Анализ на бешенство у собак подразумевает проведение специальных экспресс-тестов на наличие в крови специфических антирабических антител. Иногда его применяют в комплексной диагностике при подозрении на заражение домашних питомцев вирусом бешенства. Данное заболевание представляет угрозу для жизни животных, человека, поэтому заводчики собак должны иметь понятие о том, как проявляется данный недуг. Если есть подозрение на заражение, если питомец имел контакт с возможным бактерионосителем, нужно сразу отвезти питомца в ветлечебницу, для проведения лабораторной диагностики, без которой невозможно установить точный диагноз.
Бешенство (rabies) – остропротекающее заболевание теплокровных животных инфекционной этиологии, вызываемое вирусом, который поражает ЦНС, провоцируя серьезные нарушения в организме. К сожалению, эффективного лечения на данный момент не разработано, поэтому инфекция всегда заканчивается летальным исходом.
Возбудитель инфекционного недуга – РНК-содержащий вирус (рабдовирус). Поражает домашних и диких животных. Существует так называемый «природный» вирус и «лабораторный».
ВАЖНО! БЕШЕНСТВО ОТНОСЯТ К ЗООАНТРОПОЗООНОЗНЫМ БОЛЕЗНЯМ, ТО ЕСТЬ ИНФЕКЦИЯ ПЕРЕДАЕТСЯ ЧЕЛОВЕКУ. ВСПЫШКИ ИНФЕКЦИИ ОТМЕЧАЮТ ВЕЗДЕ. БОЛЕЗНЬ ИМЕЕТ ПРИРОДНО-ОЧАГОВЫЙ ХАРАКТЕР.
Природным резервуаром рабдовируса являются инфицированные плотоядные хищники. Смертельно опасный вирус содержится в слюне инфицированных особей. Инфицирование происходит контактным путем, при укусах, проникновении слюны в ссадины, ранки на дерме.
Проникнув в организм, вирус по нервным путям мгновенно перемещается в головной, спинной мозг, слюнные железы, где в дальнейшем он размножается.
В слюне инфицированных животных рабдовирус появляется примерно за три-семь дней до момента проявления первых симптомов. При этом инфицированная особь уже является вирусуносителем, представляя реальную угрозу для человека, других домашних животных. Поэтому заражение бешенством может произойти даже в том случае, если вас или вашего питомца укусило внешне здоровое животное.
Инкубационный период длиться от 2-7-ми суток до нескольких недель. Интенсивность проявления симптоматики зависит от возраста, резистентности, иммунной защиты, вирулентности, концентрации рабдовируса в организме. Смертельно опасный недуг у животных протекает в тихой, буйной, реже в атипической формах.
У собак отмечают преимущественно буйную форму инфекции, продолжительность которой составляет от шести до десяти суток. Имеет три стадии проявлении:
- Продромальную. Срок протекания меланхолической стадии — не более двух суток. На этом этапе развития инфекции отмечают изменение поведенческих манер собаки. Животные сильно угнетены, выглядят подавленными, прячутся в темных укромных местах, неохотно идут на контакт, неадекватно реагируют на раздражители.
- Маниакальную (стадия возбуждения). Продолжительность течения не более трех-четырех суток. Больные животные проявляют беспричинную агрессию к своим собратьям, другим домашним питомцам, человеку, включая хозяина. Агрессия сменяется ласковым поведением. Питомец требует внимания, лижет руки, лицо человека. Больные питомцы поедают несъедобные предметы. Нередко собаки убегают из дома и могут пробежать без устали 20-30 км.
- Паралитическую (депрессивную). Для данной стадии, продолжительность которой составляет не более шести суток, характерны тяжелые сбои в функционировании ЦНС. Отмечают паралич глотки, гортани, мышечные судороги, спазмы. Нижняя челюсть отвисает. Отсутствует глотательный рефлекс. Из пасти постоянно течет слюна. Громкие звуки, шум воды вызывает сильнейшую панику. Координация движения нарушена. Питомец впадает в кому, погибает от истощения, нарушения дыхательной, сердечной функции.
Стоит отметить, что бешеная собака, независимо от формы и стадии заболевания кусает человека, животных не предупреждая о нападении лаем.
Для тихой формы болезни характерно отсутствие стадии возбуждения. Продолжительность — от двух до пяти суток. Характеризуется общим угнетением, меланхоличностью, отсутствием реакции на внешние раздражители. Животные гибнут из-за паралича мышечных структур тела, глотки. Болезнь всегда заканчивается летальным исходом.
Реже у собак отмечают атипичную форму болезни, которая проявляется нетипичными, нехарактерными для данной инфекции проявлениями. Протекает остро, подостро, реже хронически (два-три месяца). У животных отмечают изменение поведения, сбои в работе ЦНС, ЖКТ.
Заметив нехарактерное поведение своего домашнего любимца, изменение повадок, проявление агрессии, а также если собака имела контакт или была укушена бездомными, дикими животными, обязательно нужно отвезти питомца в ветлечебницу, проверить собаку на бешенство. Не стоит забывать, что симптоматика нарастает спонтанно в определенной последовательности.
При постановке предварительного диагноза должны быть учтены данные анамнеза, паталагоанатомические результаты, эпизоотологическая ситуация, симптомы. Проводится серия лабораторных, гистологических, микроскопических, бактрериологических исследований, экспресс-тесты.
Учитывая схожесть симптоматики с другими инфекциями, проводится дифференциальная диагностика (ИФА, ПЦР). Необходимо исключить болезнь Ауески, чуму плотоядных, энцефаломиелит.
Важно! Если есть подозрение на инфекцию, животное покусало человека, собаку помещают в специальные изолированные боксы и в течение десяти дней, пока не будут готовы результаты анализов, наблюдают за ее состоянием. Если диагноз подтвердился, к сожалению, проводится эвтаназия. Животных усыпляют, поскольку лечения от данной инфекции нет.
Точный диагноз удается установить только после смерти животных. Полученный патматериал исследуют различными методами.
Наиболее достоверный метод, который всегда подтверждает болезнь – микроскопические исследования биоматериала на наличие специфических включений в мозге – телец Бабеша-Негри. Расположеные в аммоновых рогах.
Для обнаружения специфического антигена в мозге применяют реакцию диффузной преципитации, иммунофлуоресцентный анализ отпечатка роговицы.
Иммунофлуоресцентный метод позволяет максимально быстро диагностировать наличие вируса в организме собак. Метод определяет вирусный антиген в 93-97% случаях.
Учитывая то, что вирус перемещается по нервным стволам, его крайне редко удается определить в кровеносном русле. Как правило, при подозрении на заражение для анализов исследуют спинномозговую жидкость.
Серологические исследования заключаются в проведении общего, биохимического анализа крови. Отмечают изменение лейкоцитарной формулы (лейкоцитоз), олигурию, альбуминурию, глюкозурию, увеличение концентрации моноцитов.
Протестировать своего питомца на бешенство, определить напряженность поствакцинального иммунитета позволит тест на наличие специфических антирабических антител в крови. Проводится данная процедура только в аккредитованных лабораториях, некоторых ветклиниках. Стоит отметить, что стоимость данного анализа довольно высока. Результаты после проведения процедуры будут готовы через 10-20 суток.
Сегодня проводится два вида тестов на антирабические антитела – RFFIT (тест быстрого торможения фокуса флюоресценции) и FAVN – тест флуоресцентных вируснейтрализующих антител, который определяет титр антител в МЕ/мл. Данные методики выполняют на живых культурах клеточных структур с добавлением в реакцию возбудителя инфекции. У собак берется 0.5- 1 мл сыворотки крови.
Тест проводят преимущественно в том случае, если вы хотите вывезти своего питомца заграницу. Многие страны ЕС запрещают ввозить на свою территорию не привитых от бешенства животных, а также собак, котов, у которых нет результатов по данному анализу.
Сдавать тест на антитела нужно тогда, когда в крови собаки выработаются антитела к данной инфекции. Специфический иммунитет после иммунизации формируется через месяц после прививки. С этого момента можно везти питомца в лабораторию для прохождения теста на антитела к бешенству. При этом после иммунизации, если возникает потребность в проведении данного теста, от даты прививки не должно пройти более года. Тест нужно сдать не позднее месяца до срока проведения ревакцинации.
Если титр антирабических антител составляет менее 0,50 МЕ/мл – собаку ревакцинируют. Через месяц сдается повторный анализ. На продуцирование защитных антител после иммунизации влияют некоторые факторы: порода, возраст, индивидуальные особенности организма, кратность антирабической иммунизации. Ветврачи рекомендуют проводить мониторинг титра антител у собак, кошек после вакцинации, даже в том случае, если не планируется выезд за границу.
Многие владельцы вывозят своих питомцев на дачу, на природу, в лес, на охоту. Не стоит забывать, что собаку могут покусать дикие звери, которые могут быть инфицированы или являются вирусоносителями.
Единственный способ защитить собаку от смертельно опасной инфекции – своевременно проведенная вакцинация.
В дальнейшем, в зависимости от выбранного препарата, раз год проводится ревакцинация. Некоторые вакцины формируют иммунную защиту сроком на три года. Оптимальную схему вакцинаций, ревакцинаций подберет ветврач.
источник
Компания «Удачный полёт» оказывает содействие в получении результата теста на наличие антител к бешенству.
Название документа
Особые условия
Содействие в получении ветеринарного свидетельства формы №1, №4
в зависимости от сложности ситуации
40 00 рублей на одно животное
Содействие в обмене ветеринарного свидетельства формы №1 на международный сертификат формы №5а
в зависимости от количества животных
от 6000 рублей
Содействие в оформлении ветеринарного паспорта
при перемещении за пределы РФ, только в связке с получением ветсвидетельства формы №1
25 00 рублей
Содействие в получении результатов теста на наличие антител к бешенству
в зависимости от срочности получения результатов
от 140 00 рублей
Евросертификат, сертификат на ввоз в другие страны
в страны, требующие данный сертификат
2000 рублей
Содействие в получении разрешения на ввоз животного в разные страны
в страны, требующие данное разрешение
Стоимость требует уточнения в зависимости от страны ввоза
Содействие в получении разрешения на вывоз и ввоз животных из / в Россию
требуется при перевозке CARGO
20 00 рублей
Здравствуйте дорогой читатель. В этой статье нам бы хотелось рассказать Вам подробнее, что такое тест на наличие антител к вирусу бешенства, в каких случая он требуется, когда и где его нужно сдавать, сколько стоит и иные подробности. Итак, обо всё по порядку:
1. Некоторые страны, и в особенности страны Ближнего Востока, имеют обязательное требование наличие данного анализа при ввозе собак и кошек в их страну. К этим странам относятся Южная Корея, ОАЭ, ЮАР, Малайзия, Израиль, Великобритания и прочие государства. Собственно говоря, для чего они это делают, если у всех ввозимых животных есть в наличии ветеринарные паспорта, в которых указано, что ввозимые кошки и собаки привиты от бешенства и пройден срок инкубации? Делают они потому, что наша страна входит, по их мнению, в ряд стран с эпидемиологически опасными регионами по бешенству. Правда тут резонен вопрос — почему другие государства, к примеру США и страны Европы, так не считаю? Ответ, дорогой читатель, мы предлагаем Вам додумать самостоятельно.
Правда, справедливости ради, стоит отметить, что есть страны (например Южная Корея), которые позволяют ввозить собак и кошек, если их возраст ещё не достиг положенного возраста для вакцинации против бешенства, равный 3-ём месяцем. Правда тут сразу возникает иная сложность уже в России, где сейчас уже невозможно получить ветеринарное свидетельство №1 с формулировкой «Не привит по возраст». Подробнее об этой теме мы писали в этой статье: Читать.
2. Когда же позволительно сдавать тест на наличие антител к бешенству? Ответ кроется в самом вопросе — когда в крови Вашей собаки или кошки уже сумели выработаться антитела к данной вирусной болезни и срок этот равен от 30-ти дней после самой проведённой вакцинации, а также если от даты сделанной прививки прошло не более 1-го года.
3. Анализ на наличие антител к бешенству считается успешным, если их наличие в крови животного не менее 0,05 МЕ/мл ( IU / ml ) . Если данный показатель меньше указанных цифр, то даже не стоит пытаться отправлять животное в страну импортёр с таким результатом. В противном случае Вашу собаку или кошку в лучшем случае вышлют из страны обратно, в менее лучшем случае животное привьют от бешенства ещё раз и посадят на карантин в 30-ть дней с выставлением, в конце прохождения инкубационного периода, весьма круглую сумму для оплаты услуг содержания животного на карантине. Ну и, при самом негативном сценарии, животное просто подлежит усыплению.
4. Где же можно сдать анализ на наличие антител к бешенству? К сожалению надо констатировать, что лабораторий, аккредитованных проводить подобный тест, совсем немного:
а) Федеральный центр охраны здоровья животных в г. Владимир;
б) Центр молекулярной диагностики ФГБУ «ВГНКИ» в г. Москва;
в) НИИ диагностики и профилактики болезней человека и животных в г. Москва.
5. Стоимость анализа на наличие антител к бешенству зависит от выбранной лаборатории, а также от срочности его выполнения. Так, для ориентира, на момент написания статьи (01/10/2016), сроки и стоимость в лаборатории ВГНКИ следующая:
а) Срок изготовления течении 2-ух недель — 5000 рублей;
б) Срок изготовления течении 3-ёх рабочих дней — 10 000 рублей.
Уважаемый читатель, если Вы проживаете далеко, от указанных выше городов, регионе, а также если просто нуждаетесь в содействии при получении результата теста на наличие в крови Вашей собаки или кошке антител к вирусу бешенства, то Вы можете обратиться к нам за помощью, воспользовавшись наиболее удобным для Вас способом связи в разделе КОНТАКТЫ
источник
Вы чаще слышите о титровом тестировании, поскольку все большее число владельцев собак начинают беспокоиться о чрезмерной вакцинации или плохой реакции на инъекции вакцины. Тестирование титра — это средство определения, имеет ли ваше питомец достаточное количество антител для защиты от вирусов, которые они уже получали в прошлом. Некоторые владельцы собак считают, что наличие достаточного количества антител делает еще одну вакцинацию, особенно ежегодную вакцинацию или рак, ненужной. Вот что вы должны знать о титровом тестировании и о том, что это значит для вакцинации вашей собаки.
Тест на титр — это анализ крови, который измеряет уровень белков иммунной системы, называемых антителами. Когда ваша собака получает вакцинацию, их иммунная система реагирует путем продуцирования антител, которые затем могут использоваться организмом для борьбы с будущими инфекциями. Тест на титр определяет, сколько антител все еще содержится в крови вашей собаки через один или несколько лет с момента вакцинации.
Вакцины важны, потому что они вводят реплицированную часть вируса или бактерий, которые мертвы или ослаблены, что позволяет вашей собаке наращивать иммунитет, не болевая. Тем не менее, вакцины имеют риски, хотя они необычны и не обязательно перевешивают выгоды. Некоторые собаки имеют аллергические реакции, которые редко могут быть экстремальными и приводят к анафилаксии. Некоторые собаки могут развить саркому, которая является массой, которая растет вокруг места вакцинации из-за воспаления. Эта масса может стать злокачественной и распространить рак на другие части тела. В большинстве случаев опухоль вокруг места инъекции исчезает через пару недель. Другие побочные эффекты вакцинации могут варьироваться от легкой до тяжелой, а чрезмерная вакцинация увеличивает эти риски.
Это не значит, что прививки абсолютно не нужны. Основными заболеваниями, которые вакцинированы против, являются смута, парвовирус, аденовирус и бешенство. У этих детей уровень смертности составляет от 60 до 80 процентов, поэтому риск редких осложнений от вакцины не перевешивает опасности того, что они предназначены для защиты от. Тем не менее, если иммунная система собаки способна предотвратить эти заболевания, нет необходимости перекармливать и сталкиваться с рисками. Это то, что означает определение титра.
Доктор Ричард Форд, почетный профессор внутренней медицины в Колледже ветеринарной медицины штата Северная Каролина, использует аббревиатуру PIE для интерпретации результатов теста на титр. Тест, который показывает положительный результат для антител, может определять защиту, инфекцию или воздействие. Например, положительный тест на титр для болезни Лайма или лептоспироза означает инфекцию, тогда как положительный результат теста на титр для эрлихиоза подразумевает воздействие.
Тест на титр подходит для определения того, обладает ли ваша собака достаточными антителами для иммунитета к парвовирусу, скелету или аденовирусу. Некоторые исследования показывают, что наличие антител не обязательно приравнивается к иммунитету, а низкое присутствие антител не обязательно означает уязвимость, но, по мнению большинства источников, это довольно точная мера. Это вопрос дебатов и споров в ветеринарном сообществе. Однако, если собака показывает достаточно высокое количество антител к этим заболеваниям, повторная вакцинация вряд ли понадобится.
Тест на титр не подходит для лептоспироза для собак, бордетелла (также известный как кашель для питомника) или болезнь Лайма, поскольку эти вакцины обеспечивают только кратковременную защиту. Бешенство — необычный случай. Вакцины для бешенства дают долгосрочную защиту, а тесты на титры очень точны, но вакцинация против бешенства предусмотрена законом в Соединенных Штатах. Ни одно государство не примет критерий титра на бешенство в качестве меры иммунитета вместо вакцинации.
Вы можете использовать тест титра, чтобы определить, может ли ваша собака отказаться от повторной вакцинации при определенных заболеваниях, но ее можно использовать и другими способами. Тесты на титры могут использоваться приютами для животных во время приема животных или вспышки заболевания, чтобы помочь разделить собак с низким риском и высоким риском. Ветеринары могли использовать тест после вакцинации щенков, чтобы узнать, готовы ли они к социализации с другими собаками. Некоторые страны и регионы требуют тестирования титра в качестве доказательства того, что животное было вакцинировано для бешенства, прежде чем оно может быть доставлено через границу. Вы также можете использовать его, если вы принимаете животное, и вы не знаете его историю иммунизации.
Тестирование титров может быть дорогостоящим, хотя в последние годы цена снижается. Вероятно, будет дешевле вакцинация на основе ежегодных рекомендаций, хотя вы столкнетесь с повышенным риском побочных эффектов от вакцинации.
Рекомендации по частоте теста титра различаются. Некоторые ветеринары говорят ежегодно только для того, чтобы быть в безопасности. Другие говорят, что каждые три года необходимы все, в то время как другие рекомендуют каждые пять-семь лет. Многие тесты на титры показывают, что собаки, которые были вакцинированы против парвовируса и смуты, имеют иммунитет в течение пяти-семи лет, или они могут быть защищены от жизни. Там, конечно, нет вреда в тестировании часто, кроме денежной стоимости, хотя это спорно о том, что необходимо. Вы должны обсудить это со своим ветеринаром и решить, что подходит вашей собаке.
Важно отметить, что щенки все равно должны получать рекомендованные основные прививки. Тест на титр может демонстрировать высокий уровень антител, которые обеспечивают иммунная система матери своим щенкам. Этот иммунитет может фактически предотвратить вакцина от работы. Кроме того, после щенка этот иммунитет может изнашиваться, поэтому необходимы вакцины и, по крайней мере, первые годные ускорители. Тест на титр после начальных процессов вакцинации может определить, побудило ли вакцины ваш щенок разработать соответствующие антитела. Вы должны проконсультироваться с ветеринаром, чтобы определить, когда должен пройти первый тест титра, чтобы обеспечить точную информацию.
Для парвовируса, смуты, аденовируса и бешенства высокий показатель количества антител в тесте на титр скорее всего указывает на необходимость повторной вакцинации. Однако низкий счет не обязательно означает, что необходим усилитель. Некоторые эксперты утверждают, что иммунная система собаки, которая ранее имела высокие уровни антител, будет производить «клетки памяти», которые будут выкачать антитела, если есть воздействие болезни.
В конечном итоге решение лежит на владельце собаки. Если количество антител низкое, возможно, стоит рискнуть, что ваша собака получит редкий побочный эффект от бустера, чтобы сохранить спокойствие, чтобы они не страдали от потенциально смертельной болезни. Тесты титров — это инструмент, который может помочь вам принять это решение, но вы должны всегда исследовать себя и обсуждать с вашим ветеринаром, прежде чем применять какой-либо план.
Будете ли вы полагаться на тест титра, чтобы рассказать вам, нужно ли вам повторно вакцинировать свою собаку? Вы вакцинируете в соответствии с рекомендованным графиком или определяете необходимость каждой вакцины в отдельности? Дайте нам знать в комментариях ниже!
источник
В настоящее время прижизненный лабораторный анализ на бешенство у собак не разработан. Точный диагноз ставят только после вскрытия животного и обнаружения в головном мозге вирусного антигена и специфических телец Бабеша – Негри. Это обусловлено тем, что возбудитель не проникает в кровь, поэтому найти его методом гематологического исследования невозможно.
Многие владельцы домашних питомцев достаточно поверхностно знают о том, что такое бешенство у собак, каковы первые настораживающие симптомы заболевания и чем грозит укус зараженного животного.
Чаще всего беспечность проявляют жители мегаполисов, наивно полагая, что в условиях города заразиться бешенством невозможно из-за отсутствия в нем представителей дикой природы. Однако такое мнение является ошибочным, так как в данном случае основными переносчиками возбудителя являются бродячие собаки и кошки, крысы и летучие мыши, населяющие свалки, подвалы, чердаки и заброшенные здания.
Бешенство представляет собой смертельно опасное заболевание, протекающее с поражением центральной нервной системы. Больное животное представляет собой угрозу для людей, так как в период развития клинических признаков проявляет неконтролируемую агрессию. После укуса спасти человека может только своевременное введение антирабической вакцины, так как лечение противовирусными препаратами не дает эффекта и болезнь заканчивается летальным исходом.
Распознать больное животное можно по характерным клиническим признакам. Но опасность заключается в том, что у бешенства существует латентный период, длящийся от двух недель до полугода, во время которого собака может заразить человека или другое животное.
Важно! Вирус бешенства выделяется со слюной, и определенное время может сохраняться во внешней среде. Поэтому инфицирование может произойти даже без наличия укуса при соприкосновении с зараженными предметами.
Клиническая картина заболевания может значительно варьировать в зависимости от стадии и формы бешенства. Владельцам стоит знать, что первым симптомом является кардинальное изменение поведения животного. Общительный и ласковый питомец может стать замкнутым, обидчивым, избегающим контакта и отказывающимся от корма. И, наоборот, сдержанный ранее пес может проявлять чрезмерную ласковость и общительность.
Для начальной стадии тихой формы бешенства характерны резкие смены настроения, когда добродушный питомец начинает проявлять беспричинную неконтролируемую агрессию. По мере поражения головного мозга развивается водобоязнь. Собака ищет уединения, скрывается от света, резко реагирует на знакомые звуки и запахи. В результате обильного и постоянного слюнотечения на губах появляется пена.
На заключительной стадии появляются:
Летальный исход наступает через 2-3 суток от блокировки дыхательного центра.
Наиболее часто встречающаяся буйная форма бешенства характеризуется наличием трех фаз развития.
Продромальная стадия:
- частое чередование периодов спокойствия и возбуждения;
- повышение температуры более чем на 1 © от нормы;
- поедание несъедобных предметов;
- стремление к уединению в темном месте;
- клонические судороги;
- водобоязнь;
- охота за мнимыми насекомыми.
Маниакальная стадия:
- неконтролируемая беспричинная агрессия;
- частые приступы рвоты;
- косоглазие;
- обильное слюнотечение;
- параличи;
- изменение тембра лая;
- постоянно отвисшая челюсть и выпавший язык.
Паралитическая стадия:
- снижение температуры тела ниже отметки 38.5 © ;
- отсутствие интереса к внешним раздражителям;
- резкое снижение массы тела;
- параличи.
Все три стадии длятся от 5 до 10 дней и заканчиваются летальным исходом.
Для возвратной формы бешенства характерно приступообразное течение, проявляющееся резким появлением симптомов маниакальной стадии и внезапным их исчезновением. Каждый последующий приступ по силе превосходит предыдущий, и через 2-3 раза наступает смерть.
Ученым до сих пор не удалось выяснить природу абортивной формы бешенства. Загадка заключается в том, что после заражения у животного появляются симптомы продромальной стадии заболевания, которые через 2-4 дня бесследно исчезают и собака становится здоровой.
В мировой практике зарегистрированы единичные случаи данной формы, после чего животные жили еще несколько лет без проявлений рецидивов болезни.
При развитии атипичной формы отсутствует маниакальная стадия, поэтому в клинике заболевания отсутствует агрессия. Вместо этого наблюдается:
- расстройство пищеварения, сопровождаемое рвотой и поносом;
- отказ от пищи;
- атрофия мышц корпуса и конечностей;
- малоподвижность.
Собака погибает от стремительно развивающегося истощения.
Важно! Коварность данной формы заключается в отсутствии характерных для бешенства признаков. Ее легко перепутать с энтеритом и чумой плотоядных, начать симптоматическое лечение животного и подвергнуть свою жизнь смертельной опасности при попадании вируса на поврежденные кожные покровы.
После смерти животного ветеринарный специалист отправляет труп в лабораторию с соблюдением всех правил предосторожности, предусмотренных законодательством, с целью исключения распространения вируса. От собак крупных пород может направляться только голова или головной мозг.
Важно! Исследование материала на бешенство должно проводиться бесплатно и без очереди. О результатах в обязательном порядке сообщается главному врачу города или района.
В лаборатории проводят следующие исследования:
- просматривание окрашенных мазков-отпечатков головного мозга под световым микроскопом с целью обнаружения телец Бабеша-Негри;
- постановка реакции с антирабическим флюоресцирующим иммуноглобулином с последующим просматриванием мазков-отпечатков в поле люминесцентного микроскопа;
- реакция диффузной преципитации (применяется реже, так как процент выявления возбудителя составляет от 45 до 70%);
- биопроба на белых мышах, являющаяся наиболее эффективным методом диагностики бешенства.
Разработан еще ряд исследований, позволяющих установить наличие вируса бешенства (РСК, ИФА, РН, РТГА), но они не нашли широкого применения из-за сложности выполнения и малой эффективности.
Некоторые страны требуют, чтобы в ветеринарных документах на ввозимых собак был указан результат анализа крови на антитела к вирусу бешенства, вырабатываемые в организме животного после прививки.
Данное исследование целесообразно проводить не ранее 30 дней, но не позднее 1 года после вакцинации. В этот период количество антител в крови уже достигает количества не менее 0,05 МЕ/мл (IU/ml), являющегося минимальной допустимой концентрацией.
К сожалению, в России существуют единичные лаборатории, прошедшие аккредитацию и получившие разрешение на проведение подобных тестов. К тому же данное исследование является достаточно дорогостоящим.
источник
Доп. оплачивается амбулат. прием: нет
В современном мобильном мире люди все чаще берут домашних животных с собой в путешествия. Если знать, какие процедуры необходимо выполнить, пересечение границы с питомцем не будет обременительным.
Мы с радостью узнаем, что наши соотечественники посещают международные выставки и занимают там призовые места, а также все больше иностранных покупателей приобретают щенков у заводчиков Беларуси, тем самым признавая их племенную ценность.
Нашей клиникой был составлен и направлен запрос по вопросу необходимости наличия у владельца справки о титре антител к бешенству для ввоза домашних животных в Литву в Министерство сельского хозяйства Литвы. Ответом на наш запрос было письмо, в котором говорилось, что для ввоза животных-компаньонов на территорию Литовской Республики справка о титре антител к бешенству не нужна.
Также нашей клиникой был отправлен аналогичный запрос в Министерство сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь. Оттуда пришел ответ: при некоммерческом перемещении домашних животных в страны-члены ЕС, наличие результата теста на определение титра антител к бешенству не распространяется на страны, перечисленные в Приложении II к Решению Еврокомссии (ЕС) №577/2013. Так как Республика Беларусь включена в этот список, тест на определение титра антител к бешенству не требуется при в езде в страны-члены ЕС.
Подробную информацию о правилах перемещения домашних питомцев и о комплекте документов на перевозимое животное можно узнать у ветеринарного атташе при посольстве принимающей страны.
Главным документом для перемещения домашнего питомца является ветеринарный сертификат – документ, подтверждающий, что животному вовремя были сделаны все прививки от инфекционных заболеваний, в том числе против бешенства и титр антител (напряженность иммунитета) к данному заболеванию соответствует международным нормам.
С 29 декабря 2014 года вступил в силу Регламент Европейского Парламента и Совета от 12.06.2013 №576/2013 по некоммерческому перемещению домашних питомцев, а также имплементирующий его Регламент от 28.06.2016 №577/13 (далее – Правила).
Правила оговаривают порядок перемещения домашних питомцев в одну из стран ЕС из другой страны ЕС или в одну из стран ЕС с других территорий или третьих стран. Эту практику переняли и многие другие страны, не входящие в ЕС, например, Тайвань, Япония, ОАЭ, Израиль.
ОДО «Антистресс» сообщает, что при обращении к нам с домашним питомцем Вы имеете возможность провести тест по определению титра антител к вирусу бешенства .
С этой целью нами заключен договор о сотрудничестве с Nacionalinis maisto ir veterinarijos rizikos vertinimo institutas (Литва), лабораторией, имеющей международную аккредитацию.
Для того, чтобы провести тест по определению титра антител к вирусу бешенства необходимо:
- сделать забор крови у домашнего питомца (домашний питомец – животное: собака, кошка, хорек, грызун, кролик, птица или рептилия, которое сопровождает своего хозяина или уполномоченное лицо во время некоммерческого перемещения, за которое в течение всего некоммерческого перемещения несет ответственность владелец или уполномоченное лицо);
- получить сыворотку крови, которую мы доставим в лабораторию;
- дождаться результата от лаборатории, который через 7-10 дней придет на электронный адрес ветеринарного госпиталя «SQ-lap» и будет направлен Вам в электронном виде на Ваш e-mail;
- получить результат – оригинал документа о проведении теста на имя владельца или уполномоченного лица придет по почте в течение 3 недель от даты забора крови (владелец – физическое лицо, указанное в качестве владельца в идентификационном документе (ветеринарный паспорт); уполномоченное лицо – любое физическое лицо, которое имеет от владельца разрешение в письменном виде на осуществление некоммерческого перемещения домашнего питомца от имени владельца).
Сыворотка крови доставляется в лабораторию с сопроводительной, в которой все графы заполняются без исправлений на английском и русском/белорусском языке.
Для правильного заполнения сопроводительной необходимы документы, копии которых останутся у нас для подтверждения данных:
- паспорт владельца или уполномоченного лица;
- личный e-mail;
- международный ветеринарный паспорт домашнего животного, при этом:
» страница с данными о владельце должна быть заполнена на русском и английском;
» страница с данными о животном должна быть заполнена на русском и английском;
» должна присутствовать печать того учреждения, где был выдан ветеринарный паспорт;
» должно иметься фото животного;
» должны быть заполнены графы в разделе о вакцинации: когда проведена вакцинация, до какой даты она действительна и иметься соответствующая наклейка;
» должны иметься подпись уполномоченного ветеринарного врача, печать ветеринарного учреждения;
» запись о чипировании должна быть подтверждена соответствующей наклейкой, круглой печатью, которая одновременно захватывает наклейку от чипа и страницу ветеринарного паспорта, а также подписью ветеринарного врача;
» внимательно проверьте: дата чипирования должна предшествовать дате вакцинации от бешенства;
» на сайте http://animal-id.by/ введите номер чипа своего питомца, найдите данные о владельце и животном, проверьте, все ли указано верно, соответствуют ли данные на сайте записям в международном ветеринарном паспорте.
»Осторожно! Данные, внесенные на сайт http://animalid.by/ не попадают в Международную базу данных.
- проводить вакцинацию от бешенства необходимо той вакциной, которая признается в стране следования. О том, где и какие вакцины признаются, необходимо узнавать самостоятельно. Данная информация имеется на официальных сайтах. Например, вакцины против бешенства Биофел и Биокан признаются только Словенией, Чехией, Румынией и некоторыми странами Европы;
- в день вакцинации домашнему питомцу должно быть не менее 12 недель;
- вакцина должна быть введена уполномоченным ветеринарным врачом;
- в соответствующем разделе ветеринарного паспорта уполномоченный ветеринарный врач должен указать дату проведения вакцинации и срок ее действия;
- дата вакцинации не должна предшествовать дате вживления идентификационного чипа, в противном случае проводится ревакцинация.
Будьте добры, проверьте правильность английского написания в сопроводительных документах имени владельца или уполномоченного лица в соответствии с паспортом и клички животного в соответствии с международным ветеринарным паспортом. Информацию, которую Вы укажете в сопроводительных документах, невозможно будет изменить в дальнейшем .
Уважаемые владельцы домашних животных, необходимо помнить, что для въезда в определенные страны тест по определению титра антител к вирусу бешенства должен соответствовать определенному международному стандарту, и, поэтому, к проведению вакцинации также предъявляются определенные требования:
Тест по определению титра антител к вирусу бешенства проводится не ранее, чем через 30 дней после последней вакцинации от бешенства, т.е. в возрасте не младше 4 месяцев. Максимальный срок забора крови на исследование – за 2 месяца до окончания срока действия вакцины.
Требования, предъявляемые к сыворотке крови животного.
Кровь берут в лицензированной ветеринарной клинике. Для получения пробы сыворотки крови проводят забор венозной крови при помощи инъекционной иглы в сухую чистую пробирку в объеме не менее 3 мл, чтобы потом получить не менее 1,3 мл сыворотки. Кровь для исследования сдается натощак.
После забора крови пробу выдерживают в течение 30 минут при 37°С для формирования сгустка крови. После этого осторожно отделяют сформировавшийся сгусток крови от стенок и помещают пробирку на 30-60 минут при 4°С. Далее, пробу центрифугируют при 1500 – 2000 оборотах в минуту. По окончании центрифугирования осторожно, не захватывая осадок, отбирают надосадочную жидкость – сыворотку крови.
На процедуру забора крови для теста к нам в ветеринарный центр клиенты приезжают с разных уголков Беларуси. Поэтому, обращаем внимание, что НЕОБХОДИМО РАСПОЛАГАТЬ ВРЕМЕНЕМ для ожидания, чтобы врач лабораторной диагностики подтвердил, что сыворотка отобрана нормально и в нужном количестве.
Не принимаются к исследованию образцы с примесью форменных элементов крови, сыворотки с осадком, мутные, с гнилостным запахом. Сыворотка крови должна быть прозрачная, с цветом от светлого до соломенно-желтого.
До отправки сыворотку крови хранят в незамороженном виде при 4°С, но не более 2 дней. Если сыворотку крови необходимо хранить более 2 дней, то ее хранят при минус 20°С. Не допускается замораживание и оттаивание сыворотки крови более 2 раз.
Для транспортировки пробирку с сывороткой крови герметично закрывают, опечатывают печатью ветеринарной клиники, где проводился отбор и приготовление образцов. Если отбирают пробы от нескольких животных, принадлежащих одному владельцу, то каждую пробу (пробирку) маркируют, указывая кличку животного. Для маркировки на пробирку наклеивают лейкопластырь и авторучкой пишут кличку животного, помещают в неповрежденный полиэтиленовый пакет, который укладывают в термос со льдом.
Метод исследования. Титр антирабических вируснейтрализующих антител в сыворотке крови животного определяют в реакции нейтрализации на культуре клеток.
Мы получаем результат исследования из лаборатории на 7-10 день по электронной почте. Далее, отправляем его на электронный адрес, указанный владельцем. Позже, к нам приходит заказное письмо из лаборатории с оригиналом ответа, и мы направляем данный ответ заказным письмом с уведомлением по адресу, указанному клиентом.
Ответ – это справка о титре антител у исследованного животного международного образца сертифицированной лаборатории.
Справка действительна 1 год с возможностью ее продления до 3 лет при условии регулярной своевременной ревакцинации от бешенства.
Итак, Вы получили справку – результат теста по определению титра антител к вирусу бешенства. Далее, в посольстве той страны, куда Вы уезжаете, Вам необходимо обязательно узнать, через какой период времени после получения справки Вам с Вашим питомцем можно въезжать (в некоторых случаях это допускается не ранее, чем через 3 месяца) .
Забор крови для проведения теста по определению титра антител к вирусу бешенства проводится 1 раз в 1-2 месяца, по предварительной записи. После этого назначенная нами даты забора крови, будет сообщена Вам, а также с Вами будет согласовано время.
Одновременно, в ветеринарном госпитале «SQ-lap» по адресу
г. Минск, ул. Тимирязева, 46 можно сделать забор крови для общего и биохимического исследования и пройти другие диагностические процедуры перед дальней поездкой.
источник
Выгуливая питомца, можно заразиться различными заболеваниями. Одно из таких – бешенство. При появлении малейших симптомов болезни, необходимо сдать анализ на бешенство у собак.
Бешенством называется заболевание, имеющее инфекционную этиологию и протекающее остро. Вызывается вирусом, поражающим центральную нервную систему, внутри организма происходят серьезные нарушения.
Возбудитель болезни – рабдовирус (РНК-содержащий вирус), поражающий всех животных. Он бывает искусственным и естественным
Инфекция способна передаваться от животного к человеку.
Заразиться можно от инфицированных хищников путем непосредственного контакта (после укуса, при попадании в открытую рану слюны). Слюна содержит в себе вирус. В организме он проходит по нервным путям в головной и спинной мозг, размножается в слюнных железах.
В слюне оказывается за неделю до возникновения первоначальных симптомов. В этот период животное является носителем рабдовируса и может заразить человека и других домашних питомцев.
Инкубационный (латентный) период может длиться несколько недель. На выраженность симптомов влияет возраст питомца, состояние иммунной системы, концентрация вируса. Болезнь как правило наблюдается в тихой, буйной или атипической форме.
Обычно наблюдается буйная форма, длится от шести до десяти дней. Выделяются несколько стадий данной формы.
- Продромальная (протекает двое суток) – изменяется поведение животного: оно выглядит угнетенным, подавленным, сидит в тихих уголках, избегает общения, неадекватно реагирует на раздражители.
- Маниакальная (три-четыре дня) – стадия возбуждения. Животное ведет себя агрессивно по отношению к животным и людям. Агрессивное поведение меняется на ласковое. Питомец бродяжничает, ест все подряд.
- Паралитическая (до шести дней) – депрессивная. Проявляются следующие симптомы: паралич гортани, спазмы, судороги. Собака не может глотать, слюна постоянно вытекает. Панические состояния при громких звуках, изменяется координация движения. Наступает паралич сначала задних, затем передних конечностей. Питомец оказывается в коме, из которой не выходит (гибнет от истощения, нарушения дыхания и сердечной деятельности).
Больная собака может укусить, не предупредив об этом лаем.
При тихой форме (длится не более пяти суток) отсутствует стадия возбуждения. Животное угнетено, не реагирует на внешние раздражители. Гибнет от паралича мышц тела, глотки.
Болезнь не лечится, обязательно наступает летальный исход.
Атипичная форма (очень редкая). Она характеризуется следующими признаками: изменяется поведение, нарушается работа центральной нервной системы и желудочно-кишечного тракта.
При появлении нехарактерных признаков у животных, рекомендуется срочно обратиться в ветеринарную клинику и проверить собаку на наличие вируса.
Перед тем как поставить первичный диагноз, учитывается история болезни, симптоматика, эпизоотологическая ситуация. Проводят несколько лабораторных и других анализов, экспресс анализ, биологический материал изучается под микроскопом. Проводится разграничивающая диагностика, с целью исключения инфекций со схожими симптомами.
Если человека укусила собака, ее изолируют на 10 дней. Пока готовятся анализы, за ней ведется наблюдение. При подтверждении заболевания, собаку усыпляют.
Точный диагноз можно поставить после смерти: получают патматериал и исследуют его при помощи различных методик.
Самый эффективный метод – изучение биоматериала под микроскопом на наличие телец Бабеша-Негри. Чтобы обнаружить специфический антиген в мозге, применяется реакция диффузной преципитации, иммунофлуоресцентный анализ отпечатка роговицы. Иммунофлуорисцентный метод способен обнаружить антиген в 93% случаев.
Из-за того, что вирус движется по нервным путям, его сложно обнаружить в крови. Обычно исследуется спинномозговая жидкость. Тем не менее проводят общий и биохимический анализ крови собаки, чтобы изучить изменение лейкоцитоза, олигурии и других показателей. Кровь берут из вен, которые расположены там же, где и у человека. Иногда берут анализ слюны животного.
Тест на наличие антирабических антител в крови можно сделать в аккредитованных лабораториях (реже в ветеринарных клиниках). Стоимость ее высокая, результаты готовы после двух-трех недель. Существует два вида теста RFFIT (быстрого торможения фокуса флюоресценции) и FAVN (определяет титр антител в МЕ/мл).
Обычно тест проводится при перевозе животного заграницу (некоторыми государствами запрещено завозить животных, которых не прививали от бешенства). Анализ на антитела к бешенству сдается только после выработки в крови антител к данной инфекции. Иммунитет к болезни развивается не раньше, чем через 30 дней после проведения вакцинации. По истечении этого срока питомец может сдавать тест на бешенство.
Если количество антирабических антител не достигает 0,50 МЕ/мл – животное ревакцинируют, спустя месяц сдают еще один анализ. На воспроизведение защитных антител оказывают влияние: порода, возраст питомца, индивидуальные особенности. Врачи рекомендуют проводить наблюдение за количеством антител после вакцинации.
Лечение от данной болезни не разработано. При подтверждении подозрений собаку усыпляют. Единственный выход – вакцинация. Если хозяин не сделал укол от бешенства – питомец гибнет от любого вируса, который влияет на его поведение.
Во время инкубационного периода болезнь не дает о себе знать. Тем не менее, как было сказано, собака уже заразна. После появления первых признаков болезни (боязнь воды, неспособность пить, агрессивное поведение), сроки жизни питомца составляют не более 11 дней, после чего умирает.
Люди заражаются через укус больного животного. Для человека характерны те же симптомы, что и для животных: судороги, паралич, боязнь воды, спазм глотки, смерть. После укуса первые признаки заболевания проявляются через неделю и до одного года (зависит от места поражения). Сразу после укуса (не позднее десятого дня) нужно обратиться к специалисту и сделать серию уколов (они помогут избежать летального исхода).
Первые действия при укусе собаки:
- промыть место укуса под сильной струей воды (можно под краном или воспользоваться бутылкой); постараться вымыть грязь и слюну;
- кожу тщательно вымыть хозяйственным мылом – не менее двух раз;
- наложить чистую сухую повязку;
- обратиться в травмпункт или поликлинику;
- в экстренных случаях (при больших и глубоких ранах) вызвать неотложную помощь.
Врач устанавливает график вакцинации, дает рекомендации относительно питания во время лечения.
Существует один способ профилактики от бешенства – своевременная вакцинация. Выбирается подходящий препарат, каждый год (при некоторых вакцинах раз в три года) проводят ревакцинацию (схему подбирает врач ветеринар. Цена прививки около 1400 рублей за отечественный препарат, 1600 за импортный.
Без прививки от бешенства запрещено вывозить питомца в некоторые страны, принимать участие в выставках. Прививка в некоторых государственных клиниках может проводиться бесплатно, она гипоаллергенная и безопасная.
Первый раз прививку нужно делать щенкам в возрасте трех-четырех месяцев, затем делается каждый год. До процедуры питомца обрабатывают от гельминтов и паразитов, она должна быть здорова. По желанию делают моноукол или комбинированным препаратом (от всех болезней).
Привитая собака тоже может заразится, если:
- вакцина была просроченная или неправильно хранилась;
- во время прививки животное было заразно, болезнь находилась в инкубационном периоде.
После прогулок с другими собаками (или поездок в лес) питомца нужно осмотреть на предмет укусов, ссадин и царапин.
Выгуливая питомца лучше не контактировать с незнакомыми и бродячими собаками. Особенно опасны стаи бездомных собак, которые могут не только покусать и заразить бешенством, но и нанести серьезный вред здоровью. Своевременная прививка от бешенства гарантирует здоровье и долгую жизнь четвероногому любимцу.
источник
Статус ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
ФГБУ «ВНИИЗЖ» с 2000 года является диагностическим центром РФ по бешенству (Приказ № 32 Департамента ветеринарии МСХ РФ от 19.10.2000 г.). В 2009 г ФГБУ «ВНИИЗЖ» успешно прошел квалификационный тест Французского управления по безопасности пищевых продуктов (AFSSA) в Нанси, Франция и с 2010 г. имеет международную аккредитацию на право определения антител к вирусу бешенства. Ссылка на международную аккредитацию ФГБУ «ВНИИЗЖ» находится на сайте Евросоюза по адресу http://ec.europa.eu/food/animal/liveanimals/pets/approval_en.htm#russia
Сведения для владельцев животных
Для разных стран могут быть разные условия ввоза животных, которые могут меняться, поэтому владельцам необходимо самим выяснять условия ввоза животных в страну на тематических ресурсах.
Метод исследования, сроки исполнения анализа
Титр антирабических вируснейтрализующих антител в сыворотке крови животного определяют в реакции нейтрализации на культуре клеток.
Длительность анализа c оформлением результатов исследования составляет 10 рабочих дней с момента получения подтверждения оплаты исследований.
Требования, предъявляемые к сывороткам крови животных
Для определения антител к вирусу бешенства у животных используют только сыворотку крови. Кровь берут в лицензированной ветеринарной клинике / лаборатории / СББЖ не ранее чем через 30 дней после последней антирабической вакцинации.
Для получения сыворотки крови проводят забор венозной крови при помощи инъекционной иглы в сухую чистую пластиковую пробирку в объеме не менее 2 мл. Антикоагулянты не добавлять! После забора крови ее выдерживают при 37°С в течение 30 минут для формирования сгустка крови. Далее осторожно отделяют сформировавшийся сгусток крови от стенок и помещают пробирку на 4°С на 30-60 минут. После этого пробу центрифугируют при 189 – 335 g (1500 – 2000 оборотов в минуту). По окончании центрифугирования осторожно, не захватывая осадок, отбирают надосадочную жидкость – сыворотку крови. Сыворотка крови должна быть прозрачная, с цветом от светлого до соломенно-желтого. Допускается легкая степень гемолиза (розоватый цвет). Необходимый объем сыворотки крови для исследования составляет 1,0 мл.
Не принимаются к исследованию цельная кровь или образцы с примесью форменных элементов крови, сыворотки крови с сильным гемолизом (темно-красного цвета), с осадком, мутные, с гнилостным запахом.
Пробирка для сыворотки крови должна быть пластиковая, герметично закрытая, крышка дополнительно герметизирована (парафильм, скотч) промаркирована устойчивым маркером и опечатана печатью ветеринарного учреждения, в котором проводили забор крови на исследование.
Правила транспортировки образцов сыворотки крови
В зависимости от длительности транспортировки пробы необходимо направлять в замороженном либо охлажденном состоянии в термоконтейнере. Пробирку с сывороткой максимально обезопасить от проливания образца или попадания в него влаги. Для примера: использовать 2 пакета со льдом, первый положить на дно контейнера, затем положить сыворотку в пластиковой, герметично закрытой, промаркированной пробирке и завернутую в целофановый пакет, второй пакет со льдом положить сверху. К контейнеру приложить (прикрепить, например скотчем) пакет документов. Все это упаковать в тару (пакет).
До отправки в ФГБУ «ВНИИЗЖ» сыворотку крови хранят при 4°С не более 2 дней. Если сыворотку крови необходимо хранить более длительный срок, то ее помещают при минус 20°С. Замороженную сыворотку крови для отправки в ФГБУ «ВНИИЗЖ» упаковывают, как описано выше. Не допускается замораживание и оттаивание сыворотки крови более 2 раз. Если отбирают пробы от нескольких животных, принадлежащих одному владельцу, то каждую пробу (пробирку) необходимо маркировать. Посылку нужно отправить на адрес ФГБУ «ВНИИЗЖ», дополнительно указать «Пункт приема патологических материалов».
Если Вы сами не можете привезти пробу, то ее можно доставить в ФГБУ «ВНИИЗЖ» любой экспресс-почтой, которая пересылает биологический материал, по России, например, SPSR, Pony-express, Major-express, Dimex, DHL (компания работает только с юридическими лицами) и т.п. Правила упаковки пробы такие же.
Контакты, адрес, схема проезда для доставки сыворотки курьерской службой здесь: http://www.arriah.ru/main/about/contacts
Сопроводительное письмо в ФГБУ «ВНИИЗЖ»
Вместе с образцами сывороток крови направляют сопроводительное письмо (Приложение 1) для исследований на наличие антител к вирусу бешенства, заверенное подписью ветеринарного врача и печатью ветеринарной клиники, где проводился отбор образцов.
К сопроводительному письму необходимо приложить:
1. копию ветеринарного паспорта животного (страница с данными о животном и владельце, страница с последней вакцинацией против бешенства), заверенную подписью ветврача и печатью ветеринарной клиники;
2. копию российского паспорта владельца для выписывания счета на оплату (данные о владельце, адрес проживания, электронный адрес);
3. копию заграничного паспорта владельца для оформления документов на вывоз.
Если в ветеринарном паспорте в графе «владелец» написан один человек, а вывозить будет другой человек, то от владельца нужна доверенность на имя того человека, который будет вывозить животное. Доверенность нужна на границе, в ветеринарном пункте. Правила ее оформления, пожалуйста, уточняйте в посольстве той страны, в которую Вы вывозите животное. Для постановки анализа данная доверенность не нужна.
В ряде случаев у молодых и старых животных, если они прививались впервые, может оказаться, что уровень антител ниже требуемой нормы в 0,5 международных единиц/мл. Это может быть обусловлено индивидуальными, породными особенностями животного, его физиологическим состоянием на момент вакцинации, качеством вакцины. В этом случае, мы рекомендуем пройти повторную вакцинацию и провести повторный анализ. Поэтому планируйте проведение анализа не накануне вылета.
Прием материала для исследования
Сыворотку крови для исследования на антитела к вирусу бешенства передают в «Пункт приема патологических материалов» ФГБУ «ВНИИЗЖ». Время работы пункта с 8:00 до 15:30. Необходимо заключить договор на проведение исследования в коммерческом отделе ФГБУ «ВНИИЗЖ» (отдел реализации). Результаты Вам могут быть отправлены «Почтой России» или курьерской службой.
Получить консультацию по вопросам проведения исследования на антитела к вирусу бешенства можно в лаборатории бешенства и BSE по телефону 8 (4922) 26-19-88, 26-15-12, 26-17-65, добавочный 23-33, Чернышова Елена Владимировна, либо по эл. почте chernishova@arriah.ru. Всю необходимую информацию для заключения договора, получения счета и результата можно уточнить в отделе реализации по телефонам: (4922) 26-15-51, 26-15-25, Рябова Юлия, либо по эл. почте ryabova@arriah.ru .
в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»
референтную лабораторию по бешенству и BSE
600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец
Направляется сыворотка крови для исследования на наличие антител к вирусу бешенства от:
пол________________________, дата рождения_________________________,
индивидуальный идентификационный номер (чип)_______________________
последняя дата вакцинации против бешенства «____» «___________» 20___г.
серия и номер______________________________________________________
дата взятия крови для анализа ________________________________________
ФИО владельца ____________________________________________________
Адрес, индекс владельца_____________________________________________
Телефон, E-mail владельца___________________________________________
Прилагаются следующие документы: 1. копия рос. паспорта владельца (стр. 2-3, 5-6);
2. копия загран. паспорта владельца (стр. с фотографией); 3. копия паспорта животного.
ФИО владельца ____________________________________________________
ФИО вет. врача ____________________________________________________
«____» «__________» 20____г. М.П.
название организации (вет. клиника / лаборатория / СББЖ), адрес, телефон
источник
Методы выявления антигенов. При бешенстве для экспресс-диагностики можно использовать методы флуоресцирующих антител (МФА), реакции преципитации (РП) в агаровом геле, методы иммуноферментного анализа (ИФА), полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для прижизненной диагностики бешенства у человека требуется несколько тестов.
Определение антител к антигенам вируса бешенства. Выявление антител в сыворотке крови или в цереброспинальной жидкости — важный метод диагностики. Серологическое исследование рабиес-специфических антител проводится в сыворотке крови для определения пред- и постэкспозиционной вакцинации и определения времени бустерной иммунизации с целью повышения иммунного ответа.
Выделение вируса. Для выделения и идентификации вируса используют метод биопробы на белых мышах. Исследуемый материал суспендируют в физиологическом растворе, содержащем антибиотики и эмбриональную сыворотку крупного рогатого скота. Суспензия вводится интрацеребрально белым мышам массой 5–6 г. Для доказательства развития инфекции за мышами ежедневно наблюдают до 30-го дня после инокуляции. Мыши, у которых за этот период развивается заболевание, немедленно подвергаются эвтаназии, и ткани мозга исследуются методом прямой МФА.
Преимущество данного подхода состоит в возможности определить малые количества вируса бешенства в материале. Недостаток метода — необходимость многодневного (7–18 суток) ожидания между инокуляцией и проявлением первых признаков заболевания. Для сокращения инкубационного периода применяют мышей-сосунков. Для экспресс-диагностики можно использовать мышей в возрасте менее 3 дней: у мышей, забитых через 3 дня, уже выявляется антиген вируса в мозге, который можно выявить методом МФА.
Такой метод выделения вируса практикуется в качестве подтверждающего диагностического теста при отрицательных результатах по выявлению антигена и телец Бабеша – Негри и в случае укуса человека подозрительным на бешенство животным. Он обеспечивает надлежащую чувствительность и специфичность, т. е. расценивается на уровне диагностической значимости метода прямой иммунофлуоресценции. Кроме того, этот метод является основным для идентификации вариантов вируса и перспективен для разработки диагностических реагентов.
Выделение и идентификация вируса на культуре клеток. Основным недостатком выделения вируса при инфицировании лабораторных животных является длительность метода. Избежать этого можно при использовании культур клеток. Обычно для этих целей используют культуру клеток нейробластомы мышей, если нужно исследовать ткани головного мозга. Мозг суспендируют в культуральной питательной среде, суспензию наносят на монослой культуры клеток и инкубируют от одного до нескольких дней.
Чувствительность данной культуры к вирусу можно повысить обработкой ее ДЕАЕ декстраном. Монослой клеток затем отмывают, фиксируют на холоде ацетоном или смесью формалина с метанолом и исследуют методом иммунофлюоресценции. Если животное было инфицировано вирусом бешенства, то в монослое культуры клеток выявляются цитоплазматические включения антигена вируса бешенства.
Показано, что на клетках мышиной нейробластомы линии Na C1 300 в сочетании с МФА антиген вируса бешенства можно выявить через 2 дня. Чувствительность метода сравнима с методом изоляции вируса на мышах.
Хотя вирус бешенства обладает облигатной нейропатогенностью in vivo, он способен инфицировать широкий круг клеток-хозяев in vitro, что можно использовать для исследования других тканей и органов на наличие вируса бешенства. Установлено, что вирус бешенства размножается в клетках ВНК-21 и Vero, в первичных клетках куриных эмбрионов или почек хомяка. Показано, что адсорбция вируса и внедрение его в клетку происходят в течение 7 часов. Через 24–48 часов внутри клетки образуются новые вирусные частицы, через 72 часов происходит почкование их из клеточной оболочки в межклеточное пространство.
Для экспресс-диагностики бешенства могут быть использованы:
а) метод МФА — для выявления антигена вируса бешенства в отпечатках роговицы или заднего отдела шеи больного, содержащего луковицы волос;
б) метод ПЦР — для выявления РНК вируса в биоптатах тканей, слюне, спинномозговой или слезной жидкости;
в) метод ИФА — для выявления специфических антител (антигена) у больных с типичным или атипичным течением.
г) метод биопробы — для выделения вируса на ранних этапах заболевания или для выявления антител в крови или спинномозговой жидкости на поздних стадиях заболевания. Для экспресс-диагностики используется комплексный метод (биопроба + МФА), заключающийся в заражении исследуемым материалом 2-дневных новорожденных мышей и исследования их мозга на 3–4-е сутки в МФА.
Выбор методов прижизненной диагностики в значительной мере зависит от стадии болезни: метод, основанный на выявлении антигенов, как правило, обладает высокой чувствительностью в конце инкубационного периода, в течение первых нескольких дней заболевания, в то время как вируснейтрализующие антитела обычно появляются в спинномозговой жидкости и сыворотке крови после 7-10 дней от начала болезни.
Реакция иммунофлюоресценции. Метод основан на использовании антител, связанных с красителем, например, флюоресцеинизотиоцианатом. РИФ широко применяется для выявления вирусных антигенов в материале больных и для быстрой диагностики.
Метод обладает наиболее высокой степенью чувствительности, он положен в основу экспресс-диагностики и позволяет обнаруживать вирусные антигены в течение нескольких часов
Основные достоинство МФА: быстрота выполнения, высокая специфичность (100%). Затрачиваемое время на диагностику заболевания с его помощью — менее одного дня. Применяются прямой и непрямой варианты МФА.
Прямая иммунофлуоресценция остается наиболее предпочитаемым методом диагностики бешенства. Предметные стекла, содержащие мазки-отпечатки тканей мозга, или стекла с монослоем культуры тканей фиксируют в ацетоне в течение 1–4 часов. Затем препараты высушивают и обрабатывают флуоресцирующими поликлональными антинуклеокапсидными антителами (иммунофлуоресцентный реагент).
Этот реагент представляет собой конъюгат, приготовленный из специфических поликлональных антител IgG класса к нуклеокапсидному антигену вируса и флуоресцеина изоцианата (ФИТЦ). Специфические антитела получают путем гипериммунизации животных (кроликов, хомяков или лошадей) смесью эпитопов нуклеокапсида вируса.
В настоящее время для этих целей все шире используют мышиные моноклональные антитела к нуклеокапсиду вируса бешенства. После 30-минутной инкубации при 37° С диагностические препараты многократно отмывают физиологическим раствором и дистиллированной водой.
Антитела, меченные ФИТЦ, фиксируются только в местах локализации вирусных нуклеопротеидных антигенов. Затем препараты высушивают на воздухе и исследуют методом световой микроскопии, используя в качестве источника света ксеноновую лампу и соответствующий фильтр.
При непрямом варианте антиген сначала соединяют с неокрашенной специфической иммунной сывороткой. Затем на образовавшиеся нефлуоресцирующие комплексы антиген-антитело воздействуют меченой флуорохромом иммунной сывороткой, содержащей антитела к белкам специфической сыворотки. Непрямой вариант МФА наряду с выявлением антигена позволяет количественно определять антитела в исследуемой сыворотке путем соответствующего ее разведения.
Меченые ФИТЦ образования в клетках разных тканей выявляются в виде желто-зеленого флуоресцентного окрашивания на темном фоне (в виде округлой или овальной формы внутрицитоплазматических включений).
Иммуноферментный анализ. Метод основан на принципе сорбции белков на твердой фазе с последующим образованием комплексов антиген-антитело, выявляемых субстрат-индикаторным раствором. Добавляемый в лунки антиген специфически связывается с антителами. На слой антигена наносят исследуемые сыворотки в нужных разведениях. При наличии в них специфических антител последние связываются с антигеном. Для выявления связывания на слой антител наносят иммуноглобулин против глобулинов сыворотки людей, коньюгированный с пероксидазой хрена. Количество сорбирующего коньюгата пропорционально количеству связавшихся с антигеном антител сывороток людей. Это можно определить, используя индикаторный раствор (ортофенилилендиамин + перекись водорода), компоненты которого в результате действия пероксидазы коньюгата окрашивают жидкость в коричнево-желтый цвет. При обследовании неясных случаев применение ИФА дополнительно к методам РП или РСК позволяет увеличить достоверность лабораторной диагностики бешенства, благодаря большой чувствительности этого метода. Метод позволяет обнаруживать инфекционные и дефектные частицы.
Для определения антирабических антител в процессе вакцинации можно применять непрямой метод ИФА, используя в качестве антигена очищенный вирус, а для определения антител класса IgG в человеческой сыворотке — А-белок стафилококка, связанный с пероксидазой хрена. Результаты ИФА сравнимы с полученными в тестах вирусной нейтрализации на мышах. Метод позволяет выявлять присутствие IgМ в начале процесса иммунизации.
Иммуноферментные методы — весьма перспективны для выявления нуклеокапсидного антигена вируса при посмертной диагностике в тканях головного мозга. В их числе, например, быстрый иммуноферментный метод диагностики бешенства, основанный на приготовлении плашек сенсибилизированных антителами IgG изотипа к нуклеокапсиду первого серотипа, разведенных в карбонатном буфере.
Материал для исследования гомогенезируют в буфере или культуральной среде, осветляют центрифугированием, вносят в лунки и инкубируют в плашках. Фиксированный специфическими антителами нуклеокапсидный антиген идентифицируют добавлением пероксидазного конъюгата с антинуклеокапсидными противорабическими антителами иной видоспецифичности и хромогенного субстрата. Чувствительность метода составляет 0,8–1,0 нг/мл.
Этим методом можно выявлять антигены вирусов различных серотипов. Применение конъюгатов нуклеокапсидспецифичных антител, меченых биотином, повышает чувствительность метода до 0,1–0,2 нг/мл.
Методом ИФА успешно выявляется антиген нуклеокапсида [139], но материал, даже разложившийся, не должен фиксироваться формалином.
Метод полимеразной цепной реакции. Для экспресс-диагностики вируса бешенства и идентификации лиссавирусов наиболее удобен метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод ПЦР — самый надежный и быстрый для выделения вирионной РНК из любых проб, содержащих вирус в низкой концентрации. С его помощью можно создать много копий РНК вируса. Этот метод используется для подтверждения результатов МФА и для определения вируса в слюне, луковицах волос заднего отдела шеи и головы.
ПЦР основана на принципе естественной репликации ДНК. Суть метода заключается в многократном повторении циклов синтеза (амплификации) вирусоспецифической последовательности ДНК с помощью термостабильной Taq ДНК-полимеразы и двух специфических затравок, так называемых праймеров.
Каждый цикл состоит из трех стадий с различным температурным режимом. В каждом цикле удваивается число копий синтезируемого участка. Вновь синтезированные фрагменты ДНК служат в качестве матрицы для синтеза новых нитей в следующем цикле амплификации, что позволяет за 25–35 циклов наработать достаточное число копий выбранного участка ДНК для ее определения, как правило, с помощью электрофореза в агарозном геле.
Особенно высокая чувствительность ПЦР при использовании праймеров, комплементарных N-гену, когда удается выявлять РНК вируса в пробах, содержащих вирус в титре 10 МЛД50. Методом ПЦР можно выявлять РНК вируса даже в разложившемся патологическом материале.
В настоящее время разработаны и широко используются на практике подтверждающие (конфирматорные) тесты, такие как ПЦР в обратно-транскриптазном исполнении (ОТ-ПЦР). Метод ОТ-ПЦР — высокочувствительный и наиболее эффективный. РНК экстрагируется из тканей инфицированного вирусом органа, транскрибируется в кДНК, которая затем амплифицируется методом ПЦР. Для постановки ОТ-ПЦР необходимы праймеры, полученные к консервативным областям генома вируса бешенства. Обычно используются гены, кодирующие нуклеопротеин или N-белок.
Метод ПЦР высокоспецифичен и очень чувствителен. Является одним из наиболее точных тестов детекции рабического антигена, позволяет диагностировать бешенство даже при наличии в материале хотя бы одного вириона. В основе теста лежит комплементарное достраивание РНК-матрицы, осуществляемое in vitro с помощью фермента РНК-полимеразы. В последние годы ПЦР находит все более широкое применение для диагностики и мониторинга вирусных инфекций. Однако методика проведения сложна, дорогостояща и пока недостаточно унифицирована для рутинного применения.
Цитологические методы в настоящее время имеют ограниченное диагностическое значение, но при ряде инфекций по-прежнему должны применяться. Исследуются материалы аутопсии, биопсии, мазки, которые после соответствующей обработки окрашиваются и анализируются под микроскопом. При бешенстве — это выявление включений в цитоплазме клеток (тельца Бабеша – Негри).
Выделение вируса. Выделение вируса может быть необходимым для подтверждения результатов тестов по определению антигена и для более детальной характеристики изолятов. И хотя этот метод является одним из самых старых и трудоемких методов диагностики, сегодня выделение вируса с последующей идентификацией с помощью одного из современных методов (ИФА с моноклональными антителами или ПЦР) является наиболее достоверным методом диагностики, т. н. «золотой стандарт».
Результативность методов диагностики бешенства может варьировать в зависимости от ряда факторов (стадии болезни, сроков забора материала, качества полученных проб, условий их хранения, опытности персонала, качества реактивов и др.). Если положительный результат подтверждает бешенство, то отрицательный не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. Поэтому при бешенстве эксперты ВОЗ рекомендуют использовать несколько тестов, особенно МФА в сочетании с биопробой на новорожденных (2–3 дневных) белых мышах.
Все работы с материалом, предположительно содержащим вирус бешенства, равно как и с животными, подозрительными на бешенство, должны проводиться с соблюдением мер личной безопасности. Медицинские работники и ветеринарные врачи должны работать в халатах, перчатках, масках.
По окончанию работы боксы обрабатывают 3% раствором перекиси водорода.
Флаконы, ампулы и инструменты, а также оставшиеся материалы, содержащие вирус бешенства, и всю посуду после работы обеззараживают автоклавированием в течение 1 часов при 1,5 атм (режим «убивки»).
Средства индивидуальной защиты обеззараживают кипячением или автоклавированием. Рабочую поверхность стола и руки обеззараживают дезраствором (0,5% раствор хлорамина).
источник