assay). По своей сути он довольно прост и чем-то напоминает спортивные соревнования по бегу. В специально сконструированной маленькой камере из капли крови выделяются только нейтрофилы, что занимает не более 5 минут. На следующем этапе нейтрофилы начинают мигрировать с помощью хемотаксиса по дорожкам из нанесённого на поверхность хемоаттрактанта – вещества, которое служит «приманкой» для нейтрофила. Далее с помощью специального программного обеспечения на компьютере анализируются скорости миграции нейтрофилов.

Читайте также:  Бронхиальная астма сочетанного генеза

С помощью описанного метода авторы провели исследование 34 пациентов, в котором им достоверно удалось отличить пациентов с астмой от пациентов с другим воспалительным заболеванием – аллергическим ринитом («сенная лихорадка»).

Проведённое исследование достоверно показало сниженную скорость миграции нейтрофилов у пациентов с астматическим заболеванием. Именно эта характеристика и может в перспективе оказаться маркером в диагностировании этой болезни.

Ясно, что для введения такого теста в повсеместную практику ещё необходимо провести статистическое исследование большого количества пациентов, однако уже сейчас видны его большие плюсы: простота – необходимо всего лишь небольшое количество крови, сам анализ не очень долгий; небольшая стоимость – камера изготавливается из кусков обычного пластика; точность – анализ проводится на клеточном уровне.

источник

Во многих других статьях этого сайта мы уже разбирали вопросы о том, какие факторы могут вести к повышению или снижению разных видов лейкоцитов. Как правило, к возрастанию их числа ведут какие-то специфические причины, зависящие от того, какие функции выполняет в организме та или иная клетка. Например, лимфоциты борются с вирусами, так что их число растет при вирусных инфекциях. Снижение же в основном происходит под действием более общих причин, которые вызывают угнетение образования всех лейкоцитов. Количество нейтрофилов и его изменения тоже определяются перечисленными закономерностями. Низкие нейтрофилы могут быть результатом наличия у больного различных заболеваний и состояний.

Вообще, при инфекционных процессах количество нейтрофилов возрастает, потому что потребность в этих клетках увеличивается, и организм стремится ее восполнить. Под действием определенных веществ, выделяемых как самими микробами, так и клетками иммунитета, красный костный мозг начинает работать усиленно, выбрасывая в кровь все новые порции нейтрофилов. Нормальное количество всех лейкоцитов в крови составляет 3-9 миллиардов в литре. При ряде болезней их число может возрасти до 20-30 миллиардов, и это главным образом за счет описываемого вида клеток.

К сожалению, ресурсы организма исчерпаемы. Если человек не выздоравливает, наступает момент, когда костный мозг «устает» и перестает реагировать на тревожные сигналы, заставляющие его вырабатывать нейтрофилы. Между тем, эти клетки в тканях и кровотоке продолжают погибать в борьбе с микробами. Все это приводит к уменьшению нейтрофилов ниже обычного уровня.

При этом очень часто наблюдается сдвиг лейкоцитарной формулы вправо. Так как новые клетки не образуются, а молодые формы нейтрофилов постепенно «стареют», в анализах в итоге определяется лишь небольшое количество «старых» форм (сегментоядерные нейтрофилы), пониженных меньше нормы.

Есть причины, которые влияют на начальные стадии образования этих клеток. Низкие нейтрофилы формируются «благодаря» тому, что у человека подавляется работа костного мозга. Это происходит под действием некоторых профессиональных вредностей у лиц, работающих на производстве опасных веществ и ядов. Также подобное происходит при бытовых и других отравлениях, не связанных с профессиональной деятельностью человека.

При заболеваниях, не имеющих связи с системой крови, тоже может происходить падение уровня нейтрофилов ниже обычного. Это, как правило, обусловлено приемом препаратов, агрессивно воздействующих на кроветворение.

Способностью подавлять образование нейтрофилов обладают гормоны-кортикостероиды. Эти вещества образуются в организме человека в надпочечниках. В норме они вырабатываются там в небольших количествах и участвуют в определенных физиологических процессах. Искусственно полученные гормоны в больших дозах вводят в организм, так как они обладают рядом полезных лечебных эффектов. К сожалению, они негативно влияют на состояние крови. Поэтому при лечении ими тяжелой бронхиальной астмы, аутоиммунных процессов и других заболеваний у пациентов могут наблюдаться побочные явления в виде уменьшения в крови форменных элементов.

Количество нейтрофилов также значительно падает при использовании средств для лечения рака: химиопрепаратов и лучевой терапии. Эти методики направлены на то, чтобы подавить образование и деление раковых клеток. К сожалению, медикаменты и ионизирующее излучение не обладают прицельным действием только на опухоли, так что заодно они поражают и другие интенсивно делящиеся ткани, в том числе и ткань костного мозга.

Из внешних воздействий, которые плохо влияют на количество нейтрофилов, уместно будет вспомнить и плохую экологическую обстановку. Долгое время проживая на территории с плохой экологией, человек может не замечать никаких неудобств. Однако повышение заболеваемости, появление склонности к аллергиям, изменение лабораторных норм (в том числе и понижение нейтрофилов) могут говорить о том, что здоровье человека в опасности.

Главным образом речь идет о врожденных болезнях, при которых из-за мутации в каком-то гене уменьшается выработка нейтрофилов. Например, при апластической анемии у больных вообще не функционирует костный мозг, так что образования клеток крови не происходит. Есть и другие подобные болезни, однако в любом случае они крайне редки. Поэтому если снижение нейтрофилов наблюдается у вас, то вряд ли это происходит под влиянием подобных болезней.

Подержание нормального количества нейтрофилов – важное условие для сохранения полноценной защиты организма от бактерий. Это причина, по которой надо заботиться о том, чтобы их число всегда было нормальным. Прицельно повлиять на состояние лишь одного вида клеток невозможно, так что важно думать о благополучии всей иммунной системы в целом.

Здоровый образ жизни и борьба с существующими заболеваниями для этого просто необходимы. Кроме того, важно принимать специальные средства, обладающие иммуномодулирующим действием. Среди них самым лучшим профилем эффективности и безопасности обладает средство под названием Трансфер Фактор. Мягкое благоприятное воздействие на функцию иммунной системы позволяет ему оказывать хорошее влияние на иммунный статус и здоровье любого человека.

источник

Ферментативная активность нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови при бронхиальной астме у детей

Дата публикации: 04.10.2016 2016-10-04

Статья просмотрена: 205 раз

Пирназарова Г. З., Тахирова Р. Н. Ферментативная активность нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови при бронхиальной астме у детей // Молодой ученый. — 2016. — №19. — С. 172-174. — URL https://moluch.ru/archive/123/33997/ (дата обращения: 29.06.2019).

The paper deals with studies of the enzymatic activity of neutrophils and lymphocytes of the peripheral blood in children suffering from bronchial asthma. A total of 40 children of young age were examined. In each child at different stages of the disease the author determined the index of succine-dehydrogenese activity of lymphocytes and the index of alkaline phosphatase activity of neutrophils. A conclusion was drawn that the enzymatic activity of neutrophils and lymphocytes of the peripheral blood changes depending on the stage of bronchial asthma. The indices of succine-dehydrogenese activity of lymphocytes and alkaline phosphatase activity of neutrophils may testify to the presence of a premorbid state and are valuable in prognostic aspect.

Актуальность. Известно, что распределение и активность ферментов в организме находятся в строгой зависимости от функции интенсивности осуществляемых при этом обменных процессов. Следовательно, по активности и содержанию тех или иных ферментов в клетке можно судить об ее деятельности как в нормах, так и в патологических условиях. С этой точки зрения выяснения состояние указанных систем позволит в какой-то мере оценить энергетические возможности клетки, интенсивность анаболических процессов, способность клетки к осуществлению соответствующих функций. Значительный интерес представляет изучение активности окислительно-восстановительных ферментов клеток крови при аллергических заболеваниях так, как в основе аллергических реакциях лежит реакция антиген-антитело, происходящая при активном участии клеток крови.

Сукцинатдегидрогеназа находится почти во всех тканях организма, ей приписывается важная роль в обмене веществ. Она участвует в цикле трикарбоновых кислот на конечном этапе, превращая янтарную кислоту в фумаровую. Понижение или повышение активности этого фермента тесно связано с изменением метаболизма в цитоплазме клеток, о чем свидетельствует совпадение наибольшей активности фермента с наибольшим содержанием РНК [1,2]. Ряд авторов наблюдая увеличение активности сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах, ретикулярных клетках, гистиоцитах при превращении их в макрофаги, т. е. в период активного иммуногенеза [3,4].

Целью исследования является изучение ферментативную активность лимфоцитов и нейтрофилов периферической крови у детей раннего возраста, страдающих бронхиальной астмой. В доступной нам литературе мы не нашли работ, освещающих этот вопрос.

Материалы иметоды исследования. Всего обследовано 40 детей с бронхиальной астмой, или астматическим бронхитом. Заболевание протекло на фоне хронической пневмонии I стадии у 11 детей, хронический тонзиллитом страдало 8, кожные проявления экссудативного диатеза наблюдались у 5, отек Квинке периодический возникал у 2 детей. Среди обследованных больных в возрасте от 1 года было 3, от 1 года 3 лет — 22 и старше 3 лет — 15 детей.

Исследования проводили у детей, которые поступали в момент приступа или вскоре после него. У большинства больных приступы в клинике повторялись. Каждый ребенок обследован в динамике от 2 до 5 раз в различные фазы бронхиальной астмы (перед приступам за 2–3 дня, в состоянии приступа, непосредственно после приступа и в межприступном периоде — от 2 до 4 недель после приступа). Нами были использованы цитохимические методики обнаружения сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов и щелочной фосфатазы нейтрофилов, исследован метод азосочетания и модифицирован метод Гомори.

Результаты иобсуждение. При анализе полученных данных выявлены изменения активности сукцинатдегидрогеназы в зависимости от фазы и обострения сопутствующего заболевания.

У подавляющего большинства детей, больных бронхиальной астмой без сопутствующих заболеваний активность сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов периферической крови заметно снижалась в период приступа, повышалась постепенно в постприступном периоде и соответствовала норме в межприступный период. В тех случаях, когда приступ возникал на фоне острой респираторной инфекции или обострения хронических очагов инфекции (пневмонии, тонзиллит), сукцинатдегидрогеназная активность оставалась в пределах нормы или было несколько ниже ее (табл. 1).

Индекс сукцинатдегидрогеназной активности лимфоцитов периферической крови

источник

Здравствуйте! Посоветуйте мне пожалуйста, что делать.
Мне 22 года, вес 58 и рост 165, без вредных привычек.
Месячные идут с 12 лет, обычно по 6 дней и начинаются чаще всего вовремя, но несколько раз за год не исключены задержки на три-пять дней в связи со стрессом или экзаменами. Полтора года назад был первый половой акт, год назад первый раз была на консультации у гинеколога по проблеме кандидоза, мне прописали противогрибковые средства, и проблема прошла. Также во время осмотра сделали узи и пап-тест, диагноз — здорова. Стараюсь поддерживать здоровье. Последние полгода подкорректировала свой образ жизни и питания: каждый день занимаюсь по часу силовыми упражнениями с аэробными элементами, на все группы мышц,стараюсь правильно питаться, исключаю сладкое и кондитеские, стараюсь употреблять сложные углеводы, витамины, клетчатку, кефир, белое мясо, но по утрам обязательно варю на завтрак натуральный кофе и пью много зеленого и травяных чаев.

Секс уже почти год с одним партнером, сначала использовали презерватив, но уже полгода без предохранения, не всегда регулярный, бывает раз в неделю, бывает 2 раза за день, заканчивается прерванным половым актом. У моего МЧ все в порядке со здоровьем, у нас очень доверительные отношения, гормональные контрацептивы никогда не применяла. Так как в детстве с 4 до 7 лет болела бронхиальной астмой и гормонального лечения мне хватило, специально воздействовать какими-то препаратами на свой организм я не хочу и боюсь, так как очень хочу ребенка возможно в ближайшем будущем.

Тем не менее, последнее время несколько раз за год при наступлении месячных чувствую сильные боли внизу живота, которые могут длиться первые 1-3 дня, хотя несколько лет назад болей обычно никогда не замечала . и месячные стали длиться до 7 дней.
Также выделения бывают очень сильные первые три дня, часто с кусочками ткани.
В последний раз месячные начались на три дня раньше срока, и в тот день безумно болел живот, пришлось пить нурофен и травяные чаи с ромашкой и крапивой. Когда боль прошла, я чувствовала много энергии и все равно занималась по часу физическими упражнениями. Шли очень обильно три дня , но потом боли не было. Вчера на четвертый день стали меньше, кровь шла только с мочеиспусканием. А к вечеру вообще прекратились. Я думала, что закончились, позанималась упражнениями. С вечера и до утра больше не было. Сегодня днем после прогулки я снова увидела кровь. на прокладке, но выделения снова идут не постоянно, только при мочеиспускании.
Что мне делать? Это могут быть симптомы какого-то воспалительного процесса? или это проблема на гормональном уровне? В норме такое быть не должно ? Как мне выявить причину .
Подскажите, пожалуйста, с чего начать обследование и какие анализы нужны. дело в том, что я второй год учусь за границей , и боюсь запустить здоровье. Нужно ли сдать кровь на гормоны, а потом с результатам записаться кгинекологу? нужно сделать узи? нужен ли новый пап-тест?
Спасибо большое за ответ.

С конца октября 2011 года внезапно появилась слабая боль посередине груди,сухой кашель, слабость, температура 37-37,2.Обратилась к терапевту по месту жительства, он поставил диагноз: о.бронхит аллергического типа? Терапевтом назначен рентген ОГК, выдано направление на консультацию к аллергологу. Результат рентгена ОГК: инфильтративных, очаговых теней не определяется, легочный рисунок несколько усилен, корни тяжистые,синусы б/о,сердце в размерах не увеличено. Общий анализ крови: WBC 7.6;RBC 4.48; HGB 143;HCT 0.418;MCV 93.3;MCH 31.9;MCHC 342; PLT S 318. Назначено лечение: амброксол, вентолин, лорано, травесил, ереспал,аскорутин. Аллерголог выдал направление в баклабораторию на посев из носа и горла, а также на общий IgE. Результат бакпосева: в горле обильный рост золотистого стаффилокка, из носа патогенные бактерии не обнаружены; грибов не обнаружено. Результат анализа крови на IgE- 9,77 МЕ/мл,референтные интервалы до 87,0.
Лечение у терапевта результата не дало, через неделю после амбулаторного лечения самочувствие ухудшилось. Кроме боли в груди появилась еще тяжесть,кашель усилился (без мокроты),слабость стала сильнее, появился непонятный болезненный спазм (ощущение как будто от середины груди и в горло прокатывается шар)- только днем, болят нижняя часть ребер и ощущение было, что ребра на размер больше, удушья не было, ночью кашля нет.
18.11.2011 направлена в облбольницу к пульмонологу на консультацию,который дал направление на бронхоскопию по результатам которой будет назначено лечение. От бронхоскопии я отказалась из-за побочных действий после ее проведения. Прошла спирографию с применением 200мкг сальбутамола. Спирометрия без сальбутамола: FVC- 3.52, долж-3.46;FEV1 – 3.41 долж-3.0;PEF L/s- 7.28 долж-6.86; FEV 1% -96.9 долж-82.5. Заключение: спирометрия нормальная. Спирометрия через 15мин после ингаляции сальбутамола: FVC ПОСТ- 3.72 ПРЕ -3.52; FEV1 ПОСТ – 3.44 ПРЕ -3.41; PEF L/s ПОСТ – 6.64 ПРЕ- 7.28; FEV 1% ПОСТ – 92.5% ПРЕ – 95.5. Заключение – проба отрицательная.
24.11.2011 обратилась в частную клинику за консультацией к пульмонологу.Пульмонолог дал направление на рентгеноскопию.Результат рентгеноскопии: легкие без очаговых и инфильтративных затемнений,обычной воздушности,легочный рисунок усилен,умеренно деформирован в прикорневых отделах,корни понижены в структуре,диафрагма четкая,синусы свободные,сердце и аорта в норме; заключение: прикорневой пневмофиброз. Пульмонолог на основании заключения рентгеноскопии поставила диагноз обострение хронического бронхита отягощенное остеохондрозом. Назначено лечение: лазолван внутривенно 10уколов; серрата 10дн.; ереспал сироп 14дн; рапитус -10дн.; бронхомунал – 10дн; дыхательная гимнастика; массаж на грудную клетку. Лазолван смогла проколоть только 6 уколов, рапитус не принимала из-за отсутствия в аптеках города, сделала 10 сеансов массажа на гр.клетку. Самочувствие немного улучшилось.
13.12.2011 легла на лечение в стационар пульмонологического отделения. Врач поставил диагноз ХОЗЛ 1стадия обострение ЛИО. Лечение: внутривенно латрен (капельницы), лазолван 10уколов, дексаметазон 3капельницы, сода-буфер, тиотриазолин, амплипульс на гр.клетку 10дн; ингаляция с фликсотидом 7дн. Улучшений нет. В процессе лечения сданы следующие анализы: 20.12.2011 анализ мочи: удельный вес 1021,белок не обнар.,сахар не обнар.,Эп пл ед в п/з; альфа 4-7 в п/зр; фосфаты; 14.12.2011 развернутый анализ крови: Ht -0,39; гемоглобин148;эритроциты 4,4;цветовой показатель 1,0; средний объем эритроцитов 89; тромбоциты 288; лейкоциты 14,3; нейтрофилы сегментоядерные 74; лимфоциты 22; моноциты 4;скорость оседания эритроцитов 7. Развернутый анализ крови 20.12.2011: Ht 0,47; гемоглобин155; эритроциты 4,8; цветовой показатель 0,97; средний объем эритроцитов 88; тромбоциты 331; лейкоциты 9,3; нейтрофилы палочкоядерные 2, сегментоядерные 59; эозинофилы 1; лимфоциты 26; моноциты 12; скорость оседания эритроцитов 5. Прошла УЗИ щитовидной железы – отклонений от нормы нет.
23.12.2011 направлена на консультацию к аллергологу в облбольницу.Аллерголог ставит диагноз бронхиальная астма возможно с аллергическим уклоном. Назначил принимать симбикорт 2 р в день в течение 3мес.
23.12.2011 сделала томографию гр.клетки режим сканирования – спиральный,контрастное усиление – ультравист 300 – 100мл в/в болюс.Результаты томографии: легкие полностью расправлены,равномерной пневматизации,без очаовых и инфильтративных изменений,легочный рисунок не изменен,трахея и бронхи I-V порядка проходимые,без внутрипросветной патологии,на доступных осмотру участках легочного ствола,легочных артерий и их ветвей внутрипросветных дефектов контрастирования не выявлено, средостение не расширено,патологических образований в средостении не обнаружено,лимфоузлы корней легких и средостения не увеличены,скопления жидкости в плевральных полостях и в околосердечной сумке не выявлено,листки плевры и перекарда не утолщены; костно-деструктивных изменений грудного отдела позвоночника,ребер и грудины не выявлено.
Лечение на стационаре пульмонологии значительных результатов не дало: спазм почти прошел (появляется иногда но не такой болезненный как раньше), тяжесть в груди не прошла,кашель не прошел (мокроты нет),периодически болят ребра.Спать могу только на спине,если ложусь на бок или на живот тяжесть усиливается,ощущение при этом такое как-будто внутри сжимается сосуд какой- то.
Помогите с уточнением диагноза и лечением. Буду благодарна за помощь.

Читайте также:  Бронхиальная астма неотложная помощь литература

источник

Анализ крови при бронхиальной астме используется для составления полной клинической картины. Расшифровка исследования позволяет установить тип болезни и её стадию. В соответствии с полученными результатами назначается необходимое лечение.

Анализы для подтверждения диагноза проводятся только после консультации с врачом. При посещении специалист проверяет наличие характерной симптоматики с помощью нескольких диагностических методов:

  • Спирометрия. Способ измерения объёма лёгких. Заключается в выдыхании всего воздуха из лёгких в специальный прибор.
  • Пикфлуометрия. Измерение максимальной скорости выдыхаемого воздуха. Требует систематического поведения. Может выполняться в домашних условиях с помощью портативного пикфлуометра.
  • Рентгенография лёгких или компьютерная томография. Применяется для исключения вероятности инфекционного поражения лёгких, инородных тел в дыхательных путях, недостаточности кровоснабжения.

С целью исключения вероятности общих патологий исследование включает в себя ЭКГ. Дополнительно может быть назначена флюорография лёгких – она поможет распознать ранние стадии туберкулёза.

Обязательно врач проводит сбор клинического и семейного анамнеза. Подтверждение диагноза происходит после получения результатов обследования. Для лабораторной диагностики у пациента проводят забор крови, мокроты, проводят исследование бронхоальвеолярного лаважа (диагностическая и терапевтическая медицинская процедура, предполагающая введение нейтрального раствора в бронхи и легкие, последующее его удаление, изучение состояния дыхательных путей и состава извлечённого субстрата).

Анализы при астме проводятся на основании медицинского учреждения. В список стандартных лабораторных методов входят следующие:

  • Общий анализ крови. В нём оценивается уровень гемоглобина, количество красных кровяных клеток (эритроцитов), лейкоцитов и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).
  • Коагулограмма. Изучает свёртываемость крови. Позволяет предупредить развитие тромбозов и кровотечений.
    Исследование мокроты. Определяет наличие инфекционных микроорганизмов. Дополнительно оцениваются органолептические показатели: цвет, запах, консистенция.
  • Биохимический анализ крови. Оценивается уровень сиаловых кислот, количество общего белка, билирубина, креатина, мочевины, наличие серомукоида и холестерина, уровень гаптоглобина.
  • Иммунологическое исследование крови. Оценивает защитные функции организма. Определяет уровень иммуноглобулинов, по типу которых происходит определение патологии.
  • Анализ бронхоальвеолярного лаважа. Подразумевает введение нейтрального раствора в лёгкие с последующим его удалением из бронхов. В извлечённом субстрате оценивается количество слизи, наличие инфекционных возбудителей, клеток эпителия лёгких, лейкоцитов.

Все анализы необходимо проводить натощак. Последний приём пищи перед анализом должен быть не ранее чем за 8 часов.

Этот метод чётко показывает слаженность работы внутренних органов. При астме в анализе обнаруживается рост белка фибриногена, повышенный уровень серомукоидов, сиаловых кислот. Забор крови для биохимического исследования осуществляется из вены. Перед выполнением этот исследования рекомендуется воздержаться от крепкого кофе (хотя бы за 8-10 часов) и курения (не менее чем 1 час).

Этот метод диагностики показывает изменение количества гемоглобина, уровня лейкоцитов. У пациентов с астмой наблюдается повышение гемоглобина, рост нейтрофилов, снижение эозинофилов, повышение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Забор крови может осуществляться как из вены, так и из пальца. Перед обследованием необходимо воздержаться от употребления спиртных напитков и жареной пищи не менее чем за 3 суток до исследования.

Оценивает состояние иммунной системы пациента. При астме наблюдается рост иммуноглобулинов G (IgG) и иммуноглобулинов E (IgE). Перед исследованием рекомендуется исключить курение и физические нагрузки. Исследуемый материал забирают из вены.

Ниже приведён пример общего анализа крови, в котором указаны нормальные показатели, характерные для здорового человека. Выделения показывают те пункты, которые оцениваются врачами при постановке диагноза.

В расшифровке врачу и пациенту необходимо обращать внимание на такие пункты:

  • Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) – превышение нормы свидетельствует о наличии патологии.
  • Эозинофилы – пациенты, у которых была выявлена астма, имеют пониженный уровень эозинофилов.
  • Нейтрофилы – рост их чиста показывает наличие астмы.
  • Гемоглобин – повышение уровня гемоглобина подтверждает астму.

При постановке диагноза используется совокупный результат, получаемый от нескольких анализов. Один метод исследования не может давать гарантии, что полученный результат достоверен. Поэтому врачи используют совмещение нескольких диагностических методик, чтобы определить болезнь.

Показатели могут колебаться в зависимости от стадии патологии. Поэтому может потребоваться исследование в динамике. Постоянный врачебный контроль показателей позволяет предотвратить обострение болезни. Лечение назначается на основании полученных результатов. Своевременное начало терапии позволяет минимизировать вероятность рецидивов в дальнейшей жизни.

источник

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему: Механизмы программируемой гибели лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов у больных бронхиальной астмой

1.1. Основные формы клеточной гибели.

1.1.1. Механизмы клеточной гибели.

1.1.3. Роль митохондрий в гибели клеток.

1.1.4. Рецепторный механизм гибели клеток.

1.1.5. Роль регуляторных белков в развитии апоптоза.

1.2. Механизмы патогенеза бронхиальной астмы.

1.2.1. Роль клеток в развитии бронхиальной астмы.

1.2.2. Роль цитокинов при бронхиальной астме.

1.3. Регуляция клеточной гибели.

1.3.1. Особенности апоптоза при бронхиальной астме.

Глава 2. Материал и методы.

2.3.1. Лабораторные методы исследования пациентов.

Исследование функции легких.

Оценка функции внешнего дыхания.

Бронхопровокационная проба с метахолином.

Определение неспецифического ^Е в сыворотке крови.

2.3.2. Выделение клеточных суспензий.

Получение лейкоцитарной массы.

Получение эозинофилов на градиенте плотности.

Определение абсолютного и относительного содержания клеток в периферической крови.

2.3.3. Анализ апоптотической гибели клеток.-.

2.3.3.1. Индукция апоптотической гибели клеток.

2.3.3.2. Микроскопические методы оценки апоптоза.

2.3.3.3. Молекулярные методы оценки апоптоза.

Электрофорез фрагментов ДНК клеток периферической крови.

2.3.4. Методы оценки экспрессии апоптотических факторов.

Оценка содержания транскрипционных факторов

2.4. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Клинико-функциональная характеристика больных бронхиальной астмой.

3.2. Оценка уровня спонтанной гибели клеток периферической крови.

3.2.1. Спонтанная гибель лимфоцитов.

3.2.2. Спонтанная гибель эозинофилов.

3.2.3. Спонтанная гибель нейтрофилов.

3.3. Действие индукторов апоптоза на клетки периферической крови.

3.3.1. Влияние дексаметазона на гибель клеток периферической крови.

3.3.1.1. Индуцированная гибель лимфоцитов.

3.3.1.2. Индуцированная гибель эозинофилов.

3.3.1.3. Индуцированная гибель нейтрофилов.

3.3.2. Влияние перекиси водорода на гибель клеток периферической крови.

3.3.2.1. Индуцированная гибель лимфоцитов.

3.3.2.2. Индуцированная гибель эозинофилов.

3.3.2.3. Индуцированная гибель нейтрофилов.

3.4. Электронно-микроскопическая картина программируемой гибели клеток.

3.5. Оценка содержания ИЛ-5 в сыворотке крови больных бронхиальной астмой.

3.6. Экспрессия мРНК про- и антиапоптотических эффекторов у больных бронхиальной астмой.

3.7. Экспрессия мРНК регуляторов клеточной гибели у больных бронхиальной астмой.

3.8. Оценка функциональной активности факторов транскрипции.

Глава 4. Обсуждение результатов.

4.1. Роль иммунокомпетентных клеток в нарушении функции внешнего дыхания.

4.2. Значение гибели иммунокомпетентных клеток в патогенезе бронхиальной астмы.

4.2.1. Особенности клеточной гибели у больных бронхиальной астмой.

4.2.1.1. Роль цитокинов в процессах нарушения апоптоза при бронхиальной астме.

4.2.1.2. Эффекторы апоптоза у больных бронхиальной астмой.

4.2.1.3. Роль ингибиторов апоптоза у больных бронхиальной астмой.

4.2.1.4. Альтернативный механизм апоптоза у больных бронхиальной астмой.

4.2.1.5. Роль транскрипционных факторов апоптоза у больных бронхиальной астмой.

4.2.2. Нарушение апоптоза и тяжесть бронхиальной астмы.

4.3. Механизмы регуляции апоптоза и некроза иммунокомпетентных клеток in vitro при бронхиальной астме.

4.3.1. Влияние дексаметазона на процессы клеточной гибели in vitro.

4.3.2. Окислительный стресс в патогенезе бронхиальной астмы.

4.3.3. Действие перекиси водорода in vitro в регуляции клеточной гибели.

Введение диссертации по теме «Патологическая физиология», Агеева, Елизавета Сергеевна, автореферат

Бронхиальная астма представляет собой одну из наиболее актуальных медицинских проблем. Это обусловлено, в первую очередь, широкой распространенностью заболевания. Эпидемиологические исследования последних лет свидетельствуют о том, что в разных странах от 4 до 10% населения планеты страдают бронхиальной астмой различной степени выраженности [3; 117]. В детской популяции этот показатель достигает 10-15% и является самым частым хроническим заболеванием у детей [15; 50]. Отмечается устойчивая тенденция к усилению тяжести течения и формированию резистентных форм бронхиальной астмы [31; 37].

Течение астмы сопровождается прогрессирующим воспалением, ключевой характеристикой которого является обратимая обструкция и неспецифическая гиперреактивность дыхательных путей [33; 143]. Не вызывает сомнения, что ведущая роль в патогенезе заболевания принадлежит хроническому воспалению, в основе которого лежит персистенция лейкоцитов в тканях бронхов [53; 74]. Наличие в органах-мишенях длительно существующих клеток регуляторного и эффекторного звеньев может быть обусловлено не только их повышенной миграцией в ткани, но и замедлением элиминации клеток вследствие нарушений процессов программируемой гибели [5; 174; 200].

Апоптоз обеспечивает сохранение мембранной целостности клеток, снижение их цитотоксической и секреторной активности с последующим фагоцитозом целых клеток или апоптотических телец без высвобождения медиаторов [58; 88]. В свою очередь снижение апоптоза приводит к увеличению некроза клеток в очаге воспаления. Некротическая гибель сопровождается выделением провоспалительных медиаторов, обладающих цитоток-сическим и гистохимическим действием; увеличением пролиферации и миграции в очаг воспаления новых клеток-эффекторов [14; 32; 94; 99]. Таким образом, апоптоз играет ключевую роль в ограничении повреждения ткани, а воспалительный процесс является результатом дефекта этих механизмов [42; 119].

Апоптоз является одним из важных ген-регулируемых процессов и тесно связан с рядом тех сигнал-проводящих систем, изменение которых имеет большое патогенетическое значение и для бронхиальной астмы [5; 90]. Механизмы программируемой клеточной гибели, которые развиваются в норме и при бронхиальной астме, на современном этапе не являются, до конца изученными, а литературные данные по этому вопросу весьма противоречивы [8; 26; 93; 118]. Кроме того, апоптоз не является единственным проявлением программируемой клеточной гибели. Известно, что гибель клеток может протекать без участия каскада каспаз. Существует ряд альтернативных (каспаза-независимых) форм программируемой гибели клеток, одной из которых является параптоз [64; 190]. В клетках запускается сразу несколько путей гибели и в процессе развития они могут переключаться [145].

Индукция программируемой гибели иммунных клеток — механизм, успешно применяемый организмом для купирования нарушений в иммунной системе [161]. Апоптоз эффекторных клеток может ограничить ответ при хроническом воспалении [88; 119; 187]. Таким образом, изучение и расшифровка механизмов апоптоза является одним из наиболее актуальных направлений современной медицинской науки. Выявление конкретных механизмов регуляции апоптоза, сопровождаемых заболевания, позволит определить стратегию терапевтического вмешательства. Возможность целенаправленной индукции или ингибирования апоптоза может быть эффективным путем лечения некоторых патологических состояний. В связи с этим развитие исследований в этом направлении необходимо считать высокоприоритетными.

Необходимо отметить, что в работах, посвященных изучению нарушений механизмов апоптоза при бронхиальной астме, в большей степени рассматривается роль лимфоцитов и эозинофилов [9; 59; 74; 92]. Гораздо менее изученным является изменение апоптоза нейтрофилов, чья роль в патогенезе астмы так же достаточно велика [5; 28; 84; 119].

Таким образом, все вышеизложенное определяет актуальность, перспективность и практическую значимость научного поиска в области механизмов программируемой клеточной гибели, как возможного патогенетического фактора при бронхиальной астме.

Цель: Определить роль и изучить механизмы программируемой гибег1 ли лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов у больных бронхиальной астмой.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи: •

1. Оценить уровень гибели иммунокомпетентных клеток периферической крови (лимфоцитов, эозинофилов, нейтрофилов) у больных бронхиальной астмой в зависимости от клинических особенностей и активности воспаления.

2. Выявить особенности экспрессии мРНК проапоптотических и антиапоптотических эффекторов в зависимости от тяжести астмы; и возможные пути их взаимодействия в процессе программируемой гибели лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов больных бронхиальной астмой.

3. Установить значение транскрипционных факторов в регуляции экспрессии проапоптотических и антиапоптотических эффекторов методом исследования экспрессии генов (NF-kB, р53) и их ДНК-связывающей способности.

4. Оценить действие индукторов апоптоза in vitro (специфического — дексаметазон и неспецифического — перекись водорода) на гибель иммунокомпетентных клеток периферической крови у больных бронхиальной астмой.

5. Выявить особенности механизмов реализации программируемой гибели при бронхиальной астме в зависимости от типа иммунокомпетентных клеток (эозинофилы, нейтрофилы, лимфоциты).

Впервые с привлечением современных иммунологических и молекуляр-но-биологических методов исследования- проведено комплексное изучение проапоптотических и антиапоптотических систем в иммунокомпетентных клетках (эозинофилах, нейтрофилах и лимфоцитах) больных бронхиальной астмой с учетом тяжести заболевания. Установлено, что при бронхиальной астме угнетение механизмов программируемой гибели лимфоцитов, эозинофи-лов, нейтрофилов реализуется через увеличение экспрессии мРНК антиапоптотических факторов (Bcl-2, Bflj, Bcl-xL, с1АРь с1АРг). Степень нарушения механизмов программируемой клеточной гибели ассоциирована с тяжестью заболевания и активностью воспаления бронхиальной астмы.

Получены данные, свидетельствующие об увеличении экспрессии мРНК и ДНК-связывающей способности нуклеарного фактора NF-kB. Выявлено, что у больных бронхиальной астмой снижена экспрессия гена р53. ДНК-связывающая способность транскрипционного фактора р53 также снижена и коррелирует с тяжестью бронхиальной астмы.

Показано, что специфический индуктор апоптоза — дексаметазон in vitro приводит к увеличению уровня апоптоза и снижению некроза иммунокомпетентных клеток периферической крови больных бронхиальной астмой. Использование .неспецифического индуктора — перекиси водорода приводит к увеличению уровня апоптотической гибели лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Бронхиальная астма сопровождается нарушением реализации механизма программируемой гибели, что проявляется снижением уровня апоптоза и увеличением некроза иммунокомпетентных клеток периферической крови (лимфоцитов, эозинофилов, нейтрофилов). Нарушения программируемой гибели носят однонаправленный характер для всех иммунокомпетентных клеток периферической крови.

2. Дефект программируемой гибели при бронхиальной астме является результатом дисбаланса между эффекторами апоптоза (увеличением экспрессии мРНК антагонистов и снижением агонистов). Нарушения программируемой гибели иммунокомпетентных клеток ассоциированы с изменением экспрессии и функциональной активности транскрипционного фактора р53. ‘

3. Индукторы апоптоза in vitro воздействуют на различные пути реализации механизмов программируемой гибели, увеличивая апоптотическую гибель клеток. Вид программируемой гибели, который активируется при действии индукторов, зависит от типа клеток.

Теоретическое и практическое значение работы

В результате исследования получены новые данные, касающиеся ключевых механизмов. нарушения регуляции программируемой гибели иммунокомпетентных клеток при бронхиальной астме. Исследование с применением индукторов апоптоза позволило выявить особенности программируемой гибели в зависимости от типа клеток. Полученные данные могут послужить основой для создания новых высоко эффективных методов молекулярной терапии, прогнозирования эффективности лечения сложно-контролируемых и терапевтически-резистентных форм бронхиальной астмы.

Результаты проведенных исследований докладывались и обсуждались на Всероссийской Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 2003), на Международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2003, 2004), на Европейском респираторном конгрессе (Вена, 2003, Глазго, 2004), на 13 конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 2005), на Всероссийской конференции «Фундаментальные науки — медицине» (Новосибирск, 2005).

Внедрепне результатов исследований Результаты исследования используются в учебном процессе на кафедре патофизиологии Сибирского государственного медицинского университета. Методы РТ-ПЦР апоптотических факторов и метод оценки ДНК-связывающей способности транскрипционных факторов адаптированы и внедрены в практику научных исследований Центральной научно-исследовательской лаборатории Сибирского государственного медицинского университета.

Объем н структура диссертации

Работа изложена на 162 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, изложения материалов и методов, главы собственных исследований, главы обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Работа содержит 41 рисунок и 17 таблиц. Спиг> сок источников литературы включает в себя 204 работы, из которых 52 отечественных и 152 — зарубежных авторов.

Работа выполнена на базе отдела биохимии (зав. отд.- д.м.н. А.Э. Сазонов) и отдела молекулярной биологии (зав. отд. — д.м.н. И.И. Иванчук) Центральной научно-исследовательской лаборатории СибГМУ (зав. ЦНИЛ -д.м.н., профессор А.Н. Банков), кафедры факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета СибГМУ (зав. каф.-д.м.н., профессор Л.М. Огородова), кабинета функциональной диагностики областного детского центра клинической иммунологии и аллергологии Областной детской больницы, г. Томск (зав. каб. — к.м.н. И.А. Деев), Астма-центра Областной клинической больницы, г. Томск (гл. врач — к.м.н. Б.Т Серых).

Заключение диссертационного исследования на тему «Механизмы программируемой гибели лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов у больных бронхиальной астмой»

1. Развитие бронхиальной астмы сопряжено с нарушением реализации программируемой гибели иммунокомпетентных клеток периферической крови, что проявляется снижением апоптоза и увеличением некроза лимфоцитов, эозинофилов и нейтрофилов. Снижение апоптоза и степень увеличения некроза при бронхиальной астме зависят от тяжести заболевания и ассоциированы с уровнем экспрессии мРНК ИЛ-5.

2. Механизм нарушения реализации программируемой гибели иммунокомпетентных клеток периферической крови при бронхиальной астме обусловлен значительным увеличением антиапоптотических эффекторов апоптоза (Bcl-2, Bflb Bcl-xL, cIAP,, cIAP2).

Читайте также:  Льготы при астме у взрослого

3. Изменение баланса между антиапоптотическими и проапоптотиче-скими эффекторами апоптоза в иммунокомпетентных клетках периферической крови при бронхиальной астме ассоциировано со снижением экспрессии гена и ДНК-связывающей активности транскрипционного фактора р53 и увеличением экспрессии гена и ДНК-связывающей активности транскрипционного фактора NF-kB.

4. Действие индукторов апоптоза in vitro (специфического — дексамета-зон и неспецифического — перекись водорода) приводит к увеличению уровня апоптотической и снижению уровня некротической гибели имунокомпетент-ных клеток периферической крови у больных бронхиальной астмой.

5. Влияние индукторов апоптоза на различные пути реализации программируемой гибели (апоптоз, параптоз) зависит от типа клеток. В эозино-филах индукторы апоптоза приводят к увеличению уровня апоптотической гибели, в лимфоцитах — к развитию и апоптоза, и параптоза, в нейтрофилах -к преобладанию параптотического типа гибели.

В результате проведенных исследований выявлено, что в иммуноком-петентных клетках больных БА увеличена активность антиапоптотических эффекторов, и не изменена активность проапоптотических. Подобный дисбаланс в системе апоптоза может быть связан с генетическим дефектом в ре-гуляторных генах, приводящий к формированию антиапоптотического статуса [19]. Таким регуляторным геном является белок р53, снижение функциональной активности которого приводит к высокому уровню экспрессии антиапоптотических эффекторов [199].

В условиях окислительного стресса увеличение выживаемости клеток можно рассматривать как дополнительный фактор в системе антиоксидант-ной защиты организма на клеточном уровне. При этом активация антиокси-дантной системы может быть частью регуляторного механизма селекции клеток с антиапоптотическим статусом при БА. Поскольку изменения апоптоза установлены нами в клетках периферической крови, следовательно, селекция клеток с антиапоптотическим статусом происходит на этапе их роста и дифференцировки. Подобный механизм селекции является общим для всех эффекторных клеток воспаления при БА.

Стимуляция программируемой гибели отличается в разных типах клеток и зависит от тяжести заболевания. Действие дексаметазона in vitro связано с реактивацией каспаза-зависимого механизма и запуском альтернативного пути ПКГ (рис. 41). Действие перекиси водорода in vitro приводит к активации альтернативного механизма гибели клеток (рис. 41). В связи с этим увеличение программируемой гибели лимфоцитов при действии обоих индукторов свидетельствует о том, что в лимфоцитах больных БА реализация ПКГ происходит и по апоптотическому и по параптотическому (альтернативному) механизмам. Интенсивность апоптоза эозинофилов, индуцированного дексаметазоном, превышает аналогичное влияние перекиси водорода. В связи с этим можно сказать, что в эозинофилах основная роль в реализации ПКГ принадлежит апоптозу. В нейтрофилах больных БА интенсивность апоптоза, индуцированного перекисью водорода, была выше по сравнению с влиянием дексметазона на апоптоз нейтрофилов. Исходя из этого, можно предположить, что в нейтрофилах приоритетным является каспаза-независимый механизм реализации ПКГ. — ингибирующее действие, — активирующее действие

Рис. 41. Схема, показывающая звенья апоптоза, на которые воздействуют индукторы ПКГ. Н2О2 — перекись водорода, Дн — дексаметазон

Таким образом, в иммунокомпетентных клетках больных БА установлены серьезные нарушения в системе регуляции активности транскрипционных факторов и связанное с ними доминирование экспрессии антиапоптоти-ческих эффекторов над проапоптотическими. Нарушения в системе регуляции активности транскрипционных факторов ОТ-кВ, р53 и формирование апоптотического статуса, очевидно, происходит в клетках на этапе их роста и дифференцировки в костном мозге.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2006 года, Агеева, Елизавета Сергеевна

1. Абросимов В.Н. Воспаление и гиперреактивность дыхательных путей при бронхиальной астме / В.Н. Абросимов, В.Г. Порядин // Терапевтический архив. 1994. -№11.- С.60-64.

2. Активные формы кислорода в реакциях повреждения биомолекул / A.A.

3. Подколзин, А.Г. Мегреладзе, В.И. Донцов и др. // Профилактика старения. 2000. — Вып.З.

4. Анализ смертности вследствие заболеваний органов дыхания в Томскойобласти / Л.М. Огородова, Б.В. Головачев, О.С. Кобякова и др. // Здравоохранение Р.Ф. 2004. — №1. — С. 45 — 46.

5. Антиоксидантная защита организма при старении и некоторых патологических состониях с ним связанных / A.A. Подколзин, В.И. Донцов, В.Н. Крутько и др. // Клиническая геронтология.-2001.-Т.7, № 3-4-С.50-58.

6. Апоптоз и активность рибосомальных цистронов клеток периферическойкрови при бронхиальной астме / В.Н. Минеев, И.И. Нестерович, Е.С. Оранская, А.Л. Тафеев // Аллергология. 2003. — № 1. — С. 15-19.

7. Белушкина H.H. Молекулярные основы патологии апоптоза / H.H. Белушкина, С.Е. Северин // Архив патологии. 2001. — Т. 63, № 1. — С. 51 -60.

8. Берестецкий А.Б. Изменение свойств эозинофилов под влиянием сыворотки крови больных бронхиальной астмой / А.Б. Берестецкий, И.В. Лещен-ко, И.А. Кардашина // Пульмонология. 1997. — №2. — С.57-60.

9. Бойчук C.B. Механизмы апоптоза лимфоцитов периферической кровибольных атопической бронхиальной астмой / C.B. Бойчук, И.Г. Муста-фин, P.C. Фассахов // Аллергология.-2001.-№ 1. С.3-7.

10. Влияние противоастматических препаратов на пролиферацию и апоптоз периферических мононуклеаров человека in vitro / Д.Б. Утешев, A.A. Кара-биненко, П.С. Прокофьев, Г.И. Сторожаков // Пульмонология.-1999.-№2-С.20-23.

11. Вольский H.H. Влияние супероксидного радикала на пролиферацию лимфоцитов, стимулированную митогеном / H.H. Вольский, Н.В. Кашлакова,

12. B.А. Козлов // Цитология. 1988. — Т. 30, № 7. — С.898-902.

13. З.Гамалей И.А. Перекись водорода как сигнальная молекула / И.А. Гамалей, И.В. Клюбин // Цитология. 1996. — Т. 38, № 12. — С. 1233-1247.

14. Гиперреактивность бронхов по ингаляционному тесту с гистамином у детей и подростков / A.B. Черняк, Б.П. Савельев, B.C. Реутова, И.С. Ширяева // Медицинский научный и учебно-методический журнал.-2001.-№5.-С.121—146.

15. Гудина М.В. Особенности заболеваемости населения Томска / М.В. Гудина, Л.П. Волкотруб, А.Г. Карташев // Здравоохранение РФ.-2004.-№51. C.24-25.

16. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль / И.С. Гущин М.: Фармарус Принт. — 1998.

17. Иванчук И.И. Механизмы программируемой гибели эозинофилов периферической крови при бронхиальной астме: Автореф. дис. д-ра мед. наук / И. И. Иванчук. Томск, 2005. 30 с.

18. Карупу В.Я. Электронная микроскопия / В .Я. Карупу. К.: Вища школа. Головное изд-во, 1984. 208 с.

19. Ковальчук Jl.В. Апоптогенные механизмы возникновения иммунодефи-цитных заболеваний / Л.В. Ковальчук, А.Н. Чередеев // Журнал Микробиологии. 1999. — № 5. — С.47-52.

20. Козинец Г.И. Поверхностная архитектоника клеток периферической крови / Г.И. Козинец, Ю. Симоварт. Таллин: Валгус, 1984. 116 с.

21. Кольтовер В.К. Свободнорадикальная теория старения: исторический очерк / В.К. Кольтовер // Успехи геронтологии. 1998. — Вып.2.-С.37 — 42.

22. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / В.В. Меньшиков и др.; Под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. — 364 с.’

23. Лихтенштейн A.B. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы / A.B. Лихтенштейн, B.C. Шапот//Патологическая Физиология.- 1997.-№3.-С.35-48.

24. Мамонтова Т.В. Новые аспекты апоптоза мононуклеарных клеток в патогенезе апоптотической бронхиальной астмы / Т.В. Мамонтова, И.П. Кай-дашев // Аллергология. 2005. — №4. — С. 15 — 23.

25. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск. Наука, 1983. 264 с.

26. Маянский H.A. Митохондрии нейтрофилов: особенности физиологии и значение в апоптозе / H.A. Маянский // Иммунология.-2004.-№5.-С.307-312.

27. Меньшиков В.В. Клинический диагноз лабораторные основы / В.В. Меньшиков. М.: Издательство «Лабинформ», 1997. — 320 с.

28. Невзорова В.А. Апоптоз и воспаление при бронхиальной астме / В.А. Невзорова, Т.Н. Суворенко, E.H. Коновалова // Терапевтический архив. -2001.-№ 12. -С.92-96. ‘

29. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель. Под ред. Новикова B.C. / B.C. Новиков. Санкт-Петербург «Наука», 1996. -120 с.

30. Новицкий В.В. Руководство к практическим занятиям по гематологии / В.В. Новицкий, О.М. Евтушенко. Томск, 1999. — 160 с.

31. Перекись водорода в субтоксических концентрациях активирует фосфои-нозитидный обмен в эндотелиальных клетках человека / В.Р. Музыкантов, Е.А. Пучнина-Артюшенко, Е.В. Чекнева, Т.А. Войно-Ясенецкая // Биологические мембраны. 1992. — Т. 9, № 2. — С. 133.

32. Роль ИЛ 5 в патогенезе бронхиальной астмы / JI.M. Огородова, О.С. Ко-бякова, М.Б. Фрейдин и др. // Аллергология. — 1999. — № 4. — С. 32 — 36.

33. Система Fas-FasL в норме и при патологии / С.Г. Аббасова, В.М. Липкин, H.H. Трапезников, Н.Е. Кушлинский // Вопросы биологичесой медицины и фарм. химии. 1999. — № 3. — С.3-16.

34. Соловьев A.C. Корреляция цитотоксической активности мутантных форм фактора некроза опухолей а с изменением уровня свободного сфингозина в печени мышей / A.C. Соловьев, В.Г. Коробко // Биохимия. 1995. — Т. 60, № 8. — С.1283-1291.

35. Спонтанный и глюкокортикоид-индуцированный апоптоз лимфоцитов больных атопической бронхиальной астмой: роль митохондрий и CD 95 (АРО 1) / C.B. Бойчук, И.Г. Мустафин, P.C. Фассахов, Д.В. Терещенко // Аллергология. — 2002. — № 1. — С. 13-20.

36. Тронов В.А. Репарация ДНК и гибель покоящихся лимфоцитов крови человека, индуцированных перекисью водорода / В.А. Тронов, Е.М. Константинов // Биохимия. 2000. — Т. 65, № 11. — С. 1516-1524.

37. Трофимов В.И. Роль глюкокортикоидных гормонов в развитии аллергического воспаления / В.И. Трофимов, H.JI. Шапорова // Аллергология. 2001. -№. 1.-С.25-29.

38. Уикли И.Б. Электронная микроскопия для начинающих / Уикли И.Б. М.: Мир, 1975.-324 с.

39. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы / С.Р. Уманский // Молекулярная биология. 1996. — Т. 30, вып. 3. — С.487-502.

40. Чучалин А. Г. Бронхиальная астма: глобальная стратегия / А.Г. Чучалин // Терапевтический архив-1994. № 3. — С.3-8.

41. Чучалин А.Г. Тяжелые формы бронхиальной астмы / А.Г. Чучалин // Терапевтический архив. 2001. — № 3. — С.5 — 9.

42. Шварц Г.Я. Сальбутамол и м-холинолитические средства. Сальбутамол. Под ред. А. Г.Чучалина, И. Хами да / Шварц Г.Я. // М.-Фарммединнфо. -1992. -С.214-221.

43. Эпидемиология бронхиальной астмы в детском возрасте / Е.И. Лютина, Ф.К. Манеров, Т.Н. Курилова и др. // Педиатрия.-2005.-№4-С.111-114.

44. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. 1996. — Т. 6. — С. 10-23.

45. Ярилин А.А. Апоптоз: природа феномена и его роль в целостном организме / А.А. Ярилин // Патологическая физиология. 1998. — № 8. — С.38-48.

46. A critical role for eosinophils in allergic airways remodeling / A.A. Humbles,

47. C.M. Lloyd, S.J. McMillan et al. // Science.-2004.-Vol.305, № 5691.-P. 17761779.

48. A model for p53-induced apoptosis / K. Polyak, Y. Xia, J.L. Zweier et al. // Nature. 1997. — № 389. — P. 300 — 305.

49. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodide staining and flow cytometry /1. Nicoletti, G. Migliorati, M.C. Pagliacci et al. // Journal of Immunology Methods. -1991. Vol. 139. — P.271-279.

50. A single BIR domain of XIAP sufficient for inhibiting caspases // R. Takahashi, Q. Deveraux, I. Tamm et al. // Journal of Biological Chemistry. 1998. — Vol. 273, № 14. — P.7787-7790.

51. Adams J.M. The Bcl-2 Protein Family: Arbiters of Cell Survival / J.M. Adams, S. Cory // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2000. -Vol.160, №5.-P.5-11.

52. Adcock I.M. Interactions of glucocorticoids and ß2-agonists / I.M. Adcock, D.A. Stevens, P.J. Barnes // European Respiratory Journal.-1996.-Vol.9.-P. 160-168.

53. Afford S. Apoptosis / S. Afford, S. Randhawa // Journal of Clinical Pathology.2000-JSfo5.3^- R.55-63.—-—•

54. Allen P.D. Electrophoretic DNA analysis for the detection of apoptosis / P.D. Allen, A.C. Newland // Molecular Biotechnology -1998. Vol.9. — P.247-251.

55. Allen R.T. Morphological and Biochemical Characterization and Analysis of Apoptosis / R.T. Allen, W.J. Hunter, D.K. Agrawal // Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 1997. — Vol. 37, № 4. — P. 215 — 228.

56. An alternative form of paraptosis-like cell death, triggered by TAJ/TROY andenhanced by PDCD5 overexpression / Y. Wang, X. Li, L. Wang et al. // Journal of Cell Sciences.-2004.-Vol. 117.-P. 1525-1532. ‘

57. Apoptosis induced by fast neutrons versus 60Co gamma -rays in human peripheral blood lymphocytes / A.Vral, M. Cornelissen, H. Thierens et al. // International Journal of Rediations Biology.-1998.-Vol.73, № 3. P.289-295.

58. Apoptosis inducing factor (AIF): a phylogenetically old, caspase-independent effector of cell death / H.K. Lorenzo, S.A. Susin, J. Penningerand, G. Kroemer // Cell Death Differ. 1999. — №6. — P.516-524.

59. Apoptosis-inducing factor and apoptosis / C.X. Lu, T.J. Fan, G.B. Hu, R.S. Cong // Sheng Wu Hua Xue Yu Sheng Wu Wu Li Xue Bao (Shanghai). 2003. — Vol. 35, № 10. — P.881-885. ‘

60. Aravind L. Apoptotic Molecular Machinery: Vastly Increased Complexity in Vertebrates Revealed by Genome Comparisons / L. Aravind, V.M. Dixit, E. V. Koonin// Science. -2001. Vol. 291, № 5507. — P. 1279-1284.

61. Baldwin G.C. The biology of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor: effects on hematopoietic and nonhematopoietic cells / G.C. Baldwin // Development of Biology Review. 1992. — Vol. 151, № 2. — P. 352 -367.

62. Barnes P.J. Anti-inflammatory actions of steroids: molecular mechanisms / P.J.Barnes, I.M. Adcock // Trends in Pharmacological Sciences.-1993.-Vol.14.-P.436-441. ‘

63. Barnes P.J. New cocpts in the pathogenesis of bronchial responsiveness andasthma / PJ. Barnes // Journal of Allergy and Clinical Immunology. 1989. -Vol. 83.-P. 1013-1026.

64. Bcl-2 expression in sputum eosinophils in patients with acute asthma / A.S. Jang, I.S. Choi, S. Lee et al. // Thorax.-2000.-Vol. 16, № 5. P.370-374. :

65. Bcl-x, a bcl-2-related gene that functions as a dominant regulator of apoptotic cell death / L.H. Boise, M. Gonzalez-Garcia, C.E. Postema et al. // Cell.-1993-Vol.74.-P.597-608.

66. Beaulaton J. The relation of programmed cell death to development and reproduction: comparative studies and attempt at classification / J. Beaulaton // International Review of Cytology. 1982. — Vol. 79. — P.215-232.

67. Benedict C.A. Death and survival: viral regulation of TNF signaling pathways / C.A. Benedict, T.A. Banks, C.F. Ware // Current Opinion in Immunology. -2003. Vol. 15, № 1. — P.59-65. ‘•:

68. Berline G. NO role for NO in asthma? / G. Berline, N. Barnes // Lancet.—2000. -Vol. 335. P.1029-1030.

69. Borregaard N. Energy metabolism of human neutrophils during phagocytosis / N.Borregaard, T. Herlin // Journal of Clinical Investigation.-1982.-Vol.70-P.550-557.

70. Burbon R.H. Free radicals and cell proliferation / R.H. Burbon // New Comp Biochem. 1994. — Vol. 28. — P. 155-185.

71. Buttke T.M. Oxidative stress as a mediator of apoptosis / T.M. Buttke, P.A. Sad-strom // Immunology today. 1994. — Vol. 15. — P.7-10. :

72. Caramori G. Oxidants and asthma / G. Caramori, A. Papi // Thorax-2004.-№59.-P. 170-173.

73. Caspase-mediated proteolysis during apoptosis: insights from apoptotic neutrophils / D.M. Sanghavi, M. Thelen, N.A. Thornberry et al. // FEBS Lett -1998.-Vol. 422.-P. 179-184.

74. Chang H.Y. Proteases for Cell Suicide: Functions and Regulation of Caspases / H.Y. Chang, X. Yang // Microbiology and Molecular Biology Reviews. 2000. -Vol. 64, № 4. — P.821-846.

75. Chao D.T. BCL2 family: regulators of cell death / D.T. Chao, S.J. Korsmeyer // Annual Review of Immunology. 1998.-Vol. 16. — P.395-419.

76. Characterization of the anti-apoptotic mechanism of Bcl-2 / D. Zhai, N. Ke, H. Zhang et al. // Journal of Biochemistry. 2003. — Vol. 376. — P.229-236.

77. Chilvers E.R. Regulation of granulocyte apoptosis and implications for anti-inflammatiry / E.R. Chilvers // Thorax. 1998. — Vol.53, № 7. — P.533-534.

78. Christman J.W. The Role of Nuclear Factor-kappa B in Pulmonary Diseases / J. W. Christman, R.T. Sadikot, T.S. Blackwell // American College of Chest Phy-sicians.-2000.-Vol.l 17.-P.1482-1487.

79. Chung K.F. Cytokines in asthma / K.F. Chung, P.J. Barnes // Thorax-1939.-Vol.54.-P.825 857.

80. Cohen J.J. Apoptosis: mechanisms of apoptosis / J.J. Cohen // Immunology Today. 1993.-Vol. 14. — P.126-130.

81. Corrigan C.J. T cells and eosinophils in the pathogenesis of asthma / C.J. Corrigan, A.B.Kay// Immunology Today. 1992. — Vol. 13, № 12. — P.501-507.

82. Cregan S.P. Role of AIF in caspase-dependent and caspase-independent cell death / S.P. Cregan, V.L. Dawson, R.S. Slack // Oncogene.-2004.-Vol.23, № 16.-P.2785-2796.

83. Crompton M. The mitochondrial permeability transition pore and its role in cell death / M. Crompton // Journal of Biochemistry-1999.-Vol. 15 -P.233-249.

84. Dahl R. Inhaled formoterol dry powder versus ipratropium bromide in chronic obstructive pulmonary disease. / R. Dahl, L. Greefhorst, D. Nowak // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2001. — Vol. 164. — P. 778784.

85. Desreumaux P. Eosinophils in allergic reactions / P. Desreumaux, M. Carpon // Current Opinion in Immunology. 1996. — Vol. 8. — P.790-795.

источник

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *