Меню Рубрики

Реакция риф при бешенстве

Методы выявления антигенов. При бешенстве для экспресс-диагностики можно использовать методы флуоресцирующих антител (МФА), реакции преципитации (РП) в агаровом геле, методы иммуноферментного анализа (ИФА), полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для прижизненной диагностики бешенства у человека требуется несколько тестов.

Определение антител к антигенам вируса бешенства. Выявление антител в сыворотке крови или в цереброспинальной жидкости — важный метод диагностики. Серологическое исследование рабиес-специфических антител проводится в сыворотке крови для определения пред- и постэкспозиционной вакцинации и определения времени бустерной иммунизации с целью повышения иммунного ответа.

Выделение вируса. Для выделения и идентификации вируса используют метод биопробы на белых мышах. Исследуемый материал суспендируют в физиологическом растворе, содержащем антибиотики и эмбриональную сыворотку крупного рогатого скота. Суспензия вводится интрацеребрально белым мышам массой 5–6 г. Для доказательства развития инфекции за мышами ежедневно наблюдают до 30-го дня после инокуляции. Мыши, у которых за этот период развивается заболевание, немедленно подвергаются эвтаназии, и ткани мозга исследуются методом прямой МФА.

Преимущество данного подхода состоит в возможности определить малые количества вируса бешенства в материале. Недостаток метода — необходимость многодневного (7–18 суток) ожидания между инокуляцией и проявлением первых признаков заболевания. Для сокращения инкубационного периода применяют мышей-сосунков. Для экспресс-диагностики можно использовать мышей в возрасте менее 3 дней: у мышей, забитых через 3 дня, уже выявляется антиген вируса в мозге, который можно выявить методом МФА.

Такой метод выделения вируса практикуется в качестве подтверждающего диагностического теста при отрицательных результатах по выявлению антигена и телец Бабеша – Негри и в случае укуса человека подозрительным на бешенство животным. Он обеспечивает надлежащую чувствительность и специфичность, т. е. расценивается на уровне диагностической значимости метода прямой иммунофлуоресценции. Кроме того, этот метод является основным для идентификации вариантов вируса и перспективен для разработки диагностических реагентов.

Выделение и идентификация вируса на культуре клеток. Основным недостатком выделения вируса при инфицировании лабораторных животных является длительность метода. Избежать этого можно при использовании культур клеток. Обычно для этих целей используют культуру клеток нейробластомы мышей, если нужно исследовать ткани головного мозга. Мозг суспендируют в культуральной питательной среде, суспензию наносят на монослой культуры клеток и инкубируют от одного до нескольких дней.

Чувствительность данной культуры к вирусу можно повысить обработкой ее ДЕАЕ декстраном. Монослой клеток затем отмывают, фиксируют на холоде ацетоном или смесью формалина с метанолом и исследуют методом иммунофлюоресценции. Если животное было инфицировано вирусом бешенства, то в монослое культуры клеток выявляются цитоплазматические включения антигена вируса бешенства.

Показано, что на клетках мышиной нейробластомы линии Na C1 300 в сочетании с МФА антиген вируса бешенства можно выявить через 2 дня. Чувствительность метода сравнима с методом изоляции вируса на мышах.

Хотя вирус бешенства обладает облигатной нейропатогенностью in vivo, он способен инфицировать широкий круг клеток-хозяев in vitro, что можно использовать для исследования других тканей и органов на наличие вируса бешенства. Установлено, что вирус бешенства размножается в клетках ВНК-21 и Vero, в первичных клетках куриных эмбрионов или почек хомяка. Показано, что адсорбция вируса и внедрение его в клетку происходят в течение 7 часов. Через 24–48 часов внутри клетки образуются новые вирусные частицы, через 72 часов происходит почкование их из клеточной оболочки в межклеточное пространство.

Для экспресс-диагностики бешенства могут быть использованы:

а) метод МФА — для выявления антигена вируса бешенства в отпечатках роговицы или заднего отдела шеи больного, содержащего луковицы волос;
б) метод ПЦР — для выявления РНК вируса в биоптатах тканей, слюне, спинномозговой или слезной жидкости;
в) метод ИФА — для выявления специфических антител (антигена) у больных с типичным или атипичным течением.
г) метод биопробы — для выделения вируса на ранних этапах заболевания или для выявления антител в крови или спинномозговой жидкости на поздних стадиях заболевания. Для экспресс-диагностики используется комплексный метод (биопроба + МФА), заключающийся в заражении исследуемым материалом 2-дневных новорожденных мышей и исследования их мозга на 3–4-е сутки в МФА.

Выбор методов прижизненной диагностики в значительной мере зависит от стадии болезни: метод, основанный на выявлении антигенов, как правило, обладает высокой чувствительностью в конце инкубационного периода, в течение первых нескольких дней заболевания, в то время как вируснейтрализующие антитела обычно появляются в спинномозговой жидкости и сыворотке крови после 7-10 дней от начала болезни.

Реакция иммунофлюоресценции. Метод основан на использовании антител, связанных с красителем, например, флюоресцеинизотиоцианатом. РИФ широко применяется для выявления вирусных антигенов в материале больных и для быстрой диагностики.

Метод обладает наиболее высокой степенью чувствительности, он положен в основу экспресс-диагностики и позволяет обнаруживать вирусные антигены в течение нескольких часов

Основные достоинство МФА: быстрота выполнения, высокая специфичность (100%). Затрачиваемое время на диагностику заболевания с его помощью — менее одного дня. Применяются прямой и непрямой варианты МФА.

Прямая иммунофлуоресценция остается наиболее предпочитаемым методом диагностики бешенства. Предметные стекла, содержащие мазки-отпечатки тканей мозга, или стекла с монослоем культуры тканей фиксируют в ацетоне в течение 1–4 часов. Затем препараты высушивают и обрабатывают флуоресцирующими поликлональными антинуклеокапсидными антителами (иммунофлуоресцентный реагент).

Этот реагент представляет собой конъюгат, приготовленный из специфических поликлональных антител IgG класса к нуклеокапсидному антигену вируса и флуоресцеина изоцианата (ФИТЦ). Специфические антитела получают путем гипериммунизации животных (кроликов, хомяков или лошадей) смесью эпитопов нуклеокапсида вируса.

В настоящее время для этих целей все шире используют мышиные моноклональные антитела к нуклеокапсиду вируса бешенства. После 30-минутной инкубации при 37° С диагностические препараты многократно отмывают физиологическим раствором и дистиллированной водой.

Антитела, меченные ФИТЦ, фиксируются только в местах локализации вирусных нуклеопротеидных антигенов. Затем препараты высушивают на воздухе и исследуют методом световой микроскопии, используя в качестве источника света ксеноновую лампу и соответствующий фильтр.

При непрямом варианте антиген сначала соединяют с неокрашенной специфической иммунной сывороткой. Затем на образовавшиеся нефлуоресцирующие комплексы антиген-антитело воздействуют меченой флуорохромом иммунной сывороткой, содержащей антитела к белкам специфической сыворотки. Непрямой вариант МФА наряду с выявлением антигена позволяет количественно определять антитела в исследуемой сыворотке путем соответствующего ее разведения.

Меченые ФИТЦ образования в клетках разных тканей выявляются в виде желто-зеленого флуоресцентного окрашивания на темном фоне (в виде округлой или овальной формы внутрицитоплазматических включений).

Иммуноферментный анализ. Метод основан на принципе сорбции белков на твердой фазе с последующим образованием комплексов антиген-антитело, выявляемых субстрат-индикаторным раствором. Добавляемый в лунки антиген специфически связывается с антителами. На слой антигена наносят исследуемые сыворотки в нужных разведениях. При наличии в них специфических антител последние связываются с антигеном. Для выявления связывания на слой антител наносят иммуноглобулин против глобулинов сыворотки людей, коньюгированный с пероксидазой хрена. Количество сорбирующего коньюгата пропорционально количеству связавшихся с антигеном антител сывороток людей. Это можно определить, используя индикаторный раствор (ортофенилилендиамин + перекись водорода), компоненты которого в результате действия пероксидазы коньюгата окрашивают жидкость в коричнево-желтый цвет. При обследовании неясных случаев применение ИФА дополнительно к методам РП или РСК позволяет увеличить достоверность лабораторной диагностики бешенства, благодаря большой чувствительности этого метода. Метод позволяет обнаруживать инфекционные и дефектные частицы.

Для определения антирабических антител в процессе вакцинации можно применять непрямой метод ИФА, используя в качестве антигена очищенный вирус, а для определения антител класса IgG в человеческой сыворотке — А-белок стафилококка, связанный с пероксидазой хрена. Результаты ИФА сравнимы с полученными в тестах вирусной нейтрализации на мышах. Метод позволяет выявлять присутствие IgМ в начале процесса иммунизации.

Иммуноферментные методы — весьма перспективны для выявления нуклеокапсидного антигена вируса при посмертной диагностике в тканях головного мозга. В их числе, например, быстрый иммуноферментный метод диагностики бешенства, основанный на приготовлении плашек сенсибилизированных антителами IgG изотипа к нуклеокапсиду первого серотипа, разведенных в карбонатном буфере.

Материал для исследования гомогенезируют в буфере или культуральной среде, осветляют центрифугированием, вносят в лунки и инкубируют в плашках. Фиксированный специфическими антителами нуклеокапсидный антиген идентифицируют добавлением пероксидазного конъюгата с антинуклеокапсидными противорабическими антителами иной видоспецифичности и хромогенного субстрата. Чувствительность метода составляет 0,8–1,0 нг/мл.

Этим методом можно выявлять антигены вирусов различных серотипов. Применение конъюгатов нуклеокапсидспецифичных антител, меченых биотином, повышает чувствительность метода до 0,1–0,2 нг/мл.

Методом ИФА успешно выявляется антиген нуклеокапсида [139], но материал, даже разложившийся, не должен фиксироваться формалином.

Метод полимеразной цепной реакции. Для экспресс-диагностики вируса бешенства и идентификации лиссавирусов наиболее удобен метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод ПЦР — самый надежный и быстрый для выделения вирионной РНК из любых проб, содержащих вирус в низкой концентрации. С его помощью можно создать много копий РНК вируса. Этот метод используется для подтверждения результатов МФА и для определения вируса в слюне, луковицах волос заднего отдела шеи и головы.

ПЦР основана на принципе естественной репликации ДНК. Суть метода заключается в многократном повторении циклов синтеза (амплификации) вирусоспецифической последовательности ДНК с помощью термостабильной Taq ДНК-полимеразы и двух специфических затравок, так называемых праймеров.

Каждый цикл состоит из трех стадий с различным температурным режимом. В каждом цикле удваивается число копий синтезируемого участка. Вновь синтезированные фрагменты ДНК служат в качестве матрицы для синтеза новых нитей в следующем цикле амплификации, что позволяет за 25–35 циклов наработать достаточное число копий выбранного участка ДНК для ее определения, как правило, с помощью электрофореза в агарозном геле.

Особенно высокая чувствительность ПЦР при использовании праймеров, комплементарных N-гену, когда удается выявлять РНК вируса в пробах, содержащих вирус в титре 10 МЛД50. Методом ПЦР можно выявлять РНК вируса даже в разложившемся патологическом материале.

В настоящее время разработаны и широко используются на практике подтверждающие (конфирматорные) тесты, такие как ПЦР в обратно-транскриптазном исполнении (ОТ-ПЦР). Метод ОТ-ПЦР — высокочувствительный и наиболее эффективный. РНК экстрагируется из тканей инфицированного вирусом органа, транскрибируется в кДНК, которая затем амплифицируется методом ПЦР. Для постановки ОТ-ПЦР необходимы праймеры, полученные к консервативным областям генома вируса бешенства. Обычно используются гены, кодирующие нуклеопротеин или N-белок.

Метод ПЦР высокоспецифичен и очень чувствителен. Является одним из наиболее точных тестов детекции рабического антигена, позволяет диагностировать бешенство даже при наличии в материале хотя бы одного вириона. В основе теста лежит комплементарное достраивание РНК-матрицы, осуществляемое in vitro с помощью фермента РНК-полимеразы. В последние годы ПЦР находит все более широкое применение для диагностики и мониторинга вирусных инфекций. Однако методика проведения сложна, дорогостояща и пока недостаточно унифицирована для рутинного применения.

Цитологические методы в настоящее время имеют ограниченное диагностическое значение, но при ряде инфекций по-прежнему должны применяться. Исследуются материалы аутопсии, биопсии, мазки, которые после соответствующей обработки окрашиваются и анализируются под микроскопом. При бешенстве — это выявление включений в цитоплазме клеток (тельца Бабеша – Негри).

Выделение вируса. Выделение вируса может быть необходимым для подтверждения результатов тестов по определению антигена и для более детальной характеристики изолятов. И хотя этот метод является одним из самых старых и трудоемких методов диагностики, сегодня выделение вируса с последующей идентификацией с помощью одного из современных методов (ИФА с моноклональными антителами или ПЦР) является наиболее достоверным методом диагностики, т. н. «золотой стандарт».

Результативность методов диагностики бешенства может варьировать в зависимости от ряда факторов (стадии болезни, сроков забора материала, качества полученных проб, условий их хранения, опытности персонала, качества реактивов и др.). Если положительный результат подтверждает бешенство, то отрицательный не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. Поэтому при бешенстве эксперты ВОЗ рекомендуют использовать несколько тестов, особенно МФА в сочетании с биопробой на новорожденных (2–3 дневных) белых мышах.

Все работы с материалом, предположительно содержащим вирус бешенства, равно как и с животными, подозрительными на бешенство, должны проводиться с соблюдением мер личной безопасности. Медицинские работники и ветеринарные врачи должны работать в халатах, перчатках, масках.

По окончанию работы боксы обрабатывают 3% раствором перекиси водорода.

Флаконы, ампулы и инструменты, а также оставшиеся материалы, содержащие вирус бешенства, и всю посуду после работы обеззараживают автоклавированием в течение 1 часов при 1,5 атм (режим «убивки»).

Средства индивидуальной защиты обеззараживают кипячением или автоклавированием. Рабочую поверхность стола и руки обеззараживают дезраствором (0,5% раствор хлорамина).

источник

Бешенство – это острое инфекционное заболевание вирусного генеза, при котором происходит тяжелое поражение нервной системы. Болезнь в стадии клинических проявлений практически всегда завершается летальным исходом. В этой статье рассмотрены все признаки и симптомы бешенства у человека.

Задать вопрос специалисту Поиск врача Комментарии

Каждый год от бешенства умирают десятки тысяч человек во всем мире. Заболевание распространено более чем в 150 странах.

Синонимами названия болезни являются «рабиес», «гидрофобия», «водобоязнь».

Эта болезнь известна с давних времен. Случаи инфицирования бешенством человека от животных (диких или домашних) были описаны еще в древних манускриптах. Вплоть до конца XIX века человек, зараженный бешенством, был обречен на неминуемую смерть. Только в 1885 году Луи Пастер изобрел антирабическую вакцину, которая с тех пор спасла жизни миллионов людей.

Возбудитель заболевания – вирус бешенства (Rabies virus), который относится к семейству Рабдовирусы.

  • Циркуляция и сохранение возбудителя бешенства в природных условиях осуществляется у разнообразных теплокровных животных. Причем у некоторых из них (например, у летучих мышей) бешенство может длительно протекать в бессимптомной форме.
  • Наиболее восприимчивы к заражению некоторые представители семейства псовых (к примеру, волки, собаки, лисицы), кошачьих – рыси, кошки, а также еноты, барсуки и другие виды животных.
  • Инфицирование человека производится при попадании зараженной слюны животного на поврежденную кожу или слизистые оболочки. Наиболее часто – это укус или ослюнение царапин, ссадин и других внешних повреждений.
  • Заражение от человека наблюдаются крайне редко и некоторыми учеными оспаривается.

Бешенство классифицируют по нескольким критериям.

Длительность каждой стадии составляет обычно от одного до трех-пяти дней.

Скорость развития заболевания зависит от локализации места укуса и количества проникшего вируса.

Длительность заболевания обычно составляет 6–8 дней. Встречаются случаи и короткого течения болезни – от одного до трех дней.

Иногда встречается атипичное течение заболевания, особенно у детей. При этом может отсутствовать период возбуждения, а мышечный паралич распространяется на все тело постепенно, начиная от места укуса.

Читайте также:  Куда обратиться с бешенством у собаки

Диагностические мероприятия при подозрении на бешенство включают в себя несколько подходов.

  • В анамнезе есть указания на нарушение целостности кожных покровов и/или слизистых оболочек с попаданием слюны животного с подозрением на бешенство.
  • Специфические клинические проявления болезни.
  • Положительные результаты обследования на бешенство у подозрительного животного (при возможности) и у зараженного человека.

При проведении общеклинических методов исследования патогномоничных признаков заболевания не выявляется. Для подтверждения диагноза используются различные специфические лабораторные тесты.

  • Для прижизненного подтверждения диагноза исследуются биоптаты кожи (обычно – с затылка и задней поверхности шеи), мазки-отпечатки роговицы, мазки слюны и спинномозговой жидкости.
  • Применяются лабораторные методы, основанные на выделении самого вируса, определении его РНК и антигена.
  • Необходимо проведение нескольких тестов для подтверждения диагноза.
  • В посмертной диагностике используется, в основном, гистологическое исследование биоптата мозга. При этом выявляются характерные тельца Бабеша-Негри. Иногда требуется проведение и других иммунологических анализов.
  • Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Используется для экспресс-анализа бешенства.
  • Иммуноферментный анализ (ИФА).
  • Реакция диффузионной преципитации. Используется реже ввиду меньшей специфичности в сравнении с ИФА и РИФ.
  • Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Применяется для определения РНК возбудителя в биологическом материале. Современный и высокочувствительный метод диагностики.
  • Методики выделения вируса (биопроба на белых мышах и на культуре клеток) сейчас применяются очень редко.

Специфической терапии заболевания нет. К сожалению, все больные с клинической симптоматикой бешенства умирают.

При возникновении проявлений заболевания возможно лишь провести симптоматическое лечение: применение анестезирующих, противосудорожных средств и т. п.

Если же в течение самого короткого времени после предполагаемого заражения провести курс профилактических мероприятий, то развития заболевания в большинстве случаев можно избежать.

При развитии проявлений заболевания смертельный исход неизбежен ввиду отсутствия эффективного лечения. Смерть наступает от паралитической остановки дыхательной и сердечной деятельности.

При контакте (укус или ослюнение) с животным с признаками бешенства следует в экстренном порядке обратиться за медицинской помощью в любое ближайшее учреждение здравоохранения.

При этом по возможности следует установить наблюдение за таким животным на протяжении десяти дней. Для этого подозрительное животное доставляется к ветеринару, который сообщает о результатах наблюдения медицинскому учреждению, осуществляющему вакцинацию пострадавшего лица.

  • Неспецифическая. Локальная обработка раны – незамедлительное промывание водой с мылом, моющими веществами, дезинфицирующими растворами и т. п. Длительность такой обработки должна быть не менее 15 минут.
  • Специфическая. Применение антирабической вакцины и специфического иммуноглобулина в качестве иммунизации.
  • Контакт с явно больными, подозрительными, неизвестными или же дикими животными.
  • При любом ранении предметами, на которых имеются частички слюны или мозгового вещества таких животных.
  • Контакт с внешне здоровым на этот момент животным, которое на протяжении десятидневного срока контроля заболело, умерло или исчезло.
  • При ослюнении или травме кожи и/или слизистых оболочек, которые нанесены больным человеком.

Антирабическую вакцину вводят сразу же в день укуса и далее по определенной схеме выполняют пять инъекций в течение четырех недель. ВОЗ рекомендует дополнительное проведение еще одной инъекции вакцины через три месяца от начала специфической вакцинации.

Антирабический иммуноглобулин применяют по показаниям. Как правило, его раствором обкалывают место укуса.

Другим направлением специфической профилактики является вакцинация лиц группы риска: охотников, ветеринаров, спелеологов и т. д.

Домашние животные должны подвергаться антирабической вакцинации в соответствии с ветеринарным календарем.

Прогноз при развитии типичной клинической картины заболевания бешенством всегда неблагоприятный. Летальный исход вероятен фактически во всех случаях.

При своевременном и правильном применении профилактических мероприятий после предполагаемого заражения практически всегда удается избежать прогрессирования заболевания.

Нашли ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl + Enter

Кандидоз – это местное или системное поражение человеческого организма грибками рода Кандида (Candida), которые в нормальных условиях относятся к его.

Бешенство является смертельно опасной инфекцией, которой подвержены как животные, так и люди. Страшный вирус поражает головной мозг и нервную систему, неминуемо приводя больного к летальному исходу.

Впервые обнаруженное еще в I веке до н.э. это инфекционное поражение унесло миллионы жизней, однако до наших дней лечения этого заболевания так и не придумали. Единственным способом обезопасить себя от возможного заражения считается иммунизация с введением в организм специальной антирабической вакцины. В данной статье изучим причины, по которым развивается бешенство у человека – признаки, симптомы и лечение этого недуга, а также затронем тему необходимости вакцинации.

Бешенство передается человеку от животных (лис, волков, летучих мышей, грызунов) которые являются переносчиками инфекции. Но особенно часто болезнь распространяется с укусом бешеных собак или зараженных летучих мышей. В этом плане риск инфицирования высок у сотрудников ветеринарных служб и лиц, занимающихся отловом бродячих животных. Кроме того, нередко бешенство обнаруживают у детей, решивших поиграть с бездомным животным. Вообще же данное заболевание наиболее распространено в слаборазвитых странах, где контроль вакцинации против вируса бешенства очень низкий.

После укуса животным, находящийся в слюне вирус попадает в кровь. Период инкубации болезни может растянуться на 10–40 дней, правда после появления первых признаков недуга, больному остается жить не больше 10 суток. Смертельный вирус с кровью разносится по организму, достигая нервных клеток мозга, поражая, зрительный бугор, мозжечок и вызывая отек мозга. У больного при этом появляются судороги конечностей и дыхательных мышц, вызванные острым энцефалитом. Смерть, в большинстве случаев, наступает от паралича дыхательной системы.

Тут необходимо заметить, что длительность инкубационного периода во многом зависит от места укуса. Если животное укусило человека в шею или лицо, первые признаки болезни могут появиться уже через десять дней, тогда как укус в конечность может дать знать о себе лишь через два месяца.

Коварство заболевания в том, что некоторые люди могут не уделить внимания укусу животного. К примеру, маленькие дети могут и вовсе не сказать родителям о произошедшем инциденте. И даже появившаяся краснота в месте укуса, отечность и зуд не всегда становятся поводом для обращения к врачу. А ведь от правильных и своевременных действий укушенного во многом зависит его жизнь.

Как это ни прискорбно, но на данный момент не существует препарата, способного вылечить бешенство. Правда предотвратить необратимые последствия можно, причем есть все шансы сделать это сразу после укуса животного. Для борьбы со смертельно опасным вирусом ученые разработали специальную вакцину от бешенства. Вакцина первого типа вводится всем желающим иметь иммунитет от возможного заражения. В этом случае пациенту вводят 3 прививки с разницей в 7 дней. Такая вакцинация гарантирует защиту организма от попадания вируса на два года.

Если же человека укусило животное, важно как можно раньше обратиться в лечебное учреждение, где пациенту предстоит пройти курс из 5 инъекций антирабической сыворотки. Прививки вводятся через равные промежутки времени на протяжении 28 дней. Первую инъекцию желательно ввести не позднее, чем на 2-й день после укуса животного. В этом случае гораздо больше шансов на то, что организм приобретет иммунитет к вирусу бешенства до того, как болезнь начнет свое разрушительное действие.

В случае если удалось отловить укусившее человека животное, его необходимо отправить в ветеринарный центр на обследование. Если выяснится, что животное не заражено, введение противовирусных инъекций можно прекратить.

Рассмотрев причины, по которым развивается бешенство у человека – признаки, симптомы и лечение этого заболевания, вы будете знать, как обезопасить себя от столь опасного вируса. Здоровья вам!

Возбудитель — вирус бешенства.

Устойчив к низкой температуре, погибает от УФ-облучения, 3-5% карболовой кислоты, от действия высокой температуры, 3% лизола и хлорамина, щелочей и кислот. Различают вирус «дикий» — высокопатогенный для теплокровных, и «фиксированный», полученный в условиях лаборатории. Размножение вируса сопровождается образованием телец Бабеша—Негри, специфических включений в нейронах.

Источники и резервуары инфекции: собаки, летучие мыши, кошки, волки, лисы, песцы, корсаки, енотовидные собаки, барсуки, хорьки, бобры, куницы, лоси, крысы, рыси, дикие кошки, белки, КРС, свиньи, хомяки, медведи, нутрии, ондатры. Домашние животные заражаются обычно от диких. Человек заражается при укусах, попадании слюны на кожу, слизистые. Может быть заражение через предметы, на которые попала слюна животных, и загрязненные мозгом животных. Группами риска являются охотники, лесники, ветеринары, собаколовы, таксидермисты.

Бешенство представляет собой вирусный энцефаломиелит. Инкубационный период бывает различным. Продромальная стадия характеризуется неспецифическими проявлениями: лихорадкой, тошнотой, рвотой, парестезиями и болями в области укуса. Стадия возбуждения сопровождается мышечными спазмами, спазмом глотки, водобоязнью и состоянием психомоторного возбуждения. Реже наблюдается паралитическое течение с постепенным нарастанием вялых парезов. Во всех случаях наблюдается летальный исход (время от укуса до смерти составляет в 84% случаев от 10 дней до 3 мес.).

Чаще — 30-90 дней. Он короче, если укус локализуется на голове, шее, руках, промежности.

Период возбуждения — 2-3 дня, понижение АД, повышение потливости, возбуждение, агрессия, буйство, мышечные спазмы. Это проявляется в виде приступов — пароксизмов. Между ними сознание проясняется. Характерны: слюнотечение, судороги глотки, гортани, диафрагмы, нарушение глотания и дыхания. Приступы возникают из-за попытки пить (гидрофобия), акустикофобии (реакция на громкие звуки), фотофобии (на свет), аэрофобии (на воздух).

Паралитическая стадия: прекращаются судороги и фобии. У 20% больных период возбуждения отсутствует и развивается паралитическое, или немое, бешенство. Параличи могут быть диффузными и симметричными.

Паралитическое бешенство чаще развивается после укуса летучих мышей. Продолжительность болезни — 1 неделя. Летальность— 100%.

Диагностика основана на выявлении вируса бешенства в слюне, смыве с глотки, биоптате роговицы, кожи, ЦСЖ, биоптате головного мозга, повышении титра антител в сыворотке и ЦСЖ

  • паспортных данных (профессия из группы риска);
  • клиники (слюнотечение, рубцы на месте укуса, неспособность больного глотать воду, дезориентация, галлюцинации, фобии, судороги, васцикуляция мышц, ступор, кома);
  • эпиданамнеза (укусы, ранения, попадания слюны, ткани мозга). Выяснить судьбу животного (здоровое, погибло, заболело, исчезло);
  • гистологических исследований мозга умерших людей;
  • радиоиммунного теста;
  • исследований культуры ткани;
  • РНГА, РСК;
  • биологической пробы на мышах;
  • метода флюоресцирующих антител для обнаружения антигена.
  • Симптоматическая интенсивная терапия.
  • Госпитализация и постоянное наблюдение при подозрении на бешенство.

Иммунопрофилактические мероприятия, в том числе вакцинация инактивированной культурой клеток вируса, своевременно проведенная после укуса животного, надежно предотвращают заболевание.

  • До заражения: иммунизация проводится среди представителей профессий, контактирующих с животными. Повторную иммунизацию производят через год, последующие — через 2—5 лет.
  • После заражения: обработку раны производят с помощью мыла и, воды (или детергентов), а также 70% раствора алкоголя или настойки йода.

Показания к вакцинации против бешенства после укуса животного

  • При прикосновении к животным, даче им корма, попадании слюны животного на интактные кожные покровы: вакцинация не проводится.
  • При наличии поверхностных царапин на коже, нанесенных зубами или когтями животного, не сопровождавшихся выделением крови и при попадании слюны животного на кожу в местах ее раздражения проводят активную иммунизацию.
  • При наличии любой раны, нанесенной когтями или зубами животного, производят иммунизацию.
  • Активную иммунизацию проводят путем введения 1 мл вакцины против бешенства в/м на 1,3, 7, 14, 30 и 90-й дни после заражения.
  • Пассивную иммунизацию проводят путем введения человеческого иммуноглобулина, при этом половина дозы вводится внутримышечно (в ягодичную мышцу, контра-латеральную стороне активной иммунизации), а половина — инсталлируется в рану и вокруг нее.

источник

Бешенство — острая инфекционная болезнь, протекающая с тяжелым поражением нервной системы, как правило, с леталь­ным исходом. Восприимчивы человек и все млекопитающие жи­вотные.

Бешенство распространено повсеместно. Возбудителя инфек­ции передают собаки, кошки, дикие грызуны и хищники, а также кровососущие летучие мыши-вампиры.

Продолжительность инкубационного периода зависит от ме­ста и силы укуса, количества и вирулентности попавшего в рану вируса, резистентности покусанного животного. Инкубационный период длится от 1—3 нед до года и даже более.

Болезнь протекает остро. Клинические признаки ее в основ­ном одинаковы у всех животных, но наиболее типичны они у со­бак, у которых может наблюдаться как буйное, так и тихое (па­ралитическое) течение болезни. У крупного рогатого скота бе­шенство может протекать атипично (потеря аппетита, атония рубца, паралич глотки, слюнотечение). Стадии возбуждения мо­жет не быть.

Патологоанатомические изменения неспецифичны. У мясоедных (в основном у собак) в желудке можно обнаружить инородные предметы.

Вирус бешенства обладает выраженной нейропробазией. Про­никая с периферии (место укуса) по нервным стволам в централь­ную нервную систему центростремительно, он распространяется в организме центробежно по периферическим нервам и попадает в разные органы, включая слюнные железы.

Вирус относится к семейству Rhabdoviridae,родуLyssavirus. Вирионы имеют форму стержня с обрубленным концом. Вирион виру­са — РНК-содержащий со спиральным типом симметрии, имеет липопротеидную оболочку. Низкие температуры консервируют вирус. Температура 60 °С убивает его через 5—10 мин, солнечный свет — за 5—7 дней. Растворы формалина, фенола, соляной кислоты (5%-ные) инактивируют вирус за 5—10 мин.

Вирион вируса бешенства содержит гликопротеидный (наруж­ный) и нуклеокапсидный (внутренний) антигены. Гликопротеидный антиген индуцирует образование вируснейтрализующих анти­тел, а нуклеокапсидный — комплементсвязывающих и преципитирующих антител.

В организме вирус локализуется главным образом в централь­ной нервной системе, а также в слюнных железах и слюне.

Культи­вируется на мышах, кроликах, морских свинках и других живот­ных, а также в первичных культурах клеток (почки хомячка, эмбриона овец, телят и др.) и перевиваемых клетках. Размножение вируса в культурах клеток не всегда проявляется ЦПД. К вирусу бешенства после предваритель­ной адаптации восприимчивы и куриные эмбрионы. Вирус индуци­рует образование цитоплазматических телец-включений, которые чаще всего обнаруживают в клетках аммонова рога, мозжечка, коры головного мозга.

Источником инфекции являются больные животные. Они переда­ют вирус во время укуса. Плотоядные животные могут заражаться при поедании головного и спинного мозга погибших от бешенства животных. Доказана возможность заражения бешенством аэрогенным путем (в местах, где имеются летучие мыши). До 60-х годов основ­ным источником распространения бешенства были собаки и кошки, позднее лисицы, волки, корсаки и другие дикие животные.

Диагноз на бешенство ставят на основании эпизоотологических, клинических данных и результатов лабораторных исследований, име­ющих решающее значение.

При работе с больными животными и инфекционным мате­риалом необходимо строго соблюдать меры личной безопаснос­ти: надевать резиновые перчатки, халаты с нарукавниками, ре­зиновый или полиэтиленовый фартук, резиновые сапоги, защит­ные очки, защитную маску на лицо.

Читайте также:  Бешенство собак укусила лиса

Вскрывать подозрительных на заболевание бешенством жи­вотных в полевых условиях запрещено.

Получение пат.материала. Для исследования на бешенство направляют в лабораторию свежие трупы мелких животных целиком, а от крупных и средних животных — голову с двумя первыми шейными позвонками. Трупы мелких животных перед отправкой на исследование обрабатывают инсектици­дами.

Патологический материал упаковывают в пластмассовые меш­ки, вкладывают в плотно закрывающиеся ящики с влагопоглощающей прокладкой, пропитанной дезинфектантом. Материал и сопроводительное письмо, в котором указаны отправитель и его адрес, вид животного, анамнестические данные и обоснование подозрений в заболевании животного бешенством, дата и подпись врача.

Лабораторная диагностика. Она включает: обнаружение вирус­ного антигена в РИФ и РДП, телец Бабеша-Негри и биопробы на белых мышах.

РИФ. Для данной реакции биопромышленность выпускает флуо­ресцирующий антирабический гамма-глобулин.

Методика постановки РИФ. На обезжиренных предметных стек­лах готовят тонкие отпечатки или мазки из различных отделов голов­ного мозга левой и правой стороны (аммонов рог, кора полушарий, мозжечок, продолговатый мозг). Готовят не менее двух препаратов каждого отдела мозга. Можно также исследовать спинной мозг, подчелюстные, слюнные железы. Для контроля делают препараты из мозга здорового животного (обычно белой мыши).

Препараты высушивают на воздухе, фиксируют в охлажденном ацетоне (минус 20 °С от 4 до 12 ч), высушивают на воз­духе наносят Флуоресцирующий гамма-глобулин, помещают во влаж­ную камеру при 37 °С на 25—30 мин, затем тщательно промывают физиологическим раствором или фосфатным буфером с рН 7,4, спо­ласкивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе, нано­сят нефлуоресцирующее иммерсионное масло и просматривают под люминесцентным микроскопом.

В препаратах, содержащих антиген вируса бешенства наблюдаются разной величины и формы флуорес­цирующий желто-зеленым цветом гранулы в нейронах, но чаще вне клеток.

В контроле подобного свечения не должно быть, нервная ткань обычно светится тусклым сероватым или зеленоватым цветом. Интенсивность свечения оценивают в крестах.

Отрицатель­ным считают результат при отсутствии специфической флуоресцен­ции.

Материал от животных, вакцинированных против бешенства, нельзя исследовать в РИФ в течение 3 мес. после прививки, так как может быть флуоресценция антигена вакцинного вируса.

В РИФ не подлежат исследованию ткани, консервированные глицерином, формалином, спиртом и

т. д., а также материал, име­ющий признаки даже незначительного загнивания.

РДП в агаровом геле. Метод основан на свойстве ан­тител и антигенов диффундировать в агаровом геле и при встрече образовывать видимые визуально линии преципитации (комплекс антиген +антитело). Применяют для обнаружения антигена в мозге животных, павших от уличного вируса бешенства, или при экспери­ментальной инфекции (биопроба).

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Папиллярные узоры пальцев рук — маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

источник

Бешенство — острая инфекционная болезнь, протекающая с тяжелым поражением нервной системы, как правило, с летальным исходом.

Восприимчивы человек и все теплокровные животные. Бешенство регистрируется в разных странах мира.

Характеристика возбудителя. Вирус относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus. РНК-содержащий. Геном представлен единой односииралыюй линейной молекулой минус-РНК. Вирионы вируса состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки с гликопротеиновыми булавовидными выступами. Вирион пулеобразной формы, средний размер его 180-175 нм.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. Низкие температуры консервируют вирус. Для него губительны высокие температуры (80—100 °С), в гниющем материале вирус может сохраняться до двух недель. Дезинфицирующие средства (растворы формальдегида, едкой щелочи, хлорной извести) в обычных концентрациях действуют на вирус губительно.

Антигенная структура. Вирионы вируса бешенства содержат гликопротеидный (наружный) и нуклеокапсидный (внутренний) антигены Гликопротеидный антиген индуцирует образование вируснейтрализующих и антигемагглютинирующих антител и обеспечивает развитие иммунитета у животных, а нуклеокапсидный — комплементсвязывающих и преципитирующих антител.

Вирус бешенства имеет 4 серотипа (прототипы): вирус бешенства, Лагос, Мокола, Дювенхейдж. Эпизоотические штаммы вируса бешенства в иммунобиологическом отношении родственные, но различаются по вирулентности. Все выделенные штаммы вируса по вирулентности разделяют на 5 групп. Штаммы первой группы характеризуются высокой, а пятой группы — низкой вирулентностью.

Спектр патогенности вируса тесно связан с его экологией, которая имеет особенности. Так, необходимо различать два основных и независимых эпизоотических проявления лиссавирусной инфекции:

1) эпизоотии бешенства, поддерживаемые наземными животными (лисицы, волки, енотовидные собаки, шакалы, мангусты, скунсы, еноты-полоскуны и др.);

2) эпизоотии хироптерного происхождения, поддерживаемые вампирами, насекомоядными и плотоядными летучими мышами.

С 1960-х годов бешенство диких животных стало преобладающим. Основным резервуаром и источником инфекции оказались лисицы и другие дикие животные. Болезнь у них может протекать латентно, обеспечивая персистенцию вируса в естественных условиях. Бешенство собак при городских эпизоотиях, как правило, заканчивается их гибелью.

Антигенная активность. Животные, иммунизированные против бешенства, продуцируют вируснейтрализующие, комплементсвязывающие, преципитирующие, антигемагглютинирующие и литические (разрушающие клетки, зараженные вирусом, в присутствии комплемента) антитела.

Вирус обладает гемагглютинирующими свойствами в отношении эритроцитов гусей, кур, морских свинок, овец, человека (группы 0). Обычно реакцию гемагглютинации ставят с эритроцитами гуся при 0—4 °С, pH 6,2—6,4. Между инфекционной и гемагглютинируюгцей активностью существует линейная зависимость.

Культивирование вируса. В лабораторных условиях вирус можно культивировать на лабораторных животных (мышатах, кроликах, хомячках, морских свинках и др.) при интрацеребральном методе сражения. Вирус репродуцируется в первичных и перевиваемых культурах клеток (почках сирийского хомячка, эмбрионах овец, телят, ВНК-21, клетках невриномы Гассерова узла крысы и др.). В первых пассажах вирус размножается медленно, не вызывая ЦПД. К вирусу бешенства после предварительной адаптации восприимчивы и куриные эмбрионы.

Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится на всех видах теплокровных животных.

Клинические признаки. Продолжительность инкубационного периода зависит от места укуса, характера раны, количества и вирулентности попавшего в рану вируса, вида, возраста и резистентности покусанного животного. Инкубационный период длится от одной недели до года и даже дольше. Клиническое проявление болезни в основном одинаково у всех животных, но наиболее типично оно у собак, у которых можно наблюдать как буйное, так и тихое (паралитическое) течение болезни. У крупного рогатого скота бешенство может протекать атипично (потеря аппетита, атония рубца, паралич глотки, слюнотечение). Стадии возбуждения может не быть.

Патологоанатомические изменения. Вскрывать подозрительных по заболеванию бешенством животных в полевых условиях запрещено.

У мясоядных (в основном у собак) в желудке можно обнаружить инородные предметы.

Локализация вируса. Вирус бешенства обладает выраженной нейропробазией. Проникая центростремительно с периферии (место укуса) по нервным стволам в центральную нервную систему, в организме он распространяется центробежно по периферическим нервам и попадает в разные органы, включая слюнные железы.

В организме вирус локализуется главным образом в центральной нервной системе, а также в слюнных железах и слюне. Доказано нахождение вируса в некоторых внутренних органах. Из организма выделяется со слюной, через легкие, кишечник и с мочой.

Источник инфекции — больные животные. Они передают вирус во время укуса. Возможно заражение при ослюнении поврежденной кожи. Плотоядные животные могут заражаться при поедании головного и спинного мозга погибших от бешенства животных. Доказана возможность заражения бешенством аэрогенным путем (в местах, где имеются летучие мыши). До 1960-х годов основным источником распространения бешенства были собаки и кошки, позднее лисицы, волки, корсаки и другие дикие животные.

Диагностика. Диагноз на бешенство ставят на основании эпизоотологических, клинических данных и результатов лабораторных исследований, имеющих решающее значение.

При работе с больными животными и инфекционным материалом необходимо строго соблюдать меры личной безопасности: надевать резиновые перчатки, халаты с нарукавниками, резиновый или полиэтиленовый фартук, резиновые сапоги, защитные очки, защитную маску на лицо.

Лабораторная диагностика. Для исследования на бешенство направляют в лабораторию свежие трупы мелких животных целиком, а от крупных и средних животных — голову с двумя первыми шейными позвонками. Трупы мелких животных перед отправкой на исследование обрабатывают инсектицидами.

Патологический материал упаковывают в пластмассовые мешки, вкладывают в плотно закрывающиеся ящики с влагопоглощающей прокладкой, пропитанной дезинфектантом. Материал и сопроводительное письмо, в котором указывают отправителя и его адрес, вид животного, анамнестические данные и обоснование подозрения в заболевании животного бешенством, дату и подпись врача, отправляют с нарочным.

Лабораторная диагностика включает: обнаружение вирусного антигена в РИФ и РДП, телец Бабеша—Негри и биопробу на белых мышатах.

РИФ. Для данной реакции биопромышленность выпускает флуоресцирующий антирабический γ-глобулин.

На обезжиренных предметных стеклах готовят тонкие отпечатки или мазки из различных отделов головного мозга левой и правой стороны (аммонов рог, кора полушарий, мозжечок и продолговатый мозг). Готовят не менее двух препаратов каждого отдела мозга. Можно также исследовать спинной мозг, подчелюстные слюнные железы. Для контроля делают препараты из мозга здорового животного (обычно белой мыши).

Препараты высушивают на воздухе, фиксируют в охлажденном ацетоне (минус 15—20 °С) от 4 до 12 ч, высушивают на воздухе, наносят специфический флуоресцирующий γ-глобулин, помещают во влажную камеру при 37 °С на 25—30 мин. Затем тщательно промывают физиологическим раствором или фосфатным буфером с pH 7,4, споласкивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе, наносят нефлуоресцирующее иммерсионное масло и просматривают под люминесцентным микроскопом. В препаратах, содержащих антиген вируса бешенства, наблюдают разной величины и формы флуоресцирующие желто-зеленым цветом гранулы в нейронах, но чаще вне клеток. В контроле подобного свечения не должно быть, нервная ткань обычно светится тусклым сероватым или зеленоватым цветом. Интенсивность свечения оценивают в крестах. Отрицательным считают результат при отсутствии специфической флуоресценции.

Материал от животных, вакцинированных против бешенства, нельзя исследовать в РИФ 3 мес после прививки, так как может быть флуоресценция антигена вакцинного вируса.

В РИФ не подлежат исследованию ткани, консервированные глицерином, формалином, спиртом и т. д., а также материал, имеющий признаки даже незначительного загнивания.

РДП в агаровом геле. Метод основан на свойстве антител и антигенов диффундировать в агаровом геле и при встрече образовывать видимые визуально линии преципитации (комплекс антиген + антитело). Применяют для обнаружения антигена в мозге животных, павших от уличного вируса бешенства, или при экспериментальной инфекции (биопроба).

Реакцию ставят на предметных стеклах, на которые наливают 2,5—3 мл расплавленного 1,5 %-ного раствора агара.

Агаровый гель: агар Дифко — 15 г, натрия хлорид — 8,5 г, 1%-ный раствор метилового оранжевого в 50%-ном этиловом спирте — 10 мл, мертиолят — 0,01 г, дистиллированная вода — 1000 мл.

После застывания в агаре делают лунки по трафарету диаметром 4—5 мм, помещенному под предметное стекло с агаром. Агаровые столбики вынимают ученическим пером. Лунки в агаре заполняют компонентами по схеме.

От крупных животных исследуют все отделы головного мозга (левой и правой стороны), от средних (крысы, хомяки и др.) — какие-либо три отдела мозга, у мышей — весь мозг. С помощью пинцета из мозга готовят пастообразную массу, которую и помещают в соответствующие лунки.

Контроли с положительным и отрицательным антигенами ставят на отдельном стекле по тому же трафарету.

После заполнения лунок компонентами препараты помещают во влажную камеру и ставят в термостат при 37 °С на 6 ч, затем оставляют при комнатной температуре на 18 ч. Учет результатов ведут в течение 48 ч.

Реакцию считают положительной при появлении между лунками, содержащими суспензию мозга и антирабический γ-глобулин, одной или двух-трех линий преципитации любой интенсивности.

Бактериальная контаминация и загнивание мозга не препятствуют использованию его для РДП. Материал, консервированный глицерином, формалином и другими средствами, для РДП непригоден.

Выявление телец Бабеша—Негри. На предметных стеклах делают тонкие мазки или отпечатки из всех отделов головного мозга (как для РИФ), не менее двух препаратов из каждого отдела мозга, и окрашивают по одному из методов (по Селлерсу, Муромцеву, Манну, Ленцу и т. д.).

Пример окраски по Селлерсу: на свежий, невысохший препарат наносят краситель (одна часть 1%-ного раствора основного фуксина, смешанная с двумя частями 1%-ного метилового синего), покрывая им весь препарат, выдерживают 10—30 с и смывают фосфатным буфером (pH 7,0—7,5), высушивают в вертикальном положении при комнатной температуре (в затемненном месте) и просматривают под микроскопом с масляной иммерсией.

Положительным результатом считают наличие телец Бабеша—Негри — четко очерченных овальных или продолговатых гранулированных образований розово-красного цвета, расположенных в цитоплазме клеток или вне их.

Данный метод имеет диагностическое значение только при обнаружении типичных специфических включений.

Биопроба. Она более эффективна по сравнению со всеми указанными выше методами. Ее ставят при получении отрицательных результатов предыдущими методами и в сомнительных случаях.

Для биопробы отбирают белых мышей массой 16—20 г. Нервную ткань из всех отделов головного мозга растирают в ступке со стерильным песком, добавляют физиологический раствор до получения 10%-ной суспензии, отстаивают 30—40 мин и используют надосадочную жидкость для заражения мышат. При подозрении на бактериальное загрязнение добавляют на 1 мл суспензии по 500 ЕД пенициллина и стрептомицина и выдерживают 30—40 мин при комнатной температуре.

На одну биопробу заражают 10 — 12 мышат: половину интрацеребрально по 0,03 мл, половину подкожно в область носика или в верхнюю губу по 0,1—0,2 мл.

Зараженных мышат помещают в стеклянные банки (лучше аквариумы) и наблюдают за ними в течение 30 дней, ведя ежедневную регистрацию. Гибель мышей в течение 48 ч считают неспецифической и не учитывают в оценке результатов. При наличии вируса бешенства в патологическом материале с 7—10-го дня после заражения у мышей наблюдают следующие симптомы: взъерошенность шерсти, своеобразную горбатость спины, нарушение координации движений, паралич задних, затем передних конечностей и гибель. У павших мышей головной мозг исследуют в РИФ, на обнаружение телец Бабеша—Негри и ставят РДП.

Биопробу на бешенство считают положительной, если в препаратах из мозга зараженных мышат обнаруживают тельца Бабеша— Негри или выявляют антиген методами РИФ или РДП. Отрицательный диагноз — отсутствие гибели мышат в течение 30 дней.

Рекомендуют для ранней диагностики методом биопробы (особенно это важно, когда исследуемое животное покусало человека) использовать для заражения не 10—12, а 20—30 мышат, и с третьего дня после заражения ежедневно забивать по 1—2 мышонка для исследования их головного мозга в РИФ. Это позволяет (в положительных случаях) сократить срок исследования на несколько дней.

Читайте также:  Бывает ли бешенство у слонов

В лабораторной практике иногда ставят метод так называемой специфической биопробы. Сущность его в том, что мыши заболевают при заражении мозговой тканью больных бешенством животных и не заболевают, если эту ткань предварительно обработать (10 мин при 37 °С) антирабической сывороткой.

Некоторые исследователи рекомендуют проводить прижизненную диагностику бешенства методом иммунофлуоресцентного исследования отпечатков роговицы подозреваемых в заболевании бешенством животных, но эффективность этого метода невысока.

Обычно в лаборатории проводят исследование в следующей последовательности: из головного мозга делают мазки-отпечатки для РИФ и обнаружения телец Бабеша—Негри, ставят РДП, при получении отрицательных результатов делают биопробу.

При высококвалифицированном выполнении РИФ получают 99—100 % совпадения с биопробой. Тельца Бабеша—Негри выявляют лишь в 65—85 % случаев бешенства, в РДП — от 45 до 70 %.

Специфическая профилактика. В настоящее время для профилактики бешенства применяют инактивированные и живые вакцины. Условно вакцины можно разделить:

на вакцины первого поколения, которые готовят из головного мозга животных, инфицированных фиксированным вирусом бешенства;

вакцины второго поколения, которые готовят из штаммов вируса бешенства, адаптированных к культуре клеток;

вакцины третьего поколения, которые получают с помощью генно-инженерных методов.

За рубежом разработали и в некоторых странах успешно применяют рекомбинантную вакцину, которая содержит рекомбинантный вирус оспы, несущий ген основного гликопротеина оболочки вируса бешенства.

В настоящее время начата разработка и показана возможность применения ДНК-вакцин для профилактики бешенства. В России и СНГ широко применяют инактивированную вакцину из штамма Щелково-51, которую готовят с использованием культуры клеток ВНК-21.

Достижения науки по оральной вакцинации лисиц в естественных условиях природы представляют значительную веху в борьбе с природными очагами инфекции.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

источник

РЦРЗ (Республиканский центр развития здравоохранения МЗ РК)
Версия: Клинические протоколы МЗ РК — 2015

Бешенство является зоонозным заболеванием, вызываемым РНК-содержащими вирусами семейства Rhabdoviridae, рода Lyssavirus (16–19). Вирус, как правило, находится в слюне клинически больных млекопитающих и передается через укус. После проникновения в центральную нервную систему следующего организма, вирус вызывает острый, прогрессирующий энцефаломиелит, который почти всегда является смертельным.
Инкубационный период бешенства длится обычно 1-3 месяца, но может варьироваться от менее 1 недели до более одного года. [1]

Код (коды) по МКБ-10:
А82 Бешенство
A82.0 Лесное бешенство
A82.1 Городское бешенство
A82.9 Бешенство неуточненное

Сокращения, используемые в протоколе:

Дата разработки протокола: 2015 год.

Категория пациентов: взрослые.

Пользователи протокола: терапевты, врачи общей практики, врачи/фельдшера скорой медицинской помощи, инфекционисты, неврологи, травматологи, хирурги, анестезиологи-реаниматологи.

Пример формулировки диагноза: Бешенство, бульбарная форма, стадия возбуждения.

Клиническая классификация бешенства

II. МЕТОДЫ, ПОДХОДЫ И ПРОЦЕДУРЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ

Перечень основных и дополнительных диагностических мероприятий [1,2,3,4,5,6]

Основные диагностические исследования, проводимые на амбулаторном уровне: не проводятся.

Дополнительные диагностические исследования, проводимые на амбулаторном уровне: не проводятся.

Минимальный перечень обследования, который необходимо провести при направлении на плановую госпитализацию: нет.

— РИФ (отпечатки с роговицы или биоптаты кожи).

Дополнительные диагностические исследования, проводимые на стационарном уровне:
— биохимическое исследование крови: содержание глюкозы, мочевины, креатинина, общего белка, билирубина, электролитов крови;
— электрокардиография;
— рентгенография легких.

Диагностические мероприятия, проводимые на этапе скорой неотложной помощи: не проводятся.

Диагностические критерии постановки диагноза [1,2, 3]

Жалобы и анамнез:

— отсутствие нарушения сознания.

Лабораторные исследования [1,2,3,4,5,6]:
Общий анализ крови: лейкоцитоз, ускоренное СОЭ;

Общий анализ мочи: изменения не характерны.

Вирусологическое исследование: выделение вируса из слюны, слезной или спинномозговой жидкости путем интрацеребрального заражения мышей-сосунков).

ПЦР: определение РНК вируса бешенства.

ИФА: обнаружение антигена и антител к вирусу бешенства в сыворотке, крови и СМЖ, ткани мозга, ткани.

РИФ: обнаружение антигена и антител к вирусу бешенства из отпечатков с роговицы или биоптатах кожи, ткань мозга).

Гистологический метод: обнаружение телец Бабеш-Негри в мазках, срезах клетках аммонового рога, гиппокампа, пирамидальных клеток коры большого мозга или клеток Пуркинье мозжечка.

Биологическая проба (заражение новорожденных мышей или сирийских хомяков вирусом из слюны больных, взвеси мозговой ткани или подчелюстных желез интрацеребрально): гибель животных через 6-7 дней после заражения позволяет предположить наличие вируса бешенства.

Инструментальные исследования:
Биохимия крови: повышение содержания глюкозы, мочевины, креатинина, нарушения электролитного состава крови (за счет обезвоживания);

Рентгенография органов грудной клетки: признаки пневмонии (при поражении органов дыхания);

Показания для консультации узких специалистов:

Критерии стандартного определения случая бешенства

Предположительный случай:
Любой пациент с одним или несколькими клиническими признаками: энцефалит, миелит, затрудненное глотание, гидрофобия, беспокойство, возбужденное состояние, парестезия, восходящий паралич и/или боль в месте раны.

Вероятный случай: соответствует предположительному случаю плюс наличие контакта (укус, оцарапывание, ослюнение) с подозрительным на бешенство животным (собаки, кошки, лисы, МРС, КРС, лошади, летучие мыши и др.)

Подтвержденный случай: вероятный случай, подтвержденный лабораторно:

Дифференциальный диагноз

Таблица. Дифференциальная диагностика бешенства

Бешенство Отравление атропином Столбняк Лиссофобия Инкубационный период От 7 сут до 1 года и более (чаще 30–90(сут) 2–4 ч 1–30 сут нет Начало болезни Постепенное Острое Острое, подострое Острое Слабость, утомляемость Характерна Характерна Характерна Есть Лихорадка Характерна Не характерна Характерна Не характерна Потливость Есть Есть Есть Нет Головная боль Есть Есть Нет Есть Слюнотечение Выражено. Сухость во рту в стадии параличей Сухость во рту и глотке Есть Нет Изменение психики Постоянны Есть Нет Есть Общая возбудимость Есть Есть Есть Нет Расстройство речи и глотания Есть Есть Есть Нет Мидриаз Есть Есть Нет Нет Психомоторное возбуждение Есть Есть Нет Нет Галлюцинации Есть Есть Нет Нет Судороги Есть Есть Есть Нет Расслабление мышц после судорог Есть Есть Нет Нет судорог Судороги мышц глотки, тризм Периодические Нет Постоянные Нет Потеря сознания Есть Есть Есть (перед смертью) Нет Гидрофобия Есть Нет Нет Нет Паралич, парезы Есть Нет Нет Нет Неуклонное прогрессирование болезни Да Нет Нет Нет Гемограмма Лейкопения, анэзонофилия Лейкопения Характерных изменений нет Не изменена СМЖ Лимфоцитарный плеоцитоз, незначительное увеличение белка Не изменена Как правило, не изменена Не изменена

Получить консультацию по медтуризму

Получить консультацию по медтуризму

Цели лечения: оказание паллиативной помощи больному.

Тактика лечения бешенства

Немедикаментозное лечение

Режим: соблюдение охранительного режима: индивидуальный пост; уход, призванный максимально защитить больного от внешних раздражителей, тихая, теплая палата и др. затемнение палаты, устранение внешних раздражителей (света, шума, воды).

Трахеостомия (предупреждение асфиксии из-за ларингоспазма, уменьшение риск аспирационных осложнений, облегчение проведения искусственной вентиляции легких).

Катетеризация центральной вены, мочевого пузыря.

Медикаментозное лечение

Медикаментозное лечение, оказываемое на амбулаторном уровне: не проводится.

Медикаментозное лечение, оказываемое на стационарном уровне:

Противосудорожная и седативная терапия:
Нейролептики:
— аминазин 100 мг\сут;
Транквилизаторы:
— диазепам 40- 100 мг\сут.

Барбитураты:
Один из нижеперечисленных препаратов:
— фенобарбитал 50 мг через каждые 3-6 часов;
— тиопентал натрия до 2 г\сут в 3-4 приема.

Дезинтоксикационная и регидратационная терапия:
Парентеральное введение изотонических (0,9% раствор хлорида натрия 400,0; 5% раствора декстрозы 400,0) и коллоидных (меглюмина натрия сукцинат, 400,0) растворов в соотношении 3-4:1 в общем объеме 800-1200 мл в течение 1-3дней.

Кардиотонические средства:

При бульбарных нарушениях (с расстройством глотания и дыхания): ИВЛ.

— маннитол — раствор для внутривенного введения 10, 20%.

При осложнениях (пневмония):
Антибактериальная терапия в зависимости от возбудителя.

Медикаментозное лечение, оказываемое на стационарном уровне: не проводится.

Другие виды лечения
Другие виды лечения, оказываемые на амбулаторном уровне: не проводится.
Другие виды лечения, оказываемые на стационарном уровне: не проводится.
Другие виды лечения, оказываемые на этапе скорой неотложной помощи: не проводится.

Хирургическое вмешательство: не проводится.

Профилактические мероприятия:

Первичная иммунизация групп риска (ветеринары, лесники, охотники, собаколовы, работники бойни, таксидермисты, сотрудники лабораторий, работающих с уличным вирусом бешенства) проводится антирабической вакциной в соответствии с инструкцией прилагаемой к вакцине.

Постэкспозиционная (ПЭП) профилактика бешенства включает скорейшую местную обработку раны; введение антирабической вакцины против бешенства, при наличии показаний введение антирабического иммуноглобулина.

Местная обработка раны: немедленное и тщательное промывание водой раны в течение 15 минут с мылом, моющим средством, затем обработать 70º спиртом, повидон-йодом.

ПЭП зависит от типа контакта с животным, у которого подозревается бешенство (см. таблицу).

Таблица. Рекомендуемая постэкспозиционная профилактика заболевания бешенством. (1,20).

Тип воздействия / контакта с домашним или диким животным подозреваемым или больным бешенством, или животным недоступным для тестирования. Постэкспозиционные меры, рекомендованные ВОЗ I (нет воздействия) Прикосновение к животному или его кормление, облизывание животным неповрежденной кожи. Контакт неповрежденной кожи с выделениями больных бешенством животным или человеком. Не проводятся, если эти данные достоверны и подтверждены. II Cдавливание при укусе открытых мест кожи, небольшие царапины или ссадины без кровотечений Немедленная вакцинация (в соответствии с инструкцией, прилагаемой к вакцине) и местная обработка раны. Профилактика останавливается если животное остается здоровым в течение наблюдения (10 дней) или убито и установлены отрицательные лабораторные тесты на бешенство III Единственный или множественные трансдермальные (чрезкожные) укусы** или царапины, облизывание поврежденной кожи; загрязнение слизистых оболочек слюной при облизывании.
Контакты с летучими мышами

* Пассивную профилактику бешенства у людей обеспечивает введение человеческого (HRIG) или лошадиного (ERIG) иммуноглобулина в место укуса как можно скорее после воздействия, с целью нейтрализовать вирус, а за ним следует вводить вакцину в другое место (дельтовидная мышца плеча или переднелатеральная поверхность бедра у детей до 2-х лет), чтобы вызвать активный иммунитет.
Антирабический иммуноглобулин вводится всем лицам категории III, имевшим контакт с источником инфекции, а так же всем лицам с иммунодефицитом категории II, имевшим такой контакт [13]. HRIG следует использовать в разовой дозе 20 МЕ / кг. и ERIG в разовой дозе 40 МЕ/ кг.
Перед применением ERIG делают аллергопробу (накожную).
Беременность и ранний детский возраст не является противопоказанием для пассивной постэкспозиционной профилактики [12].

** Укусы, особенно головы, шеи, лица, рук и половых органов, должны быть отнесены к III категории воздействия из-за богатой иннервации в этих областях.
Для лиц, ранее проходивших полный курс доконтактной вакцинации или постконтактной профилактики, кратность введения и доза вакцины определяется в соответствии с инструкцией, прилагаемой к вакцине.
Те же самые правила относятся и к лицам, ранее привитым от бешенства, у которых титры ВНА (вирус нейтрализующие антитела) не менее 0,5 МЕ/мл. [13, 15].

— формирование у населения навыков поведения с целью предотвращения угрозы заражения бешенством.

Дальнейшее ведение: не проводится.

Индикаторы эффективности лечения:
Лечебные мероприятия направлены на:

— поддержание сердечно-сосудистой и дыхательной деятельности.

Классы рекомендаций и уровни доказательств препаратов, рекомендуемых для лечения бешенство у взрослых:

Лекарственное средство Доказательный уровень 1 Хлорпромазин В 2 Тиопентал натрия В 3 Фенобарбитал В 4 Диазепам А 5 Преднизолон А 6 Фуросемид А 7 Натрия хлорид, натрия ацетата тригидрат, калия хлорид В 8 Натрия хлорид, натрия гидрокарбонат , калия хлорид В 9 Глюкоза В 10 Допамин А
Вакцина антирабическая (Rabies vaccine)
Декстроза (Dextrose)
Диазепам (Diazepam)
Допамин (Dopamine)
Дроперидол (Droperidol)
Иммуноглобулин антирабический (Rabies immunoglobulin)
Калия хлорид (Potassium chloride)
Кальция хлорид (Calcium chloride)
Маннитол (Mannitol)
Меглюмин (Meglumine)
Натрия ацетат (Sodium acetate)
Натрия ацетата тригидрат (Sodium acetate trihydrate)
Натрия гидрокарбонат (Sodium bicarbonate)
Натрия хлорид (Sodium chloride)
Преднизолон (Prednisolone)
Тиопентал-натрий (Thiopental sodium)
Фенобарбитал (Phenobarbital)
Фуросемид (Furosemide)
Хлорпромазин (Chlorpromazine)

Показания для госпитализации

Показания для плановой госпитализации: не проводится.

Показания для экстренной госпитализации:

  1. Протоколы заседаний Экспертного совета РЦРЗ МЗСР РК, 2015
    1. 1) Информационный бюллетень ВОЗ №99, Сентябрь 2015 г. 2) Инфекционные болезни: национальное руководство/ Под ред. Н.Д.Ющука, Ю.Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 1056 с. – (Серия «Национальные руководства»). 3) Б.П. Богомолов. Инфекционные болезни: неотложная диагностика, лечение, профилактика. — Москва, изд-во НЬЮДИАМЕД, 2007.- С.31-45. 4) Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. Лекции по инфекционным болезням. Том 2. М., 1997г.-433 с. 5) С.А. Амиреев, Т.А. Муминов, В.П.Сергиев, К.С. Оспанов. Бешенство. // Стандарты и алгоритмы мероприятий при инфекционных и паразитарных болезнях. Алматы, 2008. – 2 том. – С. 284-297. 6) Доказательная медицина. Ежегодный справочник. Часть1. Изд-во МЕДИА СФЕРА. М., 2003 7) Доказательная медицина. Клинические рекомендации для практикующих врачей. ГЕОТАР МЕД, 2002. 8) Селимов М.А. Бешенство. М.: Медицина, 1978. 9) Селимов М.А. Профилактика бешенства: Методические материалы в помощь лектору. М., 1979. 10) Черкасский Б.Л. Бешенство и его профилактика. М.: Медицина, 1985. 11) Миронов Александр Николаевич. Усовершенствование средств диагностики бешенства и сравнительный анализ антирабической активности противовирусных препаратов в эксперименте : диссертация . кандидата биологических наук : 16.00.03 / Миронов Александр Николаевич; [Место защиты: Федер. центр токсик. и радиац. безопасности животных].- Казань, 2009.- 148 с.: ил. РГБ ОД, 61 09-3/666. 12) Manning SE, et al. MMWR Recomm Rep. 2008;57(RR-3):1-28. 13) Cоntrol of Communicable Diseases Manual. D.L. Heimann, 19th Edition 14) Еженедельный эпидемиологический бюллетень ВОЗ, №49/50, 2007, 82, 425-436 http:www.who.int/wer 15) Rupprecht CE, et al. Lancet Infect Dis. 2002;2(6): 327-343 16) Инструкция по применению вакцины КОКАВ. 17) Botvinkin AD, Poleschuk EM, Kuzmin IV, et al. Novel lyssaviruses isolated from bats in Russia. Emerg Infect Dis 2003;9:1623–5. 18) Fooks AR, Brookes SM, Johnson N, McElhinney LM, Hutson AM. European bat lyssaviruses: an emerging zoonosis. Epidemiol Infect 2003;131:1029–39. 19) Hanna JN, Carney IK, Smith GA, et al. Australian bat lyssavirus infection: a second human case, with a long incubation period. Med J Aust 2000;172:597–9. 20) King AA, Meredith CD, Thomson GR. The biology of southern African lyssavirus variants. Curr Top Microbiol Immunol 1994;187:267–95. 21) Cоntrol of Communicable Diseases Manual. D.L. Heimann, 20th Edition, p.504-506 22) Приказ МНЭ РК №136 от 25.02.2015г. Об утверждении санитарных правил «Санитарно-эпидемиологические требования к организации и проведению санитарно-эпидемиологических (профилактических мероприятий по предупреждению особо опасных инфекционных заболеваний»

Рецензенты:
Шопаева Гульжан Амангельдиевна – доктор медицинских наук, РГП на ПХВ «Казахский национальный медицинский университет имени С.Д.Асфендиярова» профессор кафедры инфекционных и тропических болезней.

Конфликт интересов: отсутствуют.

Условия пересмотра протокола: пересмотр протокола через 3 года после его опубликования и с даты его вступления в действие или при наличии новых методов с уровнем доказательности.

источник

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *