Гистологическое исследование является важным, а иногда решающим в постановке диагноза. Его проводят в тех случаях, когда на основании эпизоотической ситуации, клинических признаков, картины вскрытия, бактериологического и других исследований установить диагноз невозможно.
Патматериал берут из разных мест подлежащих исследованию органов и тканей от свежих трупов или только что убитых животных в чистую, сухую стеклянную или реже глиняную посуду.
Площадь кусочков органов и тканей, отбираемых для гистоисследования, не должна превышать 1-2 см 2 , толщина — 1 см. Из каждого органа берут 3-4 кусочка, мелкие органы берут полностью. При наличии видимых невооружённым глазом изменений в органах или тканях кусочки вырезают на границе так, чтобы в них попали измененные и неизмененные участки. Обязательно’ надо взять кусочки органа с капсулой. Головной мозг можно брать полностью (целиком) или вырезать кусочки с учетом особенностей заболевания центральной нервной системы. Почки, надпочечники, яичники надо брать так, чтобы попали корковый и мозговой слои.
Отобранный патматериал сразу же помешают в фиксирующую жидкость, количество которой должно быть в 10-15 раз больше, чем патматериала. На дно банки предварительно помещают слой ваты для равномерного пропитывания патматериала. Если патматериал в день взятия не отправлен в лабораторию, то через 24 часа фиксирующую жидкость сменяют. Смену фиксирующей жидкости осуществляют необходимое число раз до завершения процесса фиксации, о чём судят следующим образом. Один из кусочков разрезают поперёк, если при этом вся поверхность разреза окажется равномерного серо-белого цвета, то фиксация завершена, если центр кусочка имеет розовый цвет, то смену жидкости продолжают с суточным интервалом необходимое число раз. Следует помнить, что при фиксации в формалиновом растворе патматериал хранят в темном месте или в темной посуде.
Для гистоисследования можно направить целые трупы, органы или. их части в нефиксированном виде. В таком случае должна быть обеспечена быстрая доставка их в лабораторию.
1. Раствор формалина 10%-ной концентрации. Это наиболее распространенная, недорогая и универсальная фиксирующая жидкость. Раствор готовят на водопроводной или колодезной воде. Для приготовления 1 литра раствора берут 100 мл 40%-ного- формалина и 900 мл воды.
Лучше, пользоваться нейтральным формалином. Способ его приготовления: к 1 л продажного формалина добавляют 100-200 г молотого мела или углекислой магнезии. Полученный раствор в течение первого дня несколько раз перемешивают. Затем дают отстояться, после чего формалин готов для приготовления нейтрального раствора.
2. Ацетон или спирт с эфиром поровну. Эти вещества применяют для фиксации материала при необходимости исследования на бешенство . Формалиновая фиксация для этой цели непригодна.
3.Спирт-ректификат 96°-ный является универсальной фиксирующей жидкостью, которую можно применять во всех случаях. С целью экономии спирта кусочки патматериала берут размером 5x5x5 мм.
Во избежание промерзания материала при перевозке в зимнее время его необходимо хорошо профиксировать на месте, затем переложить в жидкость для транспортировки: 30-50%-ный раствор глицерина, приготовленный на 10%-ном растворе формальна или 70°-ного спирта.
Профиксированныи на месте патматериал можно пересылать в емкости меньшего размера. Фиксирующую жидкость и патматериал в таком случае можно брать в соотношении 1:3-5, а не 1:10-15, как это требуется для фиксации свежего патматериала. Правила упаковки и пересылки патматериала для
Патматериал для гистоисследования можно направлять по почте и нарочным. В свежем (нефиксированном) виде патматериал направлять только с нарочным. В том и другом случае патматериал надо обязательно тщательно упаковывать, лучше в стеклянную посуду или в полиэтиленовую пленку (но не в мешочек, который может разорваться по шву). Затем уложить в деревянный или металлический ящик, приняв при этом все меры предосторожности против разрыва пленки и рассеивания возбудителей болезней во внешней среде. Упаковка должна гарантировать доставку патматериала в целости. На верхней стороне ящика делает— надпись: «Осторожно — стекло», «Верх».
При отсутствии полиэтиленовой пленки материал можно упаковывать в клеенку, брезент, холст, мешковину, смоченные креолином, лизолом или другим дезинфицирующим раствором.
При пересылке фиксированного или консервированного патматериала емкость герметически закрывают пробкой (стеклянной, резиновой, пробковой или деревянной). Пробку закрепляют тонкой проволокой или шпагатом и заливают сургучом или смолой, воском, парафином, менделеевской замазкой. На банки с кусочками органов и тканей наклеивают этикетки с указанием номера иго: клички животного, внутрь банки кладут этикетку из ватмана или картона, полотна с написанным тушью или простым (не химическим) карандашом номером животного.
В банку лучше брать патматериал от одного животного. Если берут от нескольких животных в одну банку, то кусочки от каждого животного с этикеткой (номером) завязывают в кусочки марли. Банки устанавливают в ящик и плотно обкладывают их ваток или паклей, бумагой, опилками, стружками, соломой, чтобы они не разбились при транспортировке. Ящик закрывают и опечатывают.
Профиксированный на месте патматериал для пересылки можно пересылать в лабораторию без использования посуды. Для этого его следует обложить ватой, смоченной фиксирующей жидкостью, тщательно завернуть в клеенку, а затем упаковать в ящик.
Если надо пересылать целые органы или их куски толщиной более 3 см, то для лучшего проникновения фиксирующей жидкости следует сделать на органах разрезы и вложить туда вату.
Кости упаковывают в полиэтиленовую пленку или целлофан, клеенку, марлю, ткань, смоченные в каком-либо дезинфицирующем растворе.
При пересылке нефиксированного патматериала от животных, болевших особо опасными болезнями (сибирская язва, бешенство, шумящий карбункул, бруцеллез, чума, инфекционная анемия, туляремия, ящур) должна соблюдаться особая осторожность. Такой патматериал помещают э герметически закрываемую емкость. Крышку укрепляют, заливают сургучом или другим веществом. Емкость устанавливают в металлический ящик (коробку), который необходимо запаять, опломбировать или опечатать, а затем металлический ящик поместить в деревянный и сделать надпись: «Осторожно — стекло», «Верх». Если такой материал отправляют с нарочным, то герметически закрытые банки можно тщательно упаковывать в деревянный ящик без металлической коробки.
К посылаемому патматериалу прилагают сопроводительный документ на упаковку материала и протокол вскрытия трупа или осмотра убитого животного.
В сопроводительной на упаковку указывают, какой патматериал направлен, сколько, в какой посуде, какая фиксирующая жидкость использована, род упаковки. Один экземпляр сопроводительной отправляют запечатанным в конверт вместе с патматериалом, а второй остается у отправителя. В случае обнаружения в лаборатории или на кафедра несоответствия упаковки, количества патматериала с данными сопроводительного документа или обнаружения порчи патматериала составляется акт. Копия такого акта отсылается отправителю патматериала.
источник
4.1. При возникновении подозрения на заболевание бешенством организации и граждане – собственники животных, юридические лица, индивидуальные предприниматели, граждане, заключившие охотхозяйственные соглашения и федеральные органы исполнительной власти при наличии подведомственных им охотхозяйств (заказников), особо охраняемых природных территорий федерального значения немедленно (в течение 24 часов) сообщают (устно или письменно) должностному лицу органа исполнительной власти субъекта Российской Федерации, осуществляющего переданные полномочия в сфере ветеринарии, или подведомственного ему учреждения о подозрении на заболевание животных бешенством, о случаях заболевания или необычном поведении диких животных (отсутствие страха перед человеком, неспровоцированное нападение на людей или животных) и случаях покуса сельскохозяйственных и домашних животных дикими хищниками, собаками или кошками, принимают необходимые меры к надежной изоляции подозрительных по заболеванию или покусанных животных.
Покусавшие людей или животных собаки, кошки и другие животные (кроме явно больных бешенством) подлежат немедленной доставке владельцем или специальной бригадой по отлову безнадзорных собак и кошек в ближайшее государственное ветеринарное учреждение для осмотра и карантинирования под наблюдением специалистов в течение 10 дней.
В отдельных случаях, по разрешению руководителя государственного ветеринарного учреждения, животное, покусавшее людей или животных, может быть оставлено у владельца, выдавшего письменное обязательство содержать это животное в изолированном помещении в течение 10 дней и представлять его для осмотра в сроки, указанные ветеринарным специалистом данного учреждения, осуществляющим наблюдение.
Результаты наблюдения за карантинированным животным регистрируют в специальном журнале и в письменном виде сообщают учреждению, где прививают пострадавшего человека, и в территориальное управление Роспотребнадзора по месту жительства пострадавшего.
По окончании срока карантинирования клинически здоровые животные после предварительной вакцинации могут быть возвращены владельцам — при условии их изолированного содержания в течение 30 дней. Животных, заболевших бешенством, уничтожают.
4.2. При возникновении подозрения на заболевание бешенством животных на объектах, подведомственных федеральным органам исполнительной власти в области обороны, в сфере внутренних дел, в сфере исполнения наказаний, в сфере государственной охраны и в области обеспечения безопасности, руководители ветеринарных (ветеринарно-санитарных) служб указанных органов немедленно (в течение 24 часов) сообщают (устно или письменно) о подозрении на заболевание бешенством животных должностному лицу органа исполнительной власти субъекта Российской Федерации (на территории которого расположен соответствующий объект), осуществляющего переданные полномочия в сфере ветеринарии, или подведомственного ему учреждения (подразделения); организуют и осуществляют отбор проб биологического материала и направляют эти пробы в лабораторию (испытательный центр), входящую в систему органов и учреждений государственной ветеринарной службы Российской Федерации, или иную лабораторию (испытательный центр), научно-исследовательские учреждения аккредитованные в национальной системе аккредитации для исследования на бешенство.
В случае невозможности осуществления отбора проб патологического материала руководители ветеринарных (ветеринарно-санитарных) служб органов, указанных в настоящем подпункте, оказывают содействие специалистам госветслужбы в проведении отбора и направления проб биологического материала.
4.3. Должностное лицо органа исполнительной власти субъекта Российской Федерации, осуществляющего переданные полномочия в сфере ветеринарии, или подведомственного ему учреждения (подразделения) в течение 24 часов после получения информации о подозрении на возникновение очага бешенства:
— выезжает на место предполагаемого эпизоотического очага, совместно со специалистами органов, уполномоченных осуществлять государственный санитарно-эпидемиологический надзор определяет границы предполагаемого эпизоотического очага (квартиры, жилые дома, личные подворья граждан, животноводческие помещения, скотобазы, летние лагеря, участки пастбищ, охотничьи хозяйства, пастбища, часть лесного массива, урочища, другие территории и другие объекты, где обнаружены больные бешенством животные). Границы эпизоотического очага определяются с учетом эпизоотической ситуации, хозяйственных и ландшафтно-географических особенностей местности;
— проводит эпизоотологическое расследование с составлением акта;
— осуществляет отбор проб биологического материала и направляет указанные пробы в лабораторию (испытательный центр), входящую в систему органов и учреждений государственной ветеринарной службы Российской Федерации, или иную лабораторию (испытательный центр), аккредитованную в национальной системе аккредитации, для исследования на бешенство.
4.4. Должностное лицо учреждения (подразделения), подведомственного органу исполнительной власти субъекта Российской Федерации, осуществляющему переданные полномочия в сфере ветеринарии, в течение 24 часов после получения информации о подозрении на возникновение очага бешенства, информирует о подозрении на заболевание бешенством руководителя органа местного самоуправления, на территории которого располагается предполагаемый эпизоотический очаг.
4.5. Должностное лицо органа исполнительной власти субъекта Российской Федерации, осуществляющего переданные полномочия в сфере ветеринарии, или подведомственного ему учреждения (подразделения):
— любым доступным способом информирует население муниципального образования, на территории которого возник предполагаемый очаг бешенства и владельцев животных о требованиях настоящих Правил по предотвращению распространения бешенства
— уточняет количество имеющегося на учете поголовья кошек, собак, пушных зверей на территории муниципального образования, восприимчивых продуктивных животных в хозяйствах в зоне предполагаемого очага бешенства, наличие и необходимость дополнительной потребности в биопрепаратах для вынужденной специфической профилактики (вакцинации) бешенства
4.6. Руководитель органа исполнительной власти субъекта Российской Федерации в области ветеринарии при получении им информации (уведомления) о возникновении подозрения на бешенство, немедленно (в течение 24 часов) обеспечивает направление в населенный пункт (местность), где расположен предполагаемый очаг бешенства, специалистов госветслужбы для:
— клинического осмотра животных и проведения эпизоотологического обследования предполагаемого эпизоотического очага;
— уточнения вероятных источников, путей заноса возбудителя болезни;
— уточнения границ предполагаемого эпизоотического очага и возможных путей распространения болезни,
— организации проведения комплекса мероприятий по предупреждению распространения и ликвидации болезни в случае подтверждения подозрения на бешенство (установления диагноза на бешенство).
Дата добавления: 2017-02-24 ; просмотров: 678 | Нарушение авторских прав
источник
Взятие и пресылка патматериала
Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и вирусологического исследования.
Патологический материал берут стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого будут брать патологический материал, на месте разреза обжигают над пламенем или прижигают нагретой металлической пластинкой.
Патологический материал берут как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года. При начавшемся разложении материал для исследования негоден.
В лабораторию материал отправляют в неконсервированном виде. Если доставить в лабораторию в течение ближайших 24—30 ч материал невозможно, то его консервируют.
Для бактериологического исследования патологический материал (органы или их части) консервируют в 30%-ном водном растворе химически чистого глицерина. Воду предварительно стери-лизуют кипячением или автоклавированием в течение 30 мин. В качестве консерванта можно применять также стерильное вазелиновое масло. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве, в 4—5 раз превышающем его объем.
Материал, предназначенный для вирусологического исследования, консервируют в 30—50%-ном растворе химически чистого глицерина на физиологическом растворе поваренной соли. Физиологический раствор предварительно стерилизуют в автоклаве при 120 «С в течение 30 мин.
Небольшие трупы животных (поросята, ягнята, телята), а также трупы мелких животных посылают целыми в непроницаемой таре.
Трубчатые кости направляют целыми с неповрежденными концами. Предварительно их тщательно очищают от мышц и сухожилий и завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью (5%-ный раствор карболовой кислоты). Кости можно также посыпать натрия хлоридом (поваренной солью) и завернуть в полотно или марлю.
Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от содержимого, а концы его перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями. Помещают в банки с 30—40%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором натрия хлорида. Объем консервирующей жидкости должен в 5—7 раз превышать объем взятого материала.
Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках или банках, которые закрывают пергаментной бумагой. От трупов животных кал можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов. В лабораторию кал должен быть доставлен не позднее 24 ч после взятия.
При посылке для исследования участков кожи берут наиболее пораженные части ее размером 10 х 10см и кладут в стерильную, герметически закрывающуюся посуду.
Кровь, гной, слизь, мочу, желчь и другой жидкий патологический материал для бактериологического и вирусологического исследований посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во флаконах, плотно закрытых стерильными резиновыми пробками.
Кроме того, выделения из различных полостей, естественных отверстий и др., предназначенные для микроскопического исследования (для обнаружения в них микробов, кровепаразитов и для определения лейкоцитарной формулы), посылают в виде мазков.
Предметные стекла кипятят в течение 10—15 мин в 1— 2%-ном водном растворе соды, затем тщательно промывают чистой водой, насухо вытирают и помещают в раствор спирта и эфира, взятых в равных частях, где и хранят до употребления.
Кровь берут из вены ушной раковины или края верхушки уха, у птиц — с поверхности гребня или из подкрыльцовой вены. Шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу протирают ватными тампонами, смоченными сначала спиртом и затем эфиром. Инструменты (иглы, скальпель) должны быть стерильными.
Первую каплю крови удаляют стерильной ватой (исключение делается при исследовании крови на пироплазмидозы, когда для мазка берут первую каплю крови), а следующую свободно выступившую каплю берут на предварительно подготовленное предметное стекло быстрым и легким прикосновением к капле поверхностью стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают между пальцами левой руки в горизонтальном положении. К левому краю капли прикасаются под углом 45° шлифованным краем другого предметного (или покровного) стекла. Как только капля равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности предметного стекла слева направо, не доводя до края на 0,5—1см. Ширина мазков должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови.
Готовые мазки крови высушивают только на воздухе. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке теплого стерилизатора.
Метод фиксации мазков зависит от цели исследования.
Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкими, равномерными и достаточной длины. На высушенных мазках и отпечатках острым предметом делают надпись с указанием номера или клички животного и даты приготовления мазка.
Мазки из тканей, гноя, органов и различных выделений готовят путем размазывания материала на предметном стекле стерильной палочкой или ребром другого предметного стекла до тонкого слоя. Частицы органов плотной консистенции, твердые узелки, а также вязкий материал заключают между двумя предметными стеклами и растирают. Затем стекла разъединяют, растаскивая их в противоположные стороны в горизонтальном направлении. Получаются два довольно тонких мазка. Иногда делают препараты-отпечатки. Для этого вырезанный острым скальпелем кусочек органа захватывают пинцетом и свободной поверхностью кусочка делают на стекле несколько тонких отпечатков.
Взятие материала для патологогистологического исследования. Материал берут от свежих трупов или убитых животных не позднее 12, а летом — 2—3 ч после смерти от тех органов или тканей, где обнаружены патологические изменения, а также из главнейших паренхиматозных органов. Из разных участков патологически измененных органов (тканей) вырезают небольшие тонкие (не более 1— 2 см толщиной) кусочки. Вместе с пораженными участками ткани захватывают и граничащую с ней нормальную ткань. При иссечении кусочка учитывают микроскопическое строение (структуру) того или иного органа (ткани). Так, кусочки из почки, надпочечника, лимфатического узла берут с таккм расчетом, чтобы попадали оба слоя — корковый и мозговой; из головного мозга — серое и белое вещество; из селезенки — белую и красную пульпу; из легкого — части органа с бронхами и плеврой. Из сердца берут несколько кусочков: из мышцы правого и левого желудочков, правого и левого предсердий, папиллярных мышц и области клапанов. Из всех органов при иссечении захватывают и их капсулу. Из разных отделов желудочно-кишечного тракта вырезают небольшие кусочки размером 2 х 3 см и перед погружением в фиксирующую жидкость их рас-тягивают на картон и прошивают белыми нитками.
Взятый материал помещают в фиксирующую жидкость (10%-ный водный раствор нейтрального формалина), объем которой в 4—5 раз превышает объем взятого материала. В холодное время года во избежание промерзания при пересылке материал, профилированный в формалине, перекладывают в 30—50%-ный раствор глицерина (приготовленный на 10%-ном растворе формалина), в 70%-ный спирт или в насыщенный раствор натрия хлорида.
Если формалина нет, то в качестве фиксирующей жидкости используют 96%-ный этиловый спирт или ацетон. При применении спирта толщина кусочков не должна превышать 0,5 см. Для гисто-химических исследований патологический материал можно фиксировать также в жидкости Карнуа (спирт абсолютный — 60 мл, хлороформ — 30 мл и ледяная уксусная кислота — 10 мл) или в жидкости Буэна (концентрированная пикриновая кислота — 15 мл, формалин — 5 мл, ледяная уксусная кислота — 1 мл). Фиксирующую жидкость меняют каждые сутки до тех пор, пока она не станет прозрачной. Оптимальная температура фиксации 37 «С.
Патологический материал фиксируют в стеклянной или в крайнем случае в глиняной посуде.
На банку с кусочками органов и тканей наклеивают этикетку, на которой указывают номер или кличку животного и кому принадлежит, а внутрь ее опускают кусочек плотной бумаги или картона с написанным на нем простым (не химическим) карандашом номером животного.
Помещать в посуду несколько объектов исследования от разных животных можно только при том условии, если каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной этикеткой.
Упаковка и пересылка патологического материала.
Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным. Посылаемый материал, особенно от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, тщательно упаковывают в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить возможность рассеивания возбудителя инфекции в пути. Перед упаковкой материал завертывают в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (фенольным креолином, лизолом, известковым молоком), обертывают целлофаном или полиэтиленовой пленкой и кладут в ящик со стружками, мякиной или опилками.
Части органов, жидкости, отправляемые в лабораторию почтой в фиксированном или консервированном виде, помещают в герметически закупоренную стеклянную посуду с притертой стеклянной, пластмассовой, резиновой или корковой пробкой. Пробку закрепляют проволокой или бечевкой и заливают менделеевской замазкой (сургучом, смолкой, парафином или воском), чтобы укупорка была непроницаемой для жидкости. Укупоренную посуду вкладывают в прочно сбитый ящик, плотно обкладывают ватой, паклей, стружками, опилками или другим упаковочным материалом.
При пересылке почтой или с нарочным патологического материала от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, или явно инфицированного материала упаковка должна гарантировать доставку материала в целости и исключить возможность рассеивания возбудителей инфекции. На лицевой стороне посылки вверху должны быть надписи: «Осторожно — стекло» и «Верх».
Стеклянную посуду, в которой заключен посылаемый материал с подозрением на наличие особо опасных болезней (сап, сибирская язва, эмфизематозный карбункул, бруцеллез, туляремия, пери-пневмония крупного рогатого скота, чума крупного рогатого скота, чума свиней, псевдочума птиц, ящур, бешенство), обязательно упаковывают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют или опечатывают, а затем упаковывают еще в деревянный ящик.
Если такой материал отправляют с нарочным, его кладут в стеклянную посуду, герметически закупоривают и помещают в деревянный ящик.
Взятие и отправка патологического материала при подозрении на отравление.
Подозрение на отравление могут вызвать следующие признаки:
а) характерный запах содержимого желудка (горькоминдаль-ный, чесночно-хлороформенный и т. п. при исключении запаха примененных лекарств);
б) окраска содержимого желудка: желтая (от азотной и пикриновой кислот, солей хрома), зеленая, синяя (от солей меди) или иного цвета;
в) кровянистое содержимое желудка;
г) подозрительные включения в содержимом желудка — белые кристаллы сулемы и стрихнина, нерасгворившиеся белые кристаллы мышьяка;
д) набухшие^ увеличенные, дряблые, легко разрывающиеся серо-желтой окраски и т. п. слизистая оболочка желудка, почки, сердце;
е) поражения начальных отделов пищеварительного тракта (ротовой полости, пищевода, желудка);
ж) изменение цвета и консистенции крови.
При подозрении на отравление в лабораторию направляют материал от трупов павших животных для химического и гистологического исследований. Одновременно с целью определения источника отравления посылают все корма (по 1 кг корма каждого вида), которые скармливали животным. Обязательно посылают остатки кормов из кормушки.
Для химического исследования в лабораторию посылают в отдельных банках следующий материал:
а) часть пищевода и пораженную часть желудка с содержимым (в количестве 0,5 кг), а от крупного и мелкого рогатого скота и верблюдов — часть пищевода, сычуга и небольшое количество содержимого из разных мест сычуга, рубца.
Желудок и его содержимое берут в следующем порядке.
При вскрытии трупа после осмотра внутренних органов перевязывают лигатурами пищевод и двенадцатиперстную кишку вблизи стенки желудка (по две лигатуры) и перерезают между ними. Желудок извлекают и кладут в кюветы, а затем вскрывают. Содержимое желудка предварительно (не выбирая из желудка) перемешивают (нельзя использовать металлические предметы), после чего осто-рожно, чтобы не загрязнить, берут часть его;
б) отрезок тонкого кишечника (длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
в) отрезок толстого кишечника (длиной до 40 см) в наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
г) часть печени (0,5—1 кг) с желчным пузырем (от крупных животных), печень целиком (от мелких животных);
ж) скелетную мускулатуру в количестве 0,5 кг.
Кроме того, в зависимости от особенностей предполагаемого отравления дополнительно посылают:
а) при подозрении на отравление через кожу (путем инъекции) — часть кожи, клетчатки и мышцы из места предполагаемого введения яда;
б) при подозрении на отравление газами (сероуглеродом и т. д.) — наиболее полнокровную часть легкого (в количестве 0,5 кг), трахею, часть сердца, 200 мл крови, часть селезенки и головного мозга. От мелких животных (в том числе и от птиц) берут органы целиком.
При вскрытии отрытого из земли трупа животного берут: сохранившиеся внутренние органы в количестве до 1 кг; скелетную мускулатуру в количестве 1 кг, землю под трупом 0,5 кг из двух-трех мест.
Для гистологического исследования посылают небольшие кусочки, размером 1 х 3 х 5 см, следующих органов: печени; почек (обязательно с наличием коркового и мозгового слоев); сердца; легкого; селезенки; языка; пищевода; желудка; тонкого и толстого кишечника; скелетной мускулатуры; лимфоузлов; головного мозга (половину мозга в стерильной банке).
Кусочки берут из пораженных участков органов и на границе с ними из непораженной части ткани и помещают в 10%-ный раствор формалина (из расчета на 1 часть патологического материала 10 час-тей раствора формалина).
При подозрении на отравление веществами, употребляемыми для борьбы с сельскохозяйственными вредителями, минеральными удобрениями, красками, посылают пробы их в количестве от 100 до 1000г.
От больных животных при подозрении на отравление посылают: рвотные массы, желательно первые порции; мочу (все количество, которое удалось получить); кал в количестве 0,5 кг; содержимое желудка, полученное через пищеводный зонд; корма и вещества, которые могли явиться причиной отравления.
Если заподозрено, что отравление наступило вследствие поедания ядовитых растений, берут для ботанического анализа пробы растений. Для этого деревянную рамку с внутренним размером в 1 м2 накладывают на травостой луга или пастбища в местах выпаса скота. Все оказавшиеся внутри рамки растения срезают под корень. Если травостой однотипный, пробу с 1 га луга или пастбища берут в 3—5 местах, при разнотипном травостое количество проб увеличивают с целью большего охвата различных растений и посылают среднюю пробу.
Если пробу трав’, взятых для исследования, можно доставить в лабораторию в течение нескольких часов, траву посылают в сыром виде. В противном случае пробы сушат и доставляют сухими. Пересылают пробы трав в коробках или плетеных корзинах.
Пробы берет ветеринарный специалист или зоотехник.
Материал, взятый для химического исследования, нельзя обмывать и держать вместе с металлическими предметами; его отправляют в чистом, неконсервированном виде. Материал животного происхождения консервируют только в том случае, если он будет доставлен в лабораторию не ранее чем через 3—4 дня после взятия. Для консервирования материала применяют спирт-ректификат в соотношении 1 часть спирта на 2 части материала. Одновременно посылают и пробу спирта (не менее 50 г), которым консервирован материал.
Применять два консервирующих вещества нельзя, так как они сами являются ядами (хлороформ) или разрушают некоторые яды (формалин).
Упаковывают материал в чистые широкогорлые стеклянные или глиняные банки, плотно закрывающиеся стеклянными притертыми пробками, а если таких нет, чистыми, не бывшими в употреблении корковыми пробками или чистой писчей или вощеной бумагой.
Поверх пробки банку обертывают чистой бумагой., обвязывают тонким шпагатом (или толстой крепкой ниткой), концы которого скрепляют сургучной печатью.
На каждую банку наклеивают этикетку, на которой чернилами записывают, какие органы и в каком количестве (по массе) помещены в банку, вид и кличку животного, даты падежа и вскрытия трупа животного, указывают, какое подозревается отравление и кому принадлежит животное.
Взятый материал отправляют в лабораторию немедленно с нарочным.
Порядок оформления и отправки сопроводительных документов к материалу, направляемому на исследование.
На каждый отправляемый в лабораторию материал заполняют сопроводительный документ .
Сопроводительное письмо посылают в запечатанном конверте (одновременно с материалом) почтой или с нарочным.
В сопроводительном письме указывают: вид, пол и возраст животного, от которого взят материал для исследования, его номер или кличку, сколько банок с материалом, на какое исследование посылается материал, краткое описание клинических признаков и патологоанатомических изменений.
При посылке образцов корма указывают его название, дату взятия образца, с какого угодья. Если корм получен с завода или заготовительного пункта, указывают, с какого именно.
При необходимости к письму прилагают дополнительные сведения, в частности, какая помощь оказана животному, какие лекарственные средства применялись, с какого времени скармливали корм животным и т. д.
К сопроводительному письму на пробы (мазки) крови, направляемые в плановом порядке для серологического или гематологического исследования, прилагают опись проб в двух экземплярах.
Примерный образец формы сопроводительного документа к патологическому материалу
При этом направляется для________________________________________________________________________
Патологический материал (перечислить какой)_______________________________________________________
От___________________________________, принадлежащий_____________________
(вид и возраст животного)
(название хозяйства, фермы, отделения, фамилия владельца животного)
Дата заболевания животного_______________
Дата падежа ___________________________________________
Клиническая картина __________ ______________
Дата патологоанатомического вскрытия .
Предположительный диагноз ______
Дата отправки материала ________
К сожалению автор не указан, если вам известен автор, сообщите администратору
Мы сняли все запреты на копирование.
Копировать материалы могут все
Но скрыли часть информации и статей, которые станут доступны только после регистрации
Мы набираем команду по обслуживанию молочных ферм и комплексов по следующим направлениям:
1. Обрезка, расчитка и лечение заболеваний копыт.
2. Организация воспроизводства, искусственное осеменение, диагностика стельности и лечение генекологических заболеваний.
Также поможем в продаже ваших товаров: ветринарные препараты, иструмент или оборудование.
Если вы хотите оказывать услуги, проводить консультирование по одному из упомянутых направлений либо с нашей помощью увелиичить продажи в своем регионе, сообщите об этом администратору и сайт выступит посредником в организации мероприятия, а также свяжет потанциальных клиентов с Вами .
Приглашаем к сотрудничеству торговые организации. Производим связь с потенциальными клиентами, проводим рассылки по 5000 адресам с вашими предложениями. Ваши товары будут размещены в нашей аптеке. Присылайте свои условия на apteka@liveanimal.ru !
| evgenij@vetkrs.ru | ||||
| 8(910)8298480 8(960)5044249 | ||||
| Информация о документе | |
| Дата добавления: | |
| Размер: | |
| Доступные форматы для скачивания: |
Правила отбора и доставки проб патматериала в лабораторию.
Во всех случаях взятия и пересылки материала специалист обязан руководствоваться изложенными ниже правилами, а также соответствующими инструкциями по борьбе с болезнями животных.
Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и
Патологический материал необходимо брать стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого берут патологический материал, на месте разреза следует обжечь над пламенем или прижечь нагретой металлической пластинкой.
Патологический материал должен быть взят как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года, т.к. сразу же после заболевания (или впервые же 1-2 дня) барьерная роль кишечника значительно ослабевает, что наряду с повышенной проницаемостью кровеносных сосудов способствует диссиминации кишечной флоры.
Кроме того, по мере углубления инфекционного процесса количество вируса может снижаться в результате одновременного воздействия защитных сил организма.
Следует учитывать, что при многих вирусных инфекциях наблюдается феномен посмертной аутостерилизации, в результате чего вирус может быть вообще не обнаружен или его количество окажется очень незначительным.
Вторая причина необходимости экстренного взятия материала – избежать посмертных изменений в тканях, иначе они могут оказаться непригодными для бактериологических и вирусологических исследований.
Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:
от больных с выраженной клиникой с указанием температуры, частоты пульса и дыхания (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);
от убитых в агонии (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);
от выздоравливающих животных (кровь).
Взятые пробы следует как можно быстрее поместить в условия, обеспечивающие замедление процессов разложения материала. Такие условия обеспечивают низкие температуры.
Если патологический материал невозможно доставить в лабораторию в течение ближайших 24-30 часов, его посылают только в консервированном виде.
Патологический материал (органы или их части) консервируют 30-50%-ным раствором химически чистого глицерина на физиологическом растворе. Физиологический раствор предварительно стерилизуют при 120 0 С в течение 30 мин.
Материал можно консервировать также в стерильном вазелиновом масле. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве 4-5 раз, превышающем его объем. Консервированные образцы желательно хранить в холодильнике.
Небольшие трупы (поросят, мелких животных можно посылать целиком во влагонепроницаемой таре).
Трубчатые кости посылают на исследование в целом виде, очищенными от мышц и сухожилий. Кости завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью и пересылают в сейф — пакетах или в стерильных полиэтиленовых пакетах.
Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от фекальных масс, а концы кишечника перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями.
Кишечник помещают в банки с 30%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором поваренной соли. Объем консервирующей жидкости должен превышать объем взятого материала в 4-5 раз.
Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках, банках, которые закрывают пергаментной бумагой, пробками или в контейнерах.
Кал от трупов животных можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов, он должен быть доставлен в лабораторию не позднее 24 ч после его взятия.
Для исследования участков кожи берут наиболее пораженные ее кусочки размером 10×10 см и посылают в стерильной, герметически закупоренной посуде.
При взятии содержимого гигром (бурс) в области поражения выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70°-ным спиртом и обрабатывают 5%-ной настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.
Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Из каждой доли вымени берут последние порции молока по 10-15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.
У овец и коз пробы молока берут с помощью молочного катетера или путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом или смазывают 5%-ной настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска. После попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.
Пробы мочи берут катетером в стерильную посуду. При его отсутствии мочу получают при естественном мочеиспускании или, вызывая последнее, раздражением наружных половых органов.
Пробы слизи из половых органов животных берут стерильным марлевым тампонам (см. приложение) при помощи специальных инструментов конструкции Павловского, Жавордова, Казеева, а также применяемых при искусственном осеменении коров шприца-катетера или полистироловой пипетки, соединенной со шприцем.
Для получения смывов слизистой оболочки носовой полости, половых органов, конъюнктивы и др. полость орошают стерильным физиологическим раствором или солевым раствором Хенкса (см. приложение) и собирают стекающий раствор в емкости.
Иногда для получения смывов в полость вводят стерильный ватный тампон, смоченный физиологическим или солевым сбалансированным раствором. Тампоном тщательно протирают слизистую, извлекают его и помещают во флаконы с аналогичным раствором.
Мазки из носа, полости рта, прямой кишки, клоаки у птиц и т.д . берут при помощи стерильных ватных тампонов на довольно длинных стерильных деревянных палочках. После взятия мазка тампон помещают в пробирку, заполненную соответствующей жидкостью.
Наиболее часто для этого используют реактив Хенкса с антибиотиками (пенициллин, стрептомицин, нистатин) и белковым стабилизатором, например с 0,5% желатина или 0,5-1% альбумина бычьей сыворотки.
Взятие и пересылка материала
для исследования на паразитарные заболевания
Для копрологического исследования на гельминтозы — пробы фекалий от крупного, мелкого рогатого скота и свиней (10 г) берут рукой в резиновой перчатке из прямой кишки от 10%-ного поголовья ферм, но не менее 30 проб от возрастной группы или от каждой дойной коровы. Пробы доставляют в лабораторию в целлофановых мешочках или пергаментной бумаге на краю которых ставят номер пробы, с сопроводительным документом, в котором указывают хозяйство (комплекс), отделение, цех, вид и количество животных в них, на какой гельминтоз исследовать и дату взятия проб. При направлении на исследование проб от коров номера (клички) на упаковке и в описи должны соответствовать. От трупов в лабораторию направляют содержимое тонкого кишечника.
От лошадей пробы фекалий берут от 5%-ного поголовья табуна, но не менее 25 проб.
Для прижизненной диагностики гельминтозов плотоядных в лабораторию направляют пробы свежих фекалий массой около 5 г отдельно от каждого животного, для посмертной – труп животного. Материал упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию фекалии не позднее 24 часов после взятия, труп – не позднее 5 часов после гибели.
Для исследования на эхинококкоз, альвеококкоз в лабораторию направляют:
— от промежуточных хозяев (павших или убитых) — пораженные органы (печень, легкие, другие внутренние органы и ткани);
— от дефинитивных хозяев- пробы фекалий или тощую кишку с содержимым от павших или убитых животных.
Отобранный патологоанатомический материал упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора в течение 4-6 часов.
Для исследования на телязиоз в лабораторию направляют содержимое конъюктивального мешка, полученное после промывания из спринцовки 3%-ным раствором борной кислоты или физиологическим раствором. Отобранные пробы выливают в пробирки, закрывают резиновыми пробками и доставляют в лабораторию в день взятия.
Для исследования на акантоцефалезы в лабораторию направляют свежие фекалии (пробы берут от 10% поголовья свиней или от 5% поголовья птиц), содержимое кишечника от трупов свиней, трупы птиц целиком.
В лабораторию для исследования на эймериозы направляют:
— от 20-30 подозреваемых в заболевании животных из прямой кишки пробы фекалий до 5 г;
— от павших или вынужденно убитых – отрезки пораженных тонких и толстых кишок, перевязанные с обоих концов;
— от пушных зверей, кроликов и птиц – групповые пробы фекалий или трупы целиком.
Отобранный патологический материал и пробы фекалий упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора, а трупы – не позднее 4-6 часов после гибели.
Для исследования на трипанозомоз (случную болезнь) лошадей в лабораторию направляют: соскобы со слизистой оболочки влагалища, мочеиспускательного канала, взятые уретральной ложкой; выпот из надрезов отеков и бляшек, собранный шприцом в стерильные пробирки; для реакции связывания комплемента сыворотку крови нативную или консервированную одним из общепринятых методов. Патологический материал доставляют в термосе со льдом и исследуют не позднее 6 часов, а сыворотку крови – не позднее 2 дней после взятия. Для микроскопического исследования на месте (в хозяйстве) делают раздавленные капли из экссудатов и соскобов.
Для микроскопического исследования Су-ауру (трипанозомоз) лошадей, собак приготовляют мазки и толстые капли крови из уха. Для установления диагноза необходимо материал брать повторно. В лабораторию направляют (или исследуют на месте) сыворотку крови или цельную кровь для исследования методом постановки формолреакции. От трупа берут кусочки селезенки, печени, почек, костного мозга и лимфатических узлов, делают мазки и посылают в лабораторию. Мазки готовят не позже чем через 6-12 часов после смерти животного.
Для бактериологического исследования в лабораторию направляют:
а) от коров, нетелей и овцематок — абортированный плод (целиком с плодными оболочками), а от особенно крупных плодов -голову, желудок, печень, легкие, плаценту (или часть ее). В случае непригодности плода, плодовых оболочек и плаценты для исследований в лабораторию направляют слизь из шейки матки, стерильно взятую впервые 3-4 дня после аборта (при отсутствии гнойных выделений из матки) или в период охоты. Слизь берут также от животных, у которых наблюдают расстройство полового цикла (в период охоты);
б) от быков и баранов — препуциальную слизь, сперму секрет придаточных половых желез, взятые с соблюдением правил асептики и антисептики. При исследовании быков обработку полости препуция бактерицидными средствами прекращают за 30 дней до исследования;
в) от животных, убитых с диагностической целью, влагалище, матку, лимфатические узлы тазовой полости.
Для исследования в реакции агглютинации берут цервиковагинальную слизь неоднократно перегуливающих коров и телок, не имеющих выделений из влагалища (гноя, крови и т.п).
Патологический материал доставляют в лабораторию в закрытой таре со льдом.
При отправке абортированных плодов следует иметь в виду, что они пригодны для исследования впервые 10-12 ч после аборта. При необходимости плоды замораживают и отправляют не позднее чем через двое суток после аборта.
Пробы спермы, секрета, препуциальной и влагалищной слизи, полученные от животных, транспортируют в термосе со льдом и доставляют в лабораторию не позднее 6 ч с момента взятия проб.
Упаковка и пересылка патологического материала
Трупы мелких животных, части трупов животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным.
Посылаемый материал должен быть тщательно упакован, чтобы предупредить возможность рассеивания инфекции в пути.
Упаковка должна быть трехслойной:
1) емкость, содержащая пробу, должна быть водонепроницаемой, а в случае использования подвижных буферных растворов — герметичной;
2) внутренняя упаковка должна быть водонепроницаемой с достаточным количеством поглощающего материала на случай утечки для впитывания всей жидкости, содержащейся в пробе (вата, бумага);
3) наружная упаковка предназначена для защиты внутренней от физических повреждений и воды (герметичный термоконтейнер).
При перевозке наиболее надежным способом консервирования вируссодержащих проб является их замораживание. При транспортировке проб на дальние расстояния следует использовать сухой лед. В качестве емкости для материала и льда используют пластмассовые контейнеры, легкие по массе, с хорошей теплоизоляцией, небьющиеся и прочные.
Следует избегать колебаний температуры, особенно резких ее перепадов, а также повторных замораживаний и оттаиваний. Температура является определяющим фактором, влияющим на выживаемость вируса во время перевозки. Титр вируса снижается очень быстро, если температура среды, в которой его транспортируют, поднимается выше 20 0 С; у большинства вирусов это снижение происходит настолько быстро, что превращает последующее выделение вируса в пустую трату времени.
Если замораживание невозможно, то следует использовать один из следующих консервирующих растворов (см. приложение)
Кроме правильно выбранного материала, взятого в подходящие сроки и пересланного с соблюдением необходимых условий, лаборатория нуждается в определенной информации, касающейся больного и диагностических проб. Вместе с пробами направлять подробное описание динамики заболевания животного (время появления, быстрота охвата, процент заболеваемости, наличие летальных исходов или тяжелых осложнений, период переболевания, клиническая картина, протокол вскрытия, чем лечили, прививали).
На взятый материал составляют сопроводительный документ (см. приложение)
Если при вскрытии посылки в лаборатории обнаруживается несоответствие сопроводительному документу или порча патологического материала, то обязательно составляют акт, копию которого отправляют ветеринарному врачу, направлявшему материал в лабораторию.
Отбор проб мозга для исследования на бешенство
При подозрении на бешенство необходимо, когда это возможно, присылать целую голову, ее следует упаковать во влагонепроницаемый пакет, поместить в металлический контейнер и доставить в лабораторию в более короткие сроки.
Отбирать пробы мозга необходимо строго соблюдать меры личной безопасности: надевать резиновые перчатки, халаты с нарукавниками, резиновый или полиэтиленовый фартук, резиновые сапоги, защитные очки, защитную маску на лицо.
Отделить голову от туловища и хорошо зафиксировать. Снять кожу и мышцы с черепной коробки, сделав надрезы между глазными впадинами и от них в сторону затылка. С помощью пилы, топора, ножниц и пинцета снять черепную коробку. Отделить основные нервы, изъять мозг и поместить его на кювету или доску. Отобрать пробы коры больших полушарий и основания спинного мозга.
Для исследования на бешенство необходимо брать пробы аммоновых рогов. Для этого нужно рассечь продольными разрезами каждое центральное полушарие на расстоянии 2 см (для собак) от средней линии мозга, удалить верхние части до щели (пространства), в котором находятся аммоновы рога, представляющие собой полуцилиндрические тела белого цвета.
Нужно взять несколько кусочков аммоновых рогов и основания спинного мозга. Общий вес каждой пробы должен быть 5-10 г. Пробы мозга для исследования на бешенство обычно консервируют глицерином и маркируют с пометкой «бешенство».
Вскрывать подозрительных на заболевание бешенством животных в полевых условиях запрещено!
Отбор проб мозга при прионных инфекциях( губкообразная энцефалпатия крупного рогатого скота, скрепи овец и коз, трансмиссивная энцефалопатия норок )
При выполнении работ по отделению, упаковке и транспортировке головы необходимо исключить травмирование рук и попадание брызг крови на кожу и в глаза. Чтобы избежать этого, надевают халат, прорезиненный фартук, анатомические перчатки из плотной резины, резиновые сапоги, водонепроницаемый капюшон и защитную маску из оргстекла, закрывающую лицо от брызг крови.
Голову отделяют от шеи по атланто-затылочному сочленению. С дорсальной части головы крупного рогатого скота удаляют кожу.
Далее зажимают голову в тиски, осторожно, чтобы не повредить мозг, распиливают лобную кость с помощью анатомической пилы (см. в приложении рис: разрез 1).
Затем производят надрезы лобной кости с каждой стороны от точек, находящихся на оси глазных ям, продлевая их каудально до наружных слуховых проходов. Продлевая эти разрезы каудально до большого затылочного отверстия также осторожно, чтобы исключить повреждение мозга (см. в приложении рис: разрез 2)..
Делают сагиттальный разрез посередине лобной и затылочной костей до большого затылочного отверстия (см. в приложении рис: разрез 3). Затем разделяют и удаляют распиленные левую и правую части черепной коробки. Рассекают и снимают твердую мозговую оболочку.
Перевернуть голову, чтобы под действием силы тяжести мозг отделился от основания черепа. Продолжить работу, продвигаясь от каудального надреза вперед; для перерезания нервов вентральной стороны черепа использовать скальпель.
Извлечь мозг целиком и поместить его в ударопрочную герметичную емкость с фиксирующим раствором (см. приложение), при этом объем раствора должен быть в 10 раз больше объема мозга.
По окончании работ инструменты, которыми проводили отделение и распил головы, укладывают в стерилизатор с 2%-ным раствором гипохлорита натрия не менее чем на 1 час (инструменты должны быть погружены в раствор полностью). Сапоги, фартук, капюшон, маску и перчатки обрабатывают 2%-ным раствором гипохлорита натрия (протереть раствором, оставить на 1 час, затем тщательно вымыть водой), халаты обрабатывают автоклавированием при 134-138 0 С в течение 20-30 минут, Горючие отходы сжигают.
Отобранный материал необходимо доставить во Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных МСХ РФ по адресу: 600900 Владимир,
пос. Юрьевец, тел./факс (0922) 24-36-75 или в ГУ «Псковская областная ветеринарная лаборатория» по адресу: г. Псков, ул. Металлистов, 29
Африканская чума свиней отбирают трубчатую кость и селезенку доставляют в замороженном виде в термоконтейнере (0+4 0 С).
Классическая чума свиней отбирают трубчатую кость, селезенку, лимфоузлы доставляют в замороженном виде в термоконтейнере (0+4 0 С).
Взятие крови для серологических исследований
Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют 70%-ным спиртом.
Нужно следить, чтобы кровь стекала в пробирку струей, а не каплями, кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизуется и часто дает неправильные результаты при исследовании.
У лошадей, крупного рогатого окота, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.
У свиней кровь берут из уха (иглой со шприцем), из кончика хвоста, из передней полой вены (лучше в спинном положении) или из глазной вены. Хвост предварительно обмывают водой с мылом и дезинфицируют 70%-ным спиртом. Затем кончик рассекают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают алюминевыми квасцами.
У птиц кровь берут из подкрыльцовой вены или из гребешка.
Кровь у лисиц и песцов берут из бедренной вены, у норок путем отсечения подушечки среднего пальца задней лапы: или кончика хвоста.
Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота, лошадей, овец, свиней; от пушных зверей и птиц по 1-2 мл.
Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают 30-60 мин при 20-30°С или 37-38°С, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем пробирки выдерживают при 4-10°С 20-24 ч.
Отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки, закрывают пробками и направляют в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.
Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.
На каждой пробе крови или сыворотки указывают ее номер или кличку животного, или фамилию владельца животного.
Пробы направляют с сопроводительной в двух экземплярах (см.приложение)
Пробирки с кровью и сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.
Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзли.
Взятие крови для гематологических исследований
Кровь для гематологических исследований берут из ярёмной или каудальной (хвостовой) вены в специальные системы забора крови с антикоагулянтом или в пробирки с антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА-динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл 10 %-ного раствора на 1 мл крови, гепарин (5ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл).
Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 0 С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.
Пироплазмидозы и анаплазмозы.
В лабораторию для подтверждения диагноза на пироплазмоз, тейлериоз, франсаиеллез, бабезиоз, нутталлиоз, анаплазмозы направляют:
— от подозреваемых в заболевании или больных животных — тонкие мазки крови из периферических сосудов уха, хвоста или венчика, на тейлериоз дополнительно – мазки из пунктатов лимфатических узлов;
— от павших или убитых – часть печени, легких, селезенки, почки, сердца, головного мозга и лимфатические узлы.
Мазки крови берут в период развития симптомов болезни, при повышенной температуре, до применения специфического лечения. Перед отбором материала у животного шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу тщательно протирают в начале ватным тампоном, смоченным в 70%-ном растворе спирта, а затем сухим. Стерильной иглой делают прокол вены ушной раковины или ножницами надрезают край верхушки уха или хвоста.
К свободно выступившей капле крови легко прикасаются поверхностью сухого обезжиренного предметного стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают пальцами левой руки в горизонтальном положении. Шлифованным краем другого предметного стекла или покровного стекла прикасаются к капле крови. Как только кровь равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности стекла справа налево под углом 45°. Ширина мазка должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови. От каждого животного готовят 2 мазка. Готовые мазки крови высушивают на воздухе. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке стерилизатора. Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкие, равномерные, достаточной длины и заканчиваться за 0,5-1,0 см от края стекла.
При взятии пунктата из лимфатического узла животное хорошо фиксируют, на месте пункции выстригают шерсть, кожу протирают ватным тампоном, смоченным в растворе спирта или настойке йода. Левой рукой оттягивают лимфатический узел и удерживают большим и указательным пальцами левой руки. Затем вглубь узла вводят стерильную иглу, надевают на нее шприц и поршнем отсасывают лимфу. После шприц отсоединяют, иглу извлекают, а содержимое шприца выдавливают поршнем на предметное стекло, делая тонкие мазки, которые высушивают на воздухе.
На высушенных мазках крови и пунктата острым предметом или простым карандашом пишут номер, вид животного и дату приготовления мазка.
Материал от павших или убитых животных отбирают до наступления трупного окоченения.
Мазки упаковывают в чистую бумагу и доставляют в лабораторию в день отбора.
Для исследования животных на чесотку (накожниковую, зудневую и кожеедную) в лабораторию для микроскопического исследования доставляют соскобы с кожи. Для обнаружения накожников и зудней берут соскобы со свежих, неуплотнившихся очагов поражения (не менее чем с 2-3 мест на границе между пораженной и здоровой кожей, а для обнаружения кожеедов – в центре поражения). Перед взятием соскобов вокруг очага поражения выстригают шерсть. Для исследования на зудневую чесотку берут глубокие соскобы до появления сукровицы. Взятый материал помещают в баночку, плотно закрывают крышкой и
этикетируют с указанием наименования хозяйства, фермы, отары, номера животного, даты взятия материала.
Для исследования на демодекоз в лабораторию направляют:
— содержимое 3-5 узелков диаметром от 1 до 18 мм, при отсутствии узелков – соскобы с кожи;
— от консервированных кож крупного рогатого скота, овец, коз и свиней – соскобы с пятен, расположенных в области головы, шеи, плеча, лопаток, боков, спины.
Перед отбором материала у крупного рогатого скота, овец, коз, свиней и собак выстригают волосяной покров вокруг узелков, дезинфицируют кожу 0,5%-ным раствором карболовой кислоты и делают кровопускательной иглой прокол узелка на глубину 1-3 мм. Пальцами захватывают узелок так, чтобы ранка была в центре, выдавливают сметанообразное содержимое, вытаскивают иглу и мандреном выталкивают содержимое из полости иглы в стеклянный флакон с 0,5 см 3 вазелинового, растительного масла или физиологического раствора и закрывают пробкой.
От животных, больных дерматомикозами (стригущий лишай, парша) , патологический материал берут с периферии очагов поражения, не подвергавшихся медикаментозному лечению. Корочки с остатками волос, волосы выдергивают пинцетом из пораженных участков (по возможности менее загрязненных) и помещают в стеклянную баночку с крышкой. Образцы снабжают этикеткой с указанием области, района, хозяйства, возраста и степени поражения животного, а также даты взятия материала и доставляют для исследования в лабораторию.
Отбор и транспортировка рыб для бактериологического, вирусологического, паразитологического и химико-токсикологического исследования.
Больных или подозрительных по заболеванию инфекционными и инвазионными болезнями рыб доставляют в лабораторию в живом виде .
Для исследования отбирают 10-20 рыб с явно выраженными клиническими признаками болезни, согласно МУ по паразитологическому исследованию рыб № 044-3 от 31.01.90 г.
Рыб перевозят в чистых молочных бидонах, ваннах или других емкостях, предназначенных для перевозки живой рыбы, заполненных на 3/4 объема водой из того же
водоема, откуда взята рыба, или из артезианской скважины. Рыба, доставленная в лабораторию в бумаге, марле и др. упаковочных материалах, для исследования не пригодна. Летом при длительной транспортировке воду с рыбой постепенно охлаждают до температуры 12-15°С, добавляя кусочки льда. Чтобы не вызвать температурного шока и простудных явлений, нельзя пересаживать рыбу в воду, имеющую температуру ниже, чем в водоеме (на 7°С и более).
При отсутствии возможности доставить живую рыбу, у крупных рыб берут кусочки пораженных органов и тканей, помещают их в стерильную стеклянную посуду, заливают
стерильным 40%-ным водным раствором глицерина, закрывают пробкой, заливают парафином и направляют с нарочным в лабораторию. Жидкий патологический материал (кровь, экссудат и др.) доставляют в лабораторию в запаянных стерильных пастеровских пипетках.
Летом патологический материал пригоден для бактериологического исследования в течение 2 часов после его взятия.
Для исследования на инвазионные заболевания рыбу доставляют в живом или свежеуснувшем виде.
Для химико-токсикологических исследований в лабораторию доставляют живых или недавно погибших рыб, не менее 5 экземпляров каждого вида. Одновременно направляют рыб того же вида из благополучного водоема для контрольных исследований. Если доставить живых или свежеуснувших рыб невозможно, а также в теплое время года, рыб охлаждают на льду, промораживают.
материала от трупов павших и больных животных при подозрении на отравление.
При подозрении на отравление животных в лабораторию направляют материал от трупов павших животных для химических исследований. Одновременно с целью определения источника отравления посылают все корма (по 1 кг каждого вида корма), которые скармливали животному, с указанием периода скармливания каждого вида корма. Кроме этого, обязательно посылают остатки кормов из кормушки.
Для химических исследований в лабораторию посылают в отдельных банках следующий материал:
а) часть пищевода и пораженную часть желудка с содержимым (в количестве 0,5 кг), а от крупного и мелкого рогатого скота – часть пищевода и сычуга и содержимое из разных мест сычуга, рубца (по 0,5 кг).
Желудок и его содержимое берут в следующем порядке.
При вскрытии трупа после осмотра внутренних органов перевязывают лигатурами пищевод и двенадцатиперстную кишку вблизи стенки желудка (в двух местах по две перевязки) и перерезают между перевязками. Желудок извлекают и кладут в чистую стеклянную посуду (от крупных животных на чистое место), затем вскрывают его по передней стенке.
Содержимое желудка предварительно (не выбирая из желудка) перемешивают, после чего осторожно, чтобы не загрязнить, берут часть его. Для перемешивания нельзя использовать металлические предметы;
б) отрезок тонкого отдела кишечника (длиной до 0,5 м) из наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
в) отрезок толстого отдела кишечника (длиной до 40 см) из наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);
г) часть печени (0,5-1 кг) с желчным пузырем (от крупных животных), а от мелких животных печень целиком;
ж) скелетную мускулатуру в количестве 0,5 кг;
Кроме того, в зависимости от особенностей предполагаемого отравления дополнительно посылают:
при подозрении на отравление метгемоглобинобразующими ядами (нитритами, нитратами с их редукцией в нитриты, бертолетовой солью, красной кровяной солью и др.) — сгуски крови 10 мл;
при подозрении на отравление через кожу (in vivo) – часть кожи, клетчатки и мышцы из места предполагаемого введения яда;
при подозрении на отравление газами – наиболее полнокровную часть легкого (в количестве 0,5 кг), трахею, часть сердца, 200 мл крови, часть селезенки и головного мозга. От мелких животных (в том числе и от птиц) берут органы целиком.
При вскрытии отрытого из земли трупа животного надо взять: сохранившиеся внутренние органы в количестве до 1 кг, скелетную мускулатуру в количестве 1 кг, землю под трупом 0,5 кг из двух-трех мест.
Для гистологического исследования посылают небольшие кусочки, размером 1×3×5 см, следующих органов: печени, почек (обязательно с наличием коркового и мозгового слоев), сердца, легкого, селезенки, языка, пищевода, желудка, тонкого и толстого отделов кишечника, скелетной мускулатуры, лимфоузлов, головного мозга (половину мозга в стерильной банке).
Кусочки должны быть взяты из различных участков органов на границе пораженной и непораженной части ткани и тотчас же помещены в 10%-ный раствор формалина из расчета на 1 часть патологического материала 15 частей раствора формалина.
При подозрении на отравление веществами, употребляемыми для борьбы с сельскохозяйственными вредителями, минеральными удобрениями, зооцидами посылают пробу их в количестве от 100 до 1000 г. В случае отсутствия этих веществ на момент отправки в лабораторию необходимо в сопроводительных документах указать их название.
От больных животных при подозрении на отравление посылают: рвотные массы, желательно первые порции; мочу – все количество, которое удалось получить; кал – в количестве 0,5 кг; содержимое желудка, полученное через пищевой зонд; корма и вещества, которые могли явиться причиной отравления. При подозрении отравления нитратами, нитритами дополнительно посылают слюну, носовую слизь (сколько получается отобрать), цельную кровь (со стабилизатором) 10 мл.
При подозрении, что отравление наступило вследствие поедания ядовитых растений, берут для ботанического анализа пробы растений в следующем порядке: деревянную рамку с внутренним размером 1 м 2 накладывают на травостой луга или пастбища в местах выпаса скота; все оказавшиеся внутри рамки растения срезают под корень. Если травостой однотипный, пробу с 1 га луга или пастбища берут в 3-5 местах, а если травостой разнотипный, количество проб увеличивают с целью большего охвата различных растений и посылают среднюю пробу.
Если пробу трав, взятых для исследования, можно доставить в лабораторию в течение нескольких часов, то траву посылают в сыром виде; при длительной пересылке пробы сушат и доставляют в сухом виде. Пересылают пробы трав в коробках, но не в полиэтиленовых пакетах.
Пробы должны быть взяты ветеринарным специалистом или зоотехником.
Материал, взятый для химических исследований, нельзя обмывать и держать вместе с металлическими предметами; его отправляют в чистом, не консервированном виде.
Упаковывают материал в чистые, широкогорлые стеклянные банки, плотно закрывающиеся стеклянными притертыми пробками, а при отсутствии их – чистыми, не бывшими в употреблении полиэтиленовыми крышками или чистой вощеной бумагой.
Поверх крышки банку обертывают чистой бумагой, обвязывают тонким шпагатом (или толстой крепкой ниткой), концы которого приклеивают этикеткой с печатью организации и подписью специалиста, отобравшего материал. На каждую банку наклеивают еще этикетку, на
которой записывают, какие органы, и в каком количестве (по весу) помещены в банку, вид и кличку животного, дату падежа и вскрытия трупа животного, указывают, какое подозревается отравление и кому принадлежит животное.
Взятый материал должен быть отправлен в лабораторию немедленно с нарочным. При подозрении на отравление нитратами, нитритами, синильной кислотой патологический материал необходимо доставить в течение 2 часов после смерти животного.
источник